Un ensayo para estudiar la formación de biopelículas inducida por sales biliares a través de la detección de matrices de EPS
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:50 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples que contenga bacterias entéricas patógenas en un medio de crecimiento.
El medio en los pocillos seleccionados contiene sales biliares, o moléculas anfipáticas con actividad similar a la de un detergente, que imitan las duras condiciones de crecimiento.
Las sales biliares alteran la membrana bacteriana y causan daños al ADN y las proteínas.
Como mecanismo contrario, las bacterias forman una biopelícula, una comunidad bacteriana estructurada encerrada en una matriz autoproducida de sustancias poliméricas extracelulares, o EPS, que contiene polisacáridos, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos de origen microbiano.
La capa de EPS protege a las bacterias de la exposición a las sales biliares.
Después de la incubación, aspire el medio para eliminar las bacterias que flotan libremente.
Tratar con un tampón de fijación para preservar la arquitectura de la biopelícula y lavar para eliminar el exceso de tampón.
Agregue concanavalina A marcada con fluorescencia, una lectina que se une a los polisacáridos EPS, etiquetando la biopelícula. Lavar para eliminar el exceso de Concanavalina A.
Con un lector de placas, mida la fluorescencia. Una mayor intensidad de
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