Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:48 min. • July 8th, 2025
Comience con los discos de papel de filtro funcionalizados con aminas y sumérjalos en glutaraldehído, un reactivo de reticulación.
El glutaraldehído reacciona con los grupos amina a través de una reacción amina-aldehído.
Coloque los discos en un tubo. Agregue agua, agite y aspire para eliminar el glutaraldehído residual.
Después del secado, introducir los anticuerpos de captura específicos del fragmento de inmunoglobulina-G-Fc. Los grupos amina de estos anticuerpos interactúan con los grupos aldehídos en los discos de papel, lo que facilita su inmovilización covalente.
Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos e introducir un tampón de bloqueo para evitar la unión no específica.
A continuación, agregue una muestra de prueba que contenga moléculas de inmunoglobulina G en el disco de papel. Las moléculas de inmunoglobulina G interactúan con los anticuerpos de captura.
Superposición con anticuerpos de detección específicos de fragmentos de IgG-Fc conjugados con peroxidasa picante que interactúan con la inmunoglobulina G preunada.
Lave para eliminar los anticuerpos no unidos y agregue una mezcla de sustrato cromogénico y peróxido de hidrógeno.
En presencia de peróxido de hidrógeno,
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos