Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:51 min. • July 8th, 2025
Comience con una placa de pocillos múltiples recubierta con una vacuna de prueba y bloquee los sitios de interacción no específicos.
Adquiera una muestra de suero de un ratón inyectado con la vacuna de prueba.
Este suero contiene anticuerpos de inmunoglobulina G, o IgG, que reconocen la vacuna de prueba.
A los pocillos recubiertos de vacunas, agregue muestras de suero diluidas en serie.
Las IgG se unen a la vacuna. Lavar para eliminar los anticuerpos no unidos.
Agregue anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa que se unan a las IgG. Eliminar los anticuerpos secundarios no unidos.
Añadir un sustrato cromogénico. La peroxidasa interactúa con el sustrato, generando un producto de color azul.
Introduce un ácido para detener la reacción. El cambio en el pH hace que la solución se vuelva amarilla.
Con un espectrofotómetro, mida la intensidad del color de cada pocillo para determinar la concentración de IgG en la muestra de suero.
Para el recubrimiento de antígenos del ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, o placa ELISA, diluya el antígeno de la proteína HI a 10 microgramos por mililitro con una solución de recubrimiento y agregue 100 microlitros del antígeno diluido por pocil
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos