Name: Trasplante de células madre de Estrategias para la restauración de la disfunción cognitiva causada por la radioterapia craneal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-10-18T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 24 s
Description: Aprende el trasplante de células madre en el hipocampo de ratas atímicas tras radioterapia craneal. Este método permite estudiar la migración celular y evaluar terapias para recuperar la función cognitiva dañada.

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Este trabajo fue apoyado por el NIH NINDS subvención R01 NS074388 581 (CL Limoli), Instituto de California para la Medicina Regenerativa (CIRM) Otorgar RS1-00413 (CLL), CIRM Formación subvención TG2-0115 (MMA), y una beca para CIRM JOVE en apoyo de la documentación en video.

<ol><li>Acharya, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consequences+of+ionizing+radiation-induced+damage+in+human+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Free.+Radic.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Consequences of ionizing radiation-induced damage in human neural stem cells.</a> Free. Radic. Biol. Med. , (2010).</li>
<li>Acharya, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescue+of+radiation-induced+cognitive+impairment+through+cranial+transplantation+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Rescue of radiation-induced cognitive impairment through cranial transplantation of human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106, 19150-19155 (2009).</li>
<li>Khan, F. M. Ch. 11. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoyer%2C+A+%22Treatment+planning+in+Radiation+Oncology%22">Treatment planning in Radiation Oncology</a>. , Lippincott Williams & Wilkins. (2007).</li>
<li>Lawson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+application+of+IMRT+based+radiosurgery+to+treat+multiple+or+large+irregular+lesions+and+verification+of+infra-red+frameless+localization+system%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">Intracranial application of IMRT based radiosurgery to treat multiple or large irregular lesions and verification of infra-red frameless localization system.</a> J. Neurooncol. 97, 59-66 (2010).</li>
<li>Ling, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commissioning+and+quality+assurance+of+RapidArc+radiotherapy+delivery+system%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Radiat.+Oncol.+Biol.+Phys%22%5BJournal%5D)">Commissioning and quality assurance of RapidArc radiotherapy delivery system.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 72, 575-581 (2008).</li>
<li>Otto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volumetric+modulated+arc+therapy%3A+IMRT+in+a+single+gantry+arc%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Phys%22%5BJournal%5D)">Volumetric modulated arc therapy: IMRT in a single gantry arc.</a> Med. Phys. 35, 310-317 (2008).</li>
<li>Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+stereotaxic+coordinates%22">The Rat Brain in stereotaxic coordinates</a>. , 6th edn, Elsevier. (2007).</li>
<li>Hess, D. C., Borlongan, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-based+therapy+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Rev.+Neurother%22%5BJournal%5D)">Cell-based therapy in ischemic stroke.</a> Expert. Rev. Neurother. 8, 1193-1201 (2008).</li>
<li>Hefferan, M. P., Johe, K., Feldman, E. L., Lunn, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+immunosuppressive+therapy+for+spinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+a+rat+model+of+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Optimization of immunosuppressive therapy for spinal grafting of human spinal stem cells in a rat model of ALS.</a> Cell. Transplant. , (2011).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

