Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:04 min. • July 8th, 2025
Comience lavando una sección fija del corazón en un tampón de cacodilato de sodio que estabiliza la estructura del tejido. Sumerja la sección en tetraóxido de osmio para teñir los lípidos de la membrana.
Tratar con acetato de sodio para mantener un pH óptimo para la tinción.
Agregue acetato de uranilo para teñir las biomoléculas, proporcionando un mejor contraste durante la microscopía.
Deshidratar el tejido en concentraciones crecientes de etanol seguido de acetona.
Incruste el tejido en una resina, obtenga secciones ultrafinas y transfiéralas a una rejilla de microscopía.
Introducir metaperiodato de sodio para eliminar el tetraóxido de osmio, desenmascarando la proteína celular.
El compuesto también oxida la glicoproteína, creando grupos aldehídos reactivos, que son neutralizados por el tratamiento con glicina.
Introducir un tampón de bloqueo, evitando la unión de anticuerpos inespecíficos.
Agregue anticuerpos primarios específicos a la proteína diana seguidos de anticuerpos secundarios biotinilados.
Agregue puntos cuánticos conjugados con estreptavidina que se unen a la biotina.
Bajo un microscopio electrónico, las regiones marcadas con puntos cuánticos exhiben un mayor contrast
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