Ensayo para medir el título de anticuerpos neutralizantes específico para el virus respiratorio sincitial
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:01 min. • July 8th, 2025
Tome suero humano diluido en serie e inactivado por calor que contenga virus respiratorio sincitial o anticuerpos neutralizantes específicos del VRS.
Agrega la suspensión viral. Los anticuerpos neutralizan los virus de una manera dependiente de la dilución.
Introduzca la mezcla en las monocapas de células epiteliales humanas e incube para la adsorción viral.
Deseche la mezcla. Agregue medios que contengan carboximetilcelulosa, formando una capa semisólida. Incubar.
El VRS utiliza la maquinaria de la célula huésped para sintetizar ARN viral y proteínas, que posteriormente se ensamblan y brotan como viriones individuales.
Las células infectadas eventualmente mueren. La carboximetilcelulosa restringe el movimiento del virus, causando infección localizada y muerte celular, formando placas.
Elimina la superposición.
Fije las células con un tampón que contenga acetona. Introduzca un tampón de bloqueo que contenga detergente para permeabilizar las células y evitar interacciones de anticuerpos no específicas.
Agregue anticuerpos primarios dirigidos a las proteínas virales.
Superposición con anticuerpos secundarios conjugados con fluoróforos dirigidos a los anticuerpos primarios.
Tome imáge
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