Análisis en tiempo real de la migración de células T residentes en diferentes regiones tumorales mediante microscopía confocal
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:23 min. • July 8th, 2025
Comience con un corte de tumor de pulmón que contenga células T residentes.
Las células T migran a través del microambiente tumoral e interactúan con las células tumorales y los elementos del estroma, realizando funciones inmunitarias.
La composición del microambiente tumoral influye fuertemente en el desplazamiento y la velocidad de las células T.
Agregue distintos anticuerpos acoplados fluorescentemente para marcar células T, células tumorales y elementos estromales en el microambiente.
Agregue DAPI, que infiltra células con una membrana plasmática dañada para teñir el núcleo, lo que permite la visualización de regiones necróticas dentro del tumor.
Observe la muestra teñida bajo un microscopio confocal.
Con una luz de fluorescencia adecuada, seleccione una región tumoral de interés que contenga células T residentes. Evaluar la viabilidad celular mediante la evaluación de células positivas para DAPI.
Para el análisis en tiempo real, defina intervalos de tiempo y tiempo total de grabación.
Para capturar imágenes de pila z, comience a una profundidad inferior a las células T etiquetadas y capture imágenes en varios intervalos de tiempo.
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