Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:39 min. • July 8th, 2025
Tome células de cáncer de próstata e inyéctelas por vía subcutánea en un ratón desnudo anestesiado e inmunocomprometido.
La falta de una respuesta inmune permite que las células inyectadas sobrevivan y se multipliquen, formando un tumor.
Las células tumorales sobreexpresan un antígeno de membrana prostático específico o PSMA, una proteína de la superficie celular.
Tome anticuerpos específicos de PSMA conjugados con un radiotrazador e inyéctelos por vía intravenosa en la cola del ratón portador del tumor.
Los anticuerpos llegan a las células tumorales y se unen al PSMA, marcando el tumor.
Coloque el ratón anestesiado en una tomografía por emisión de positrones o un escáner PET y obtenga una exploración.
La imagen producida muestra la distribución del radiotrazador, destacando áreas de alta captación de anticuerpos, que corresponden a la ubicación del tumor.
En ratones desnudos atímicos machos, implante subcutáneamente 5 x 106 células cancerosas de próstata LNCaP, lo que permite que crezcan hasta un xenoinjerto de 100 a 150 milímetros cúbicos. Tres o cuatro semanas después de la inoculación, los tumores deberían estar listos.
Para la obtención de imágenes, diluya el radioinmunoconjugado 89Zr-DFO-J591 a una concentración de 1 milicuries por mililitro en solución salina estéril al 0,9%. A continuación, inyecte 200 microlitros de la solución 89Zr-DFO-J591 en la vena lateral de la cola de los ratones portadores de xenoinjertos.
En el momento de la obtención de imágenes deseado, anestesiar al ratón con una mezcla de isoflurano y oxígeno gaseoso al 2%. Coloque el mouse en una cama de escáner PET para animales pequeños. Verifique la anestesia usando el método de pellizco de dedos de los pies y aplique ungüento veterinario en los ojos del ratón para evitar que se seque durante la anestesia.
Mantenga la anestesia durante la exploración con una mezcla de isoflurano y oxígeno gaseoso al 1%. Después de esto, adquiera los datos PET para el ratón a través de un escaneo estático con un mínimo de 40 millones de eventos coincidentes utilizando una ventana de energía de 350 a 700 kiloelectronvoltios y una ventana de tiempo de coincidencia de seis nanosegundos.