Medición de la eficiencia fagocítica de los macrófagos con primaquina y terapia fotodinámica

Comience con una placa de varios pocillos que contenga macrófagos murinos adheridos, o células inmunitarias fagocíticas.

Introducir una suspensión celular fúngica de Cryptococcus, que interactúa con los receptores de macrófagos e internaliza a través de la fagocitosis.

El fagosoma se fusiona con el lisosoma, formando un fagolisosoma. El ambiente ácido del fagolisosoma favorece la supervivencia y multiplicación de hongos.

Introduzca una alta concentración de primaquina, un fotosensibilizador, en los pocillos de prueba, mientras que el control carece del fotosensibilizador. Incubar para facilitar la absorción de primaquina por los macrófagos.

Exponga la placa a la luz ultravioleta para un tratamiento fotodinámico o PDT.

En el pozo de prueba, la primaquina forma cationes radicales que interactúan con el oxígeno molecular, produciendo especies reactivas de oxígeno o ROS.

Las ROS inducen la muerte de los hongos, mientras que las enzimas antioxidantes de los macrófagos neutralizan las ROS, previniendo el daño celular.

Permeabiliza los macrófagos, liberando células fúngicas.

Distribuya el contenido de células diluidas en placas de agar selectivas, produciendo distintas colonias de hongos.