Name: Técnica modificada para la ligadura de la arteria coronaria en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: Aprenda la técnica modificada de ligadura de la arteria coronaria en ratones para inducir infarto de miocardio mediante toracotomía izquierda. Este modelo permite estudiar la función cardíaca y evaluar intervenciones terapéuticas.

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1. Protocolo de Texto <ol><li> Antes de proceder a la cirugía, anestesiar a un ratón macho (C57BL / 6) que es de 6 semanas de edad o mayores por inhalación de isoflurano 2-5%. Realizar una pizca dedo del pie para confirmar que el animal es suficientemente anestesiado. </li><li> El ratón inconsciente se coloca sobre su espalda sobre una almohadilla caliente para mantener una temperatura constante de 37 ° C. El pecho precordial en el lado izquierdo se afeitó. </li><li> Asegure el ratón a un dispositivo de intubación con una cámara llena de isoflurano. Insertar un tubo de 0,2 de diámetro interior en la tráquea del ratón a través de la boca, a continuación, colocar el ratón intubado en un área aséptica quirúrgica (37 ° C por un controlador de temperatura) y conectar el tubo endotraqueal a un ventilador (tasa de 120 por min, presión de 4-6 mmH 2 O); desinfectar la zona con betadine y 75% de etanol. </li><li> Aplique ungüento oftálmico de los ojos del ratón. Coloque los electrodos de ECG estándar en las patas y conectar el ratón a la grabadora de ECG. </li&gt; <li> Con unas tijeras estériles para hacer una incisión de 1,5 cm a lo largo de la línea media axilar. Tijeras se utilizan en lugar de un bisturí para evitar lesiones al tejido subyacente en ratones. A continuación, utilice tijeras con puntas romas para disecar los vasos y retraer el músculo precordial de la pared torácica. </li><li> Realizar una toracotomía izquierda entre las costillas tercera y cuarta para visualizar la superficie anterior del corazón y el pulmón izquierdo </li><li> Además retracción de la pared torácica usando un retractor adecuado con el fin de mejorar la visualización y la accesibilidad. Retire el pericardio mediante el uso de fórceps y tijeras dentadas de punta roma. </li><li> Se liga la arteria coronaria izquierda mediante la colocación de la aguja (que se adjunta con 7-0 sutura Ethilon) debajo de la arteria con una banda de miocardio entre la ligadura y la arteria. Una oclusión satisfactoria de la arteria coronaria es verificada por hipocinesia / acinesia de la pared ventricular izquierda anterior y por las alteraciones del registro de ECG (por ejemplo, elevación del segmento ST, QRS broadening) </li><li> Cierre el pecho colocando dos puntos (6-0 sutura Ethilon) sobre las costillas tercera y cuarta. </li><li> Usar 5-0 Ethilon sutura para cerrar la piel. </li><li> Para la analgesia postoperatoria, administrar una inyección intraperitoneal única de buprenorfina (0,05 mg / kg). Los animales espontáneamente se recuperan en 2-5 minutos después de dejar de anestesia con isoflurano. Por último, colocar el ratón en una jaula caliente y proporcionar 0,6 mg / ml de buprenorfina en el agua potable (superposición de texto: 0,6 mg / ml en el agua potable) para evitar post-operatorio angustia. Vigilar de cerca el ratón durante las primeras 24 horas después de la cirugía. </li><li> La ecocardiografía se realizó para evaluar la función cardíaca 3 días después de un infarto de miocardio. Procedimiento exitoso es verificada por acinesia de la pared ventricular izquierda anterior (ver el video adjunto en los resultados). Al final del experimento, el corazón se recogen y almacenan en-80oC para investigaciones posteriores. Expresión génica es decir. </li></ol>

<ol><li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Cardiovasc.+Ther%22%5BJournal%5D)">Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).</li>
<li>Pell, S., Fayerweather, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+the+incidence+of+myocardial+infarction+and+in+associated+mortality+and+morbidity+in+a+large+employed+population%2C+1957-1983%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population, 1957-1983.</a> N. Engl. J. Med. 312, 1005-1011 (1985).</li>
<li>Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiarrhythmic+effects+of+growth+hormone--in+vivo+evidence+from+small-animal+models+of+acute+myocardial+infarction+and+invasive+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Electrocardiol%22%5BJournal%5D)">Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology.</a> J. Electrocardiol. 41, 144-151 (2008).</li>
<li>Thom, T., Haase, N., Rosamond, W., Howard, V. J., Rumsfeld, J., Manolio, T., Zheng, Z. J., Flegal, K., O'Donnell, C., Kittner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2006+update%3A+A+report+from+the+american+heart+association+statistics+committee+and+stroke+statistics+subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2006 update: A report from the american heart association statistics committee and stroke statistics subcommittee.</a> Circulation. 113, 85-151 (2006).</li>
<li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse%3A+A+comparison+with+coronary+artery+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289, 1291-1300 (2005).</li>
<li>Omerovic, E., Ramunddal, T., Lorentzon, M., Nordlander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+y2+receptor+blockade+on+ventricular+arrhythmias+in+rats+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide y2 receptor blockade on ventricular arrhythmias in rats with acute myocardial infarction.</a> Eur. J. Pharmacol. 565, 138-143 (2007).</li>
<li>Ahn, D., Cheng, L., Moon, C., Spurgeon, H., Lakatta, E. G., Talan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+c57bl%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in c57bl/6 mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 286, 1201-1207 (2004).</li>
<li>Lindbom, M., Ramunddal, T., Camejo, G., Waagstein, F., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+effects+of+myocardial+creatine+depletion+on+left+ventricular+function+morphology+and+lipid+metabolism%3A+Study+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">In vivo effects of myocardial creatine depletion on left ventricular function morphology and lipid metabolism: Study in a mouse model.</a> J. Card Fail. 14, 161-166 (2008).</li>
<li>Omerovic, E., Bollano, E., Basetti, M., Kujacic, V., Waagstein, L., Hjalmarson, A., Waagstein, F., Soussi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic%2C+functional+and+morphological+consequences+of+postinfarct+cardiac+remodeling+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Cell.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic, functional and morphological consequences of postinfarct cardiac remodeling in the rat.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 31, 1685-1695 (1999).</li>
<li>Gao, E., Lei, Y. H., Shang, X., Huang, Z. M., Zuo, L., Boucher, M., Fan, Q., Chuprun, J. K., Ma, X. L., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circ. Res. 107, 1445-1453 (2010).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