Una considerable investigación se está realizando la exploración de la miríada de formas en que las células madre pueden ser utilizados clínicamente para restaurar las funciones normales de los tejidos dañados, ancianos y enfermos 8. La eventual realización de estos esfuerzos requieren un conocimiento detallado del comportamiento de las células injertadas en microambientes único que se diferencian de los tejidos normales sin daños. Nuestro trabajo ha demostrado que en el lecho de tejido irradiado, NSCs craneal injertado funcional puede restaurar la cognición, donde sobreviven, migran y se diferencian a lo largo de linajes neuronales y gliales 2. Con precisión cómo estas células mediar recuperación de la cognición es incierto en la actualidad, pero no depende de la realización de una serie de procedimientos experimentales cuidadosamente controladas de una manera reproducible. Hemos detallado los procedimientos críticos aquí en los esfuerzos para acelerar el potencial de traslación de terapias con células madre para aminorar los efectos adversos cognitivos asociados con elmanejo clínico de cerebro y otras formas de cáncer. Consideraciones adicionales que pueden tener un impacto significativo de la calidad de los datos se destacan a continuación. Basado en terapias de trasplante depende de las células madre como reactivo crítico, y, en consecuencia, se debe tener cuidado para caracterizar adecuadamente las culturas, mantener la esterilidad y el uso de los números encontrados paso de fiabilidad de los resultados. Trasplantes de células madre humanas fueron marcadas con BrdU antes de la cirugía, para proporcionar un medio para el seguimiento en vivo. Bajo condiciones experimentales, NSCs trasplantado no se sometieron a una gran proliferación, por lo que la dilución de la etiqueta de BrdU no era problemática. Por otra parte, trasplantado células madre humanas se distinguen de las células huésped mediante inmunotinción para el consumo humano marcadores específicos, tales como proteína de la matriz nuclear (h-NUC o hNUMA) 9 o humanos específicos de antígeno nuclear (HuNu) 2. Las células madre humanas también podría tener una etiqueta conuna variedad de marcadores fluorescentes para facilitar su identificación en el cerebro huésped. Atención a los parámetros de irradiación de definir con precisión las técnicas de administración de la dosis, y los descritos en este modelo de las actuales prácticas clínicas en oncología de radiación. El trasplante de células madre reproducibles en el cerebro también es fundamental, y se lleva a cabo mediante un instrumento estereotáxica digital. La capacidad de micromanipulate precisamente una microjeringa para la implantación de células madre en las estructuras cerebrales como el hipocampo pequeño reduce el error humano. Con este aparato, NSCs fueron trasplantados en cuatro sitios distintos que abarcan la parte anterior de las regiones posteriores del hipocampo de rata. Dorso-ventral (DV) las coordenadas se determinaron con base en la experiencia con atímicos desnudos (ATN) ratas de tal manera que los procedimientos quirúrgicos no causar daño a la formación del hipocampo 2. Una sección coronal a través del cerebro de la rata revela las estructuras clave de la formación del hipocampo including el giro dentado (GD), la dentada hilio (DH) y CA1 y CA3 subcampos (Fig. 8). NSCs trasplantado, introdujo el dorso del trayecto de la aguja visible (Nt, línea roja), se visualizan como manchas oscuras (marrón), las células depositadas en el sitio del trasplante de liberación (Tr) justo por debajo del cuerpo calloso (CC), que luego migran a través del septo -temporal eje del hipocampo.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del Material </td><td> Tipo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentario </td></tr><tr><td> Instrumento Digital estereotáxica w/45 ° y 18 ° Earbars </td><td> Craneales configuración trasplante quirúrgico </td><td> Leica Microsystems (antes: MyNeuroLab) </td><td> 39463501 </td><td> Accesorios útiles: Estadio con calefacción y fuente de corriente variable (para mantener la temperatura del cuerpo durante la cirugía) </td></tr></tbody></table>

trasplante de células madre de estrategias para la restauración de la disfunción cognitiva causada por la radioterapia craneal

Stem Cell Transplantation Strategies for the Restoration of Cognitive Dysfunction Caused by Cranial Radiotherapy

