Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:22 min. • July 8th, 2025
Comience con un tubo que contenga vectores separados para los genes de anticuerpos de cadena pesada y cadena ligera.
Agregue un reactivo de transfección para formar complejos con los vectores.
Transfiera esta mezcla a células huésped de mamíferos e incube para su internalización.
Agregue un agente antiaglutinante para promover la distribución uniforme de las células transfectadas, mejorando la recuperación y el crecimiento celular.
Agregue una solución antibacteriana y antimicótica para evitar la contaminación.
Dentro de la célula huésped, los vectores se integran en el genoma del huésped.
Después de la transcripción de genes, los ARNm individuales salen del núcleo y se someten a traducción para formar cadenas de anticuerpos nacientes.
El plegado y la modificación adecuados de las cadenas nacientes producen cadenas pesadas y ligeras.
Estas cadenas se combinan para formar anticuerpos completamente funcionales, que luego se liberan en el medio extracelular.
Coseche el medio y centrifuge. Filtra el sobrenadante.
Pasar el filtrado a través de una columna de purificación que permite la unión selectiva de los anticuerpos.
Usando un tampón de elución, eluya los anticuerpos purificados.
Cu
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