Un ensayo de microdilución de caldo in vitro para el cribado de compuestos antifúngicos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:48 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de microtitulación y agregue diluciones en serie de nuevos péptidos antimicrobianos o AMP, los compuestos de prueba.
Designe un subconjunto de pozos como controles de crecimiento y agregue agua estéril sin los AMP.
Agregue un hongo patógeno suspendido en medios de crecimiento en pocillos seleccionados.
Agregue solo el medio, desprovisto del hongo, en un subconjunto de pocillos designados como controles en blanco.
Selle la placa e incube en condiciones húmedas propicias para el crecimiento de hongos.
Después de la incubación, observe los pocillos bajo un microscopio.
Los controles de crecimiento parecen turbios debido al crecimiento de hongos en ausencia de AMP. La turbidez en todas las diluciones de un AMP indica su ineficacia contra el hongo.
Los controles en blanco, desprovistos de crecimiento de hongos, parecen claros. Compare los pocillos de prueba con los controles en blanco para confirmar la ausencia de crecimiento, lo que indica la actividad antifúngica de los AMP.
La concentración más baja de un AMP que inhibe el crecimiento de hongos se denomina concentración inhibitoria mínima o MIC.
El ensayo antifúngico se realiza por triplicado en microplacas de poliesti
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