$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Comience con un cartucho microfluídico equipado con tanques de almacenamiento y bombas unidireccionales que administran reactivos a través de canales en una zona de reacción.
La zona de reacción contiene múltiples puntos inmovilizados con distintos alérgenos.
Cargue el tampón de lavado, el tampón de bloqueo, los anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa y un sustrato de peroxidasa quimioluminiscente en los tanques designados.
Agregue una muestra de suero que contenga inmunoglobulina E o IgE específica para alérgenos.
Inicie el análisis dentro de un analizador de quimioluminiscencia.
Dentro de la zona de reacción, el tampón de bloqueo fluye y bloquea los sitios de interacción no específicos.
La introducción de suero permite que las IgE interactúen con los alérgenos inmovilizados.
El lavado elimina las IgE no unidas.
A continuación, los anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa fluyen e interactúan con las IgE inmovilizadas.
El lavado posterior elimina los anticuerpos no unidos.
Luego, el analizador introduce el sustrato quimioluminiscente y el peróxido de hidrógeno.
La peroxidasa oxida el sustrato, emitiendo luminiscencia.
La intensidad de luminiscencia en cada punto proporciona una indicación cuantificable de distintas IgE específicas de alérgenos en el suero.
Para analizar muestras de suero en busca de anticuerpos de inmunoglobulina E sérica contra alérgenos completos, seleccione al azar tres muestras con al menos 900 microlitros de suero, tome el chip del kit y numérelo. Luego, encienda la computadora y la alimentación del analizador. Inicie el programa LabIT en la computadora.
Si aparece la ventana de advertencia de marco oscuro, haga clic en Aceptar para ejecutar una prueba de fugas. Luego, haga clic en el logotipo central para ingresar a la interfaz de operación. Verifique la temperatura de reacción y la temperatura del dispositivo de carga acoplada o CCD. La temperatura de reacción debe aumentar a 37 más o menos 1 grados Celsius en unos 10 minutos, y la temperatura del CCD debe bajar a menos 15 más o menos 1 grados Celsius.
Cuando la temperatura del CCD haya bajado a menos 15 más o menos 1 grados Celsius, confirme que no queden otros elementos dentro del instrumento y cierre la puerta. Luego haga clic en Herramientas, Prueba del sistema, Prueba de fugas. Cuando finalice la prueba, aparecerá la ventana del informe.
A continuación, cargue 620 microlitros de tampón de lavado, 120 microlitros de tampón de bloqueo, 60 microlitros de conjugados A y B, 60 microlitros de sustratos A y B, y 100 microlitros de cada muestra de suero en los tanques de reactivos correspondientes en el cartucho microfluídico. Después de hacer clic en ID de cartucho, use el escáner de código de barras para escanear el número de serie del cartucho e ingrese el ID de muestra. A continuación, coloque el cartucho en el analizador, cierre la puerta, haga clic en analizador y ejecute para iniciar el análisis.