Un procedimiento de punta STAGE para la desalinización y purificación de péptidos

Tome una extracción STop And Go o STAGE Tip, una columna de purificación miniaturizada.

La punta contiene pequeñas perlas de sílice unidas a largas cadenas de hidrocarburos para la purificación de péptidos basada en la interacción hidrofóbica.

Lavar con tampones que contengan un alto porcentaje de acetonitrilo, eliminando las impurezas de la resina.

Introduzca un tampón de unión y centrífuga, equilibrando la columna para una unión óptima de péptidos.

Cargue una muestra de péptidos predigeridos obtenida de células diferenciadas similares a neutrófilos, que contienen fragmentos de péptidos e impurezas, incluidas las sales.

Centrifugar para pasar la muestra a través de la columna. Los fragmentos peptídicos se unen a las cadenas de hidrocarburos a través de interacciones hidrofóbicas, mientras que las sales se eliminan.

Agregue el tampón aglutinante y centrifuge, eliminando las impurezas restantes.

Introducir el tampón con alto contenido de acetonitrilo para la elución.

Con una jeringa, pase el tampón a través de la columna. El acetonitrilo se une a las cadenas de hidrocarburos, desplazando los fragmentos de péptidos que eluyen con el tampón.

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