Inmunolocalización de proteínas arabinogalactanos y pectinas en tejido vegetal

Tome un portaobjetos con pocillos de reacción que contengan secciones delgadas de diferentes tejidos vegetales. Los tejidos se fijan e incrustan dentro de una resina para la inmunotinción.

Coloque el portaobjetos dentro de una cámara de incubación oscura y húmeda para evitar la exposición a la luz y la evaporación del reactivo durante los pasos posteriores.

Introducir una solución de bloqueo para evitar la interacción inespecífica de anticuerpos.

Lave para eliminar el exceso de solución de bloqueo, luego agregue anticuerpos primarios específicos de antígeno e incube.

Los anticuerpos se unen a sus antígenos diana, es decir, proteínas arabinogalactanos y pectinas en la pared celular.

Introducir anticuerpos secundarios conjugados con fluoróforos, que se unen a los anticuerpos primarios.

Lave para eliminar los anticuerpos no unidos y aplique un tinte fluorescente que se une a la celulosa, marcando la pared celular.

Agregue un medio de montaje y selle con un cubreobjetos.

Bajo un microscopio, la fluorescencia del colorante y los anticuerpos unidos ayudan a visualizar la celulosa en las paredes celulares de las plantas colocalizadas con proteínas arabinogalactanas o pectina, exhibiendo s