Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:37 min. • July 8th, 2025
Tratar cultivos neuronales con concentraciones crecientes de una toxina de prueba.
La toxina ingresa a las células y se libera en el citosol.
Dependiendo de su potencial, la toxina puede prevenir la fusión vesicular, inhibiendo la liberación de neurotransmisores.
Reemplace el medio con un tampón que contenga compuestos neurofarmacológicos específicos para bloquear los potenciales de acción neuronales.
Coloque la placa de cultivo en una etapa de electrofisiología. Para comenzar a grabar, conecte un soma neuronal con una pipeta que contenga un electrodo de registro.
Aplique presión negativa constante para aspirar una pequeña porción de membrana, formando un gigaseal, un sello hermético que garantiza una interferencia mínima durante la grabación.
Mantenga un voltaje de membrana constante para medir las corrientes neuronales.
Aplicar pulsos de presión negativa para romper la membrana, estableciendo contacto directo entre la neurona y la pipeta.
Registre las corrientes producidas en la neurona debido a la captación de neurotransmisores, denominados mEPSC.
Una disminución en la frecuencia de mEPSC con una mayor exposición a toxinas indica la inhibición de la liberación de neurotransmisor
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