Ensayo para evaluar la inmunodominancia en las respuestas citotóxicas de los linfocitos T

Comience con células diana marcadas con colorante fluorescente que presenten un epítopo peptídico no reactivo o epítopos peptídicos derivados de antígenos tumorales con inmunogenicidad variable.

Estas células exhiben intensidades de fluorescencia variables (baja, intermedia y alta) correspondientes a la presentación de epítopos peptídicos no reactivos, subdominantes e inmunodominantes, respectivamente.

Administrar la suspensión celular por vía intravenosa a un ratón sensibilizado.

Las células inyectadas viajan al bazo que contiene poblaciones de células inmunitarias, incluidos los linfocitos T citotóxicos o CTL.

Dentro del bazo, los CTL interactúan con los epítopos de las células diana.

Los epítopos inmunodominantes, al ser más inmunogénicos, desencadenan una respuesta inmune robusta de CTL, liberando sustancias citotóxicas y dando como resultado una lisis celular fluorescente de alta intensidad.

Recoge el bazo del ratón y destrúyelo mecánicamente. Añadir un tampón de lisis para eliminar los glóbulos rojos y filtrar la suspensión.

Centrifugar y resuspender el pellet celular.

Clasifique las células con un clasificador de células activado por fluorescencia. La reducción de las célula