El procedimiento quirúrgico para la ligadura de LCA como se demuestra en este informe es un método fiable y reproducible para la inducción de infarto de miocardio experimental en ratones 3, 6. La ligación de LCA de acuerdo con este protocolo induce isquemia miocárdica acoplamiento típicamente ~ 40% de ventrículo izquierdo 3. Esto induce importantes cambios en el ECG en el segmento ST 7 y palidez visible en la superficie anterior del corazón. Debido a la gran infarto de miocardio, la mort...

técnica modificada para la ligadura de la arteria coronaria en ratones

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

El infarto de miocardio (MI) es una de las causas más importantes de mortalidad en los seres humanos 1-3. Con el fin de mejorar la morbilidad y mortalidad en pacientes con infarto de miocardio que necesitamos un mejor conocimiento de la fisiopatología de la isquemia miocárdica. Este conocimiento puede ser útil para definir nuevas dianas terapéuticas innovadoras para tratamientos cardiovasculares 4. Modelo experimental en ratones MI es cada vez más popular modelo de pequeños animales en la investigación preclínica en la que MI es inducido mediante ligadura permanente o temporal de la arteria coronaria izquierda (LCA) 5. En este vídeo, se describe el método paso a paso de cómo inducir MI experimental en ratones. El animal es primero anestesiados con isoflurano 2%. El ratón inconsciente es entonces intubado y conectado a un ventilador para la ventilación artificial. La parte izquierda del pecho se afeita y 1,5 cm de incisión a lo largo de la línea media axilar se realiza en la piel. La izquierda músculo pectoral mayor es francamente dissociated hasta que las costillas están expuestas. Las capas musculares se llevó a un lado y se fija con un párpado-retractor. Después de estos preparativos, toracotomía izquierda se lleva a cabo entre las costillas tercera y cuarta con el fin de visualizar la superficie anterior del corazón y el pulmón izquierdo. El segmento proximal de la arteria LCA se liga con una sutura 7-0 Ethilon que típicamente induce un tamaño del infarto ~ 40% del ventrículo izquierdo. Al final, el pecho se cierra y los animales reciben analgesia postoperatoria (Temgesic, 0,3 mg/50 ml, ip). Los animales se mantienen en una jaula caliente hasta que la recuperación espontánea.

<table border="1"><tbody><tr><td> Instrumento </td><td> Descripción de funciones </td></tr><tr><td> Tijeras de punta roma </td><td> Se utiliza para cortar la piel, los músculos intercostales del pecho, y las suturas </td></tr><tr><td> Ojo retractor </td><td> Se utiliza para exponer vista quirúrgico </td></tr><tr><td> Fórceps con puntas romas </td><td> Se usa para sujetar la piel y el músculo </td></tr><tr><td> Soporte de la aguja </td><td> Para retener una aguja </td></tr><tr><td> 5-0 sutura </td><td> Utilizado...

El procedimiento quirúrgico utilizado para inducir el infarto de miocardio experimental en ratones comienza con toracotomía izquierda entre la tercera y las costillas cuarta con el fin de visualizar la superficie anterior del corazón y el pulmón izquierdo. La arteria coronaria izquierda se ligó, el pecho se cierra y el ratón se le permite recuperarse de manera espontánea.

Técnica modificada para la ligadura de la arteria coronaria en ratones

El infarto de miocardio (IM) es una de las causas más importantes de mortalidad en los seres humanos1-3. Con el fin de mejorar la morbilidad y la mortalidad en pacientes con IM...