La radioterapia a menudo proporciona el único recurso clínico para los afectados por tumores cerebrales primarios o metastásicos. Aunque beneficiosa, irradiación craneal puede provocar una disminución progresiva y debilitante en el conocimiento que puede, en parte, causada por el agotamiento de las células madre neurales. Dado el aumento de la supervivencia de los pacientes diagnosticados con cáncer de cerebro, la calidad de vida en términos de la salud cognitiva se ha convertido en una preocupación creciente, especialmente en ausencia de cualquier satisfactoria tratamientos a largo plazo. Para hacer frente a este grave problema de salud que han utilizado el reemplazo de células madre como una estrategia para combatir la radiación inducida por el deterioro cognitivo. Nuestro modelo utiliza atímicos desnudos ratas sometidas a irradiación craneal. La radiación ionizante se entrega, ya sea como todo el cerebro o como un haz altamente concentrado en el hipocampo a través de un oído lin ccelerator (LINAC) radiocirugía estereotáxica base. Dos días después de la irradiación, huLas células madre neurales hombre (hNSCs) fueron trasplantados stereotaxically en el hipocampo. Las ratas se evaluaron los cambios en la cognición, la supervivencia de las células injertadas y para la expresión de marcadores específicos de diferenciación-1 y 4 meses después de la irradiación. Nuestros paradigmas de pruebas cognitivas han demostrado que los animales injertados con hNSCs exhiben mejoras significativas en la función cognitiva. Estereología imparcial revela significativa en la supervivencia (10-40%) de las células injertadas en 1 y 4 meses después del trasplante, dependiendo de la cantidad y tipo de células injertadas. Células injertadas migrar considerablemente, se diferencian a lo largo de linajes neuronales y gliales, y expresar una serie de marcadores fenotípicos inmaduros y maduros. Nuestros datos demuestran los beneficios directos cognitivas derivadas de células madre humanas injertadas, lo que sugiere que este procedimiento podría algún día permitir una estrategia prometedora para la restauración funcional a largo plazo de la cognición en las personas sometidas a radiot cranealERAPIA. Promover la difusión de los procedimientos de crítica necesaria para replicar y ampliar nuestros estudios, hemos proporcionado la documentación escrita y visual de varios pasos clave en nuestro plan experimental, con énfasis en radiosurgey estereotáxica y el trasplante.

Pacientes con tumor cerebral habitualmente sometidos a radioterapia craneal, y al mismo tiempo beneficiosos, este tratamiento a menudo resulta en disfunción cognitiva debilitante. Este problema sin resolver graves tiene en la actualidad, ningún recurso clínica, y ha impulsado los esfuerzos para diseñar terapias con células madre basado en la recuperación de los inducidos por la radiación disminuye cognitiva.

Trasplante de células madre de Estrategias para la restauración de la disfunción cognitiva causada por la radioterapia craneal

La radioterapia a menudo representa el único recurso clínico para quienes padecen tumores cerebrales primarios o metastásicos. Aunque resulta beneficiosa, la irradiación craneal...

