Detección de anticuerpos antiglicanos circulantes con una matriz de glicanos impresa

Comience con un glicochip funcionalizado con submatrices de glicanos impresas organizadas en bloques de matrices.

Cada punto en la submatriz representa un glicano distinto, un polímero a base de carbohidratos con variaciones en la composición de monosacáridos, la longitud de la cadena y el patrón de ramificación.

Trate el glicochip con un tampón de bloqueo para bloquear sitios de interacción no específicos.

Transfiera el glicochip e introduzca suero de ratón diluido en un tampón suplementado con surfactante para minimizar la agregación de anticuerpos. Incubar bajo agitación.

La agitación promueve una distribución uniforme del suero, facilitando la unión selectiva de anticuerpos antiglicanos a glicanos específicos en función de características moleculares distintas.

Lavar con concentraciones decrecientes de un tampón que contenga tensioactivo para alterar la unión no específica y enjuagar.

Superponga el glicochip con anticuerpos secundarios conjugados con biotina anti-ratón, interactuando con anticuerpos anti-glicanos preunidos y lavado.

Introducir estreptavidina marcada con fluoróforo, que se une a anticuerpos secundarios biotinilados. Lave y retire el exceso de solución.

Escanee e