Determinación de la función de las células similares a los neutrófilos en la sensibilidad de las células de linfoma a un fármaco de prueba

Tome una placa de pocillos múltiples que contiene monocultivos esferoides 3D de células de linfoma, glóbulos blancos cancerosos y cocultivos de linfoma y células similares a neutrófilos en una matriz de membrana basal.

Agregue un fármaco de prueba que se una a la tubulina intracelular e interrumpa la polimerización de los microtúbulos, lo que resulta en apoptosis celular.

En el cocultivo, el contacto directo con las células del linfoma activa las células similares a los neutrófilos, induciendo la secreción de citoquinas.

Estas citocinas interactúan con los receptores de las células del linfoma, desencadenando cascadas de señalización aguas abajo y regulando al alza la expresión de proteínas antiapoptóticas, promoviendo la supervivencia celular.

Deseche el papel. Agregue un tampón de disociación para interrumpir la adhesión celular.

Raspe los esferoides e incube bajo agitación. Transfiera la suspensión a los tubos y continúe agitando para formar suspensiones unicelulares.

Introduzca un cóctel de anticuerpos conjugados con fluoróforos que etiquete el linfoma y las células similares a los neutrófilos.

Agregue anexina V marcada con fluoróforo y yoduro de propidio para etiquetar las cél