El objetivo general del siguiente experimento consiste en trasplantar células madre al hipocampo de forma reproducible. Primero, se somete a ratas atímicas a radioterapia estereotáxica, simulando lo que podría ocurrir durante la atención clínica del cáncer cerebral. En el laboratorio, se cultivan células madre neurales humanas para su trasplante, siendo necesarios típicamente 1 millón de células para tratar una sola rata.Dos días después de la irradiación, las células madre se inyectan lentamente en el hipocampo en una ubicación precisa. En última instancia, el protocolo muestra la migración de las células madre trasplantadas a través del hipocampo. Tuve la idea inicial de estas metodologías cuando comencé a considerar las perspectivas de utilizar células madre para revertir la inhibición de la neurogénesis tras la irradiación craneal. En general, las personas familiarizadas con este método enfrentarán dificultades porque el crecimiento de las células madre no es sencillo y requiere atención y cuidado diarios en condiciones de cultivo libres de antibióticos.La demostración visual de este procedimiento aclarará el proceso clínico utilizado para la reconstrucción de imágenes con el fin de irradiar con precisión volúmenes cerebrales pequeños y bien definidos. El procedimiento de irradiación será demostrado por el Dr. Dante Rowa, profesor clínico de mi departamento. La preparación de células madre será demostrada por las técnicas de mi laboratorio, Mary Land y Catherine Tran, y el Dr. Muja, investigador posdoctoral, demostrará los procedimientos necesarios para el trasplante.Utilizamos un software de radioterapia guiada por imagen para una colocación precisa del animal antes del tratamiento y una radioterapia modulada para una irradiación dirigida con daño mínimo por radiación a otras partes del cerebro. Veinticuatro horas después de una resonancia magnética, genere otro volumen de imágenes transversales colocando al animal sedado en un escáner de tomografía computarizada de oncología radioterápica. Coloque la rata en la misma posición utilizada para la resonancia magnética y configure la unidad de TC para escanear la región del cráneo y generar los datos de planificación del tratamiento de TC.Obtenga 106 imágenes de TC con un grosor de imagen de 0.8 milímetros. A continuación, transfiera los datos de imágenes de RM y TC al software de planificación de tratamiento Eclipse. Utilice Eclipse para fusionar los datos de RM y TC basándose en la anatomía ósea y la coincidencia de los tejidos blandos.Este es un paso variable en el tiempo y, dependiendo de la calidad de la imagen, este proceso puede tardar de una a tres horas. Una vez que se obtiene una fusión de imágenes satisfactoria, delimite las regiones diana que se irradiarán, así como los órganos críticos adyacentes. La irradiación puede administrarse a todo el cerebro o restringirse a regiones volumétricas específicas, como los hipocampos individuales.Los contornos proporcionan no solo la ubicación de estos órganos, sino también información de volumen que será fundamental para adaptar la distribución de la dosis. Para adaptar la distribución de la dosis, introduzca información sobre la dosis objetivo, la conformidad del objetivo y las restricciones de dosis para órganos críticos en la ventana de optimización de dosis en eclipse.Una vez generado un plan, Eclipse proporciona la dosis calculada superpuesta a las imágenes axiales, coronales y sagitales, así como en formato de histograma de volumen de dosis. En este momento, el plan debe evaluarse para determinar si es adecuado para su administración o si necesita mejorarse. Para comenzar el proceso de irradiación, coloque una rata sedada bajo una manta de papel para mantenerla caliente.Después de unos minutos, coloque la rata sobre la mesa de tratamiento del acelerador lineal de radioterapia cubierta con la manta, pero con el cráneo expuesto. Asegúrese de colocarla en la misma posición utilizada para generar la tomografía computarizada. Este paso es fundamental para garantizar la precisión en la administración de la dosis.A continuación, adquiera imágenes ortogonales de rayos X de las ratas sedadas utilizando el sistema de imagen integrado en el acelerador lineal de radioterapia, coregistre las imágenes ortogonales de rayos X con un conjunto de imágenes de referencia proporcionado por Eclipse y realice las correcciones de posición necesarias para lograr un alineamiento adecuado. Administre la irradiación como una dosis de 10 grados con un plan IMRT de seis campos para un solo hipocampo y con un plan de arco rápido de dos arcos para la irradiación de ambos hipocampos. Una vez finalizada la administración del tratamiento, retire la envoltura de la sala de tratamiento y permita que se recupere en una jaula térmica de contención.Para prepararse para la cirugía, use cortadoras eléctricas para eliminar el vello de la cabeza de una rata A TN anestesiada. Limpie el área afeitada con aplicaciones repetidas de yodo-povidona y etanol al 70 %, trabajando dentro de una cabina de flujo laminar. Prepare los instrumentos estereotáxicos, la fresa micrométrica, el esterilizador con lecho seco y los controladores.Mantenga al animal caliente durante la cirugía colocándolo sobre una superficie calentada. Se usan guantes estériles antes y durante toda la cirugía, y se rocían con etanol al 70%. El equipo quirúrgico se mantiene en