Un ensayo para detectar autoanticuerpos en suero humano utilizando un cultivo neuronal del hipocampo

0 visualizaciones • 3:52 min. • July 8th, 2025

Tomemos el hipocampo embrionario de rata.

Agrega tripsina. Incubar para mediar la descomposición de la matriz tisular, aflojando las células del hipocampo.

Diluir con un tampón. Incubar para una digestión enzimática continua con tripsina.

A continuación, transfiera la masa de tejido a un tubo que contenga medios. Pipetear repetidamente para la disociación mecánica en células individuales.

Células de semillas en cubreobjetos recubiertos de poli-L-lisina dentro de placas de cultivo.

incubar. Las células del hipocampo se adhieren a las superficies recubiertas. Las neuronas desarrollan una laminilla y extienden neuritas menores.

Además, las neuritas crecen con procesos axonales y dendríticos, formando una red neuronal.

Las neuronas maduras expresan receptores excitadores sinápticos, receptores de N-metil -D-aspartato o NMDAR.

Después de la incubación, lave los cubreobjetos con medios.

Agregue un suero diluido para pacientes con encefalitis autoinmune. Los autoanticuerpos se unen a los NMDAR neuronales.

Lavar con tampón y luego arreglar las celdas.

Agregue anticuerpos secundarios marcados con fluoróforo que se unan a los autoanticuerpos unidos a NMDAR.

Lavar con tampón. Coloque el cubre

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