Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:24 min. • July 8th, 2025
Tome un tubo que contenga una suspensión de bacterias intestinales humanas.
Agregue partículas similares al virus del norovirus humano o VLP. Las VLP contienen una cápside viral intacta pero carecen de ARN genómico, lo que las hace no infecciosas para los humanos.
Durante la incubación, las proteínas de la cápside VLP se unen a carbohidratos específicos expresados en la superficie bacteriana, formando complejos VLP-bacterias.
Centrifugar para peletizar los complejos y desechar las VLP no unidas.
Introduzca una solución de bloqueo que contenga proteínas para bloquear los sitios de unión de anticuerpos no específicos, reduciendo la tinción de fondo en los pasos posteriores.
Agregue anticuerpos específicos de VLP marcados con fluorescencia e incube.
Los anticuerpos se unen a sus sitios diana en la cápside de VLP, marcando los complejos VLP-bacteria.
Centrifugar para peletizar los complejos. Deseche los anticuerpos no unidos y vuelva a suspender el sedimento en un tampón de citometría de flujo.
Usando un citómetro de flujo, detecte señales de fluorescencia emitidas por complejos VLP-bacterias, lo que permite la cuantificación del porcentaje de bacterias unidas en la muestra.
Después de
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