Ensayo de activación artificial in vitro para estudiar la activación del receptor Fc por anticuerpos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:32 min. • July 8th, 2025
Tome una suspensión de células asesinas naturales o NK.
Agregue anticuerpos monoclonales anti-CD20 e incube.
En ausencia de células cancerosas diana que expresen el antígeno CD20, la región Fc de los anticuerpos se une a los receptores FcγRIIIa en la superficie de las células NK.
Después de la incubación, agregue medios refrigerados. Centrifugar y eliminar los anticuerpos no unidos.
A continuación, agregue anticuerpos de cadena ligera κ antihumanos. Incubar.
Estos anticuerpos secundarios se unen a la cadena ligera κ de los anticuerpos monoclonales.
La reticulación de anticuerpos imita la unión del antígeno diana, desencadenando una cascada de señalización intracelular.
Esto provoca una estimulación artificial de las células NK en ausencia de células cancerosas.
Las células NK activadas experimentan un reordenamiento citoesquelético y liberan gránulos citotóxicos.
Además, las células producen quimiocinas y citocinas.
Después de la duración deseada, agregue medios enfriados para detener la estimulación celular.
Centrifugar el tubo. Recoja el sobrenadante y el sedimento celular para el análisis posterior de las funciones de las células NK efectoras mediadas por anticuerpos.
Dispense 1
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