Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:43 min. • July 8th, 2025
Tome un riñón de ratón fijo. Los lípidos en el tejido causan dispersión de luz y los pigmentos causan absorción de luz, haciendo que las células sean opacas.
Trate el tejido con CUBIC-L para la deslipidización y decoloración. El aminoalcohol en CUBIC-L elimina lípidos y pigmentos, minimizando la dispersión de la luz y aumentando la transparencia.
Las moléculas de detergente en CUBIC-L también permeabilizan las células.
Introducir un cóctel de anticuerpos primarios que se une a la tirosina hidroxilasa citoplasmática en las neuronas de los nervios simpáticos y a la actina del músculo liso alfa en las células del músculo liso de los vasos.
Agregue anticuerpos secundarios marcados con fluoróforo que se unan a los anticuerpos primarios.
Realice la postfijación de tejidos para preservar el tratamiento con anticuerpos.
Sumerja el tejido en CUBIC-R+ que reemplaza el agua y coincide con el índice de refracción de las proteínas, minimizando aún más la dispersión de la luz y aumentando la transparencia.
Bajo un microscopio de fluorescencia de hoja de luz, las hojas de luz iluminan el tejido, excitando los fluoróforos.
Capture la luz emitida por fluoróforo y reconstruya una imagen tridimension
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