una cabina de flujo laminar dedicada.Para mantener condiciones asépticas, cubra al animal con una pequeña tela quirúrgica de modo que solo quede expuesta la cabeza. Coloque firmemente la cabeza del animal dentro del marco estereotáxico insertando barras auriculares en el conducto auditivo externo. Tenga extremo cuidado al deslizar la punta de la barra auricular dentro del canal auditivo.Coloque la barra incisiva enganchando los incisivos superiores de la rata y ajuste la altura de la barra al punto de referencia estándar. A continuación, apriete la pinza nasal. Centre la posición de la cabeza entre las barras auriculares con un movimiento lateral mínimo para alcanzar el cero estereotáxico.Una vez que el animal esté en posición, aplique un ungüento lubricante para los ojos para prevenir el secado. Aplique el ungüento una vez más durante la cirugía. Con un escalpelo estéril, realice una incisión cutánea de dos centímetros a lo largo de la línea media del cuero cabelludo.Limpie el área utilizando un aplicador estéril con punta de algodón. A continuación, inserte un retractor de disección para mantener abierta la capa de periostio. Aplique presión firme sobre el área si ocurre sangrado.Utilizando un aplicador de algodón sumergido en peróxido de hidrógeno al 1%, retire los tejidos blandos que cubren el cráneo hasta que las suturas bgma y lambda sean visibles. El aspecto más difícil de la cirugía estereotáxica es la colocación precisa de la cabeza del animal en el marco estereotáxico. Para marcar coordenadas estereotáxicas precisas en el cráneo del animal, utilice un atlas cerebral envolvente para determinar las coordenadas estereotáxicas exactas utilizando la bgma como referencia. En este estudio, el trasplante de células madre se realiza en cuatro sitios distintos utilizando las siguientes coordenadas estereotáxicas para marcar las ubicaciones en el cráneo; primero, identifique la bgma.A continuación, ponga a cero las tres coordenadas en el controlador de visualización digital. Una vez ajustado a cero, utilice las coordenadas predeterminadas para localizar los sitios de trasplante y haga una marca con un rotulador de punta fina sujeto a un porta sondas en el marco.Utilice un taladro para hacer agujeros de 0.35 milímetros a través del cráneo en cada ubicación marcada. Tenga cuidado para evitar dañar la membrana de Durham. Si ocurre sangrado durante el taladrado, aplique presión firme usando un aplicador de algodón.El animal ya está listo para el trasplante. Las células madre neurales humanas utilizadas para el trasplante deben prepararse con anticipación y mantenerse en hielo hasta que sean necesarias. Cuando esté listo, llene una jeringa microfina Hamilton de cinco microlitros y calibre 30 con la suspensión celular.Fije la jeringa llena a un portaprobe pequeño en el marco estereotáxico. Una vez colocada en la posición correcta, inserte cuidadosamente la punta de la aguja en el orificio del cráneo hasta que alcance la superficie del cerebro. Ponga a cero la coordenada DV en el controlador de pantalla digital y luego inserte suavemente la aguja hasta la profundidad deseada.Mantenga la aguja en su lugar durante un minuto. Después de este tiempo, inyecte las células a una velocidad de 0,25 microlitros por minuto durante un total de un microlitro. Mantenga la aguja en su lugar durante ocho minutos antes de retirarla para prevenir el reflujo capilar del contenido inyectado a través del trayecto de la aguja; retire lentamente la aguja del sitio de trasplante a una velocidad de 0,5 milímetros por minuto.Repita este procedimiento para los sitios de trasplante restantes. Cuando las inyecciones estén completas, retire el retractor de la piel y use pinzas romas para tirar suavemente de la piel hacia atrás sobre el cráneo. Cierre la herida aplicando de cuatro a cinco clips estériles de acero inoxidable después de la cirugía.Coloque el animal en una jaula calentada y supervise su recuperación. Un mes después del trasplante, se seccionaron muestras cerebrales y se tiñeron con BRDU para detectar las CNE trasplantadas y contratiñeron con hematina. La trayectoria de la aguja representada aquí por la línea roja indica la trayectoria de inyección que depositó las CNE en el sitio de liberación del trasplante designado como TR, como se observa.Aquí, las CNE trasplantadas mostraron una migración extensa desde las regiones del cuerpo calloso y CA1 hacia el giro dentado y las regiones CA3 del hipocampo. Es importante que el conjunto de imágenes de RM adquirido se utilice con precisión para alinearse con un conjunto correspondiente de imágenes de TC. La fusión adecuada de imágenes es fundamental para la identificación y el contorneo posterior de las regiones del hipocampo antes del procedimiento de tratamiento; adquiera imágenes ortogonales de rayos X para asegurar que el animal esté correctamente posicionado. Para garantizar el éxito del trasplante, mantenga en todo momento un entorno quirúrgico estéril.Marque las coordenadas de Otax con precisión y retire la microjeringa después de la inyección gradualmente para prevenir el reflujo de líquido. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar un procedimiento de radiación clínicamente relevante utilizando un modelo animal de su elección y cómo trasplantar quirúrgicamente células madre a una región precisa del cerebro.

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