El objetivo general de este procedimiento es inducir un infarto de miocardio en ratones. Esto se logra realizando primero una incisión cutánea a lo largo de la línea axilar media. A continuación, se expone el corazón mediante una toracotomía izquierda entre la tercera y la cuarta costilla.Luego se realiza una ligadura en el segmento proximal de la arteria descendente anterior izquierda. Finalmente, se cierra el tórax y el ratón se devuelve a una jaula para su recuperación espontánea. En última instancia, el infarto de miocardio puede examinarse mediante electrocardiografía o ecocardiografía.La demostración visual de este método es fundamental, ya que la ligadura de la arteria coronaria cercana al lado izquierdo es difícil de aprender. Una infección miocárdica adecuada se asegura colocando la ligadura justo debajo del orificio del lado izquierdo. Pero es importante no perforar la AUM izquierda, ya que podría provocar una hemorragia letal.Para comenzar la cirugía, anestesie un ratón de seis semanas de edad o mayor mediante inhalación con un 2 a 5% de fluoruro. Realice una compresión del dedo del pie para confirmar que el animal está suficientemente anestesiado. Una vez que el ratón e

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Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Numerosas manipulaciones genéticas y / o inyecciones intramiocárdica de genes, proteínas, células, y / o los biomateriales se superponen a la dimensión del tiempo en los estudios de agudos de isquemia / reperfusión y la remodelación crónica en ratones. Este video ilustra los procedimientos de microcirugía de la isquemia / reperfusión, la ligadura permanente de la arteria coronaria, y los estudios de inyección intramiocárdica.

Ligadura de las arterias coronarias y la inyección intramiocárdica en un modelo murino de infarto

En este video, describimos un procedimiento quirúrgico para generar un modelo de ratón de infarto de miocardio mediante la ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda.

Generación de un modelo murino de infarto de miocardio: un procedimiento quirúrgico para la ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda en un modelo de ratón

Se introduce un método quirúrgico para inducir experimental de isquemia / reperfusión (I / R) lesión para simular el infarto de miocardio (MI) en modelos de ratón que permite una mayor claridad en el posicionamiento de la ligadura en la arteria descendente anterior izquierda (LAD) para aumentar la reproducibilidad de experimentos en ratones MI.

Un modelo murino de isquemia-reperfusión miocárdica lesión a través de la ligadura de la arteria descendente anterior

Se describe un modelo altamente reproducible para el infarto de miocardio en ratones con manipulaciones mínimamente invasivas. El modelo se puede realizar fácilmente, lo que resulta en una alta reproducibilidad y tasa de supervivencia. Por lo tanto, el modelo descrito reducirá el número de animales requeridos según lo solicitado por el principio de las 3R (Reemplazo, Refinamiento y Reducción).

Mínimo procedimiento quirúrgico invasivo de inducir infarto de miocardio en ratones

La insuficiencia cardíaca es la principal causa de hospitalización y una de las principales causas de mortalidad. Se aplica un modelo de ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda en ratones para investigar el remodelado ventricular y la disfunción cardíaca después del infarto de miocardio. Se presenta la técnica de mediciones hemodinámicas invasivas en ratones.

La ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior en ratones: un modelo de remodelación post infarto de miocardio e insuficiencia cardiaca

Proporcionamos un método fiable para la ligadura de la arteria descendente anterior izquierda (LAD) en un modelo de ratón. Este método es comparativamente menos invasivo que otros métodos, ya que implica intubación endotraqueal, un abordaje de toracotomía del lado izquierdo y toracocentesis. Este método se puede utilizar como modelo para el infarto de miocardio (IM) agudo y crónico.

Murino descendente anterior (LAD) ligadura de la arteria coronaria: un modelo mejorado y simplificado para el infarto de miocardio

Aquí se describe un procedimiento quirúrgico que muestra cómo lograr la ligadura permanente de la arteria coronaria descendente izquierda-anterior en ratones. Este modelo es de gran relevancia para investigar la fisiopatología del infarto de miocardio y los procesos biológicos concomitantes.

Modelo de infarto de miocardio murino usando ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda

Bajo la anestesia adecuada, el corazón del ratón se exteriorizó a través del espacio intercostal, y el infarto de miocardio se indujo con éxito mediante la ligadura de la arteria descendente anterior (DA) izquierda utilizando materiales fácilmente disponibles en la mayoría de los laboratorios.

Un método simple modificado para la inducción de infarto de miocardio en ratones

En este trabajo describimos un método sencillo y reproducible que puede inducir infarto de miocardio o lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en ratones mediante ligadura de precisión de la arteria coronaria descendente anterior izquierda mediante micromanipulación.

Inducción de infarto de miocardio y lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en ratones

Aquí se presenta un procedimiento quirúrgico para la ligadura permanente de la arteria coronaria izquierda en ratones. Este modelo se puede utilizar para investigar la fisiopatología y la respuesta inflamatoria asociada después del infarto de miocardio.

Ligadura de la arteria coronaria izquierda: un modelo murino quirúrgico de infarto de miocardio

Aprenda la técnica modificada de ligadura de la arteria coronaria en ratones para inducir infarto de miocardio mediante toracotomía izquierda. Este modelo permite estudiar la función cardíaca y evaluar intervenciones terapéuticas.

Técnica modificada para la ligadura de la arteria coronaria en ratones

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