Técnica modificada para la ligadura de la arteria coronaria en ratones

El objetivo general de este procedimiento es inducir un infarto de miocardio en ratones. Esto se logra realizando primero una incisión cutánea a lo largo de la línea axilar media. A continuación, se expone el corazón mediante una toracotomía izquierda entre la tercera y la cuarta costilla.

Luego se realiza una ligadura en el segmento proximal de la arteria descendente anterior izquierda. Finalmente, se cierra el tórax y el ratón se devuelve a una jaula para su recuperación espontánea. En última instancia, el infarto de miocardio puede examinarse mediante electrocardiografía o ecocardiografía.

La demostración visual de este método es fundamental, ya que la ligadura de la arteria coronaria cercana al lado izquierdo es difícil de aprender. Una infección miocárdica adecuada se asegura colocando la ligadura justo debajo del orificio del lado izquierdo. Pero es importante no perforar la AUM izquierda, ya que podría provocar una hemorragia letal.

Para comenzar la cirugía, anestesie un ratón de seis semanas de edad o mayor mediante inhalación con un 2 a 5% de fluoruro. Realice una compresión del dedo del pie para confirmar que el animal está suficientemente anestesiado. Una vez que el ratón esté completamente sedado, transfiéralo al área quirúrgica y colóquelo sobre.

Coloque su espalda sobre una almohadilla tibia. Para mantener una temperatura constante de 37 grados Celsius, sujete el ratón a un dispositivo de intubación con una cámara de campo de isoflurano usando un tubo de 0,2 centímetros de diámetro y una mezcla de 2 % de isoflurano en aire. Introduzca el tubo en la tráquea del ratón.

Afeite el área precordial del tórax en el lado izquierdo y luego desinfecte la zona con Betadine. A continuación, con etanol al 75 %, repita el procedimiento tres veces. Asimismo, aplique una pomada oftálmica en los ojos del ratón utilizando tijeras estériles.

Realice una incisión de 1.5 centímetros a lo largo de la línea axilar media. Este enfoque facilita la evaluación ecocardiográfica posterior. Se utilizan tijeras en lugar de un bisturí para evitar lesiones en los tejidos subyacentes de estos ratones jóvenes.

Luego, utilizando fórceps de vaso con punta roma, disocie y retraccione el músculo precordial de la pared torácica. Realice una toracotomía izquierda entre la tercera y la cuarta costilla para visualizar la superficie anterior del corazón y el pulmón izquierdo. A continuación, retraccione la pared torácica utilizando un retractor de párpado adecuado.

Con el fin de mejorar la visualización y el acceso mediante fórceps dentales y tijeras de punta roma, retire el pericardio. A continuación, prepare un hilo de sutura y aguja siete ceros para la ligadura de la arteria. Ligue la arteria coronaria izquierda colocando la aguja debajo de la arteria, con una banda de miocardio entre la ligadura y la arteria.

Cierre el tórax colocando dos puntos en las costillas tercera y cuarta. Reduzca la concentración de isoflurano a 0,5 % y utilice sutura de polipropileno 5-0 para cerrar la piel en tres puntos. Para la analgesia postoperatoria, administre una inyección intraperitoneal de 0,05 miligramos por kilogramo de buprenorfina.

Finalmente, coloque el ratón en una jaula caliente para su recuperación espontánea y proporcione 0,6 miligramos por mililitro de buprenorfina en el agua de bebida. Supervise cuidadosamente al ratón durante las primeras 24 horas después de la cirugía para investigar los efectos del infarto de miocardio. La mejor manera invasiva es evaluar la función cardíaca mediante ecocardiografía varios días después de la cirugía.

Mediante este protocolo, la ligadura de la arteria coronaria izquierda induce isquemia miocárdica que afecta aproximadamente al 40 % del ventrículo izquierdo. Esto provoca cambios significativos en el segmento ST del ECG, como se muestra en estos ECG representativos registrados antes y después de la ligadura. Antes del infarto de miocardio.

Los complejos QRS registrados con el ECG son estrechos y cortos. Después de un infarto de miocardio, se observa una elevación evidente del segmento ST que se integra en los complejos QRS, haciendo que estos sean mucho más anchos y altos que los registrados antes del infarto de miocardio. Para investigar los efectos del infarto de miocardio, evalúe la función cardíaca mediante ecocardiografía varios días después de la intervención por IM.

Se muestra aquí una grabación de ecocardiografía tomada de ratones sometidos a cirugía simulada. En contraste con las buenas contracciones cardíacas observadas en ratones sometidos a cirugía simulada. En ratones con IM.

72 horas después del mi, hay una akinésia notable en la pared ventricular libre izquierda en la fase sistólica. Después de ver este vídeo, debería tener una buena comprensión de este modelo murino de infarto de miocardio, y debería ser capaz de implementarlo en su propio laboratorio.