Detección de desmontaje de biofilm mediante un ensayo de dispersión

Comience con una placa de varios pocillos que contenga una biopelícula bacteriana, bacterias encapsuladas dentro de la sustancia polimérica extracelular protectora o EPS.

Aspirar el medio para eliminar las bacterias no adherentes y lavar.

Trate los pocillos que contienen biopelículas con tampón solo, tampón con glucosa, tampón con sales biliares o tampón con glucosa y sales biliares.

Los tratamientos con tampón y glucosa favorecen la liberación de enzimas bacterianas que degradan el EPS del biofilm.

Esto da como resultado el desmontaje de la biopelícula, liberando las bacterias.

Mientras que las sales biliares y una combinación de sales biliares y tratamientos con glucosa imitan las condiciones de estrés y retienen las bacterias dentro del EPS protector.

Transfiera el sobrenadante de cada pocillo a una placa nueva de varios pocillos.

Detectar sobrenadantes diluidos en placas de agar e incubar.

Enumere las colonias bacterianas y determine la dispersión bacteriana para cada tratamiento.

Una mayor dispersión con tratamientos de tampón y glucosa en comparación con los tratamientos de sales biliares indica el desmontaje de la biopelícula.

Registre los valores de OD₆₀₀ de la placa de bio