Name: Contracción de la arteria mesentérica y Estudios de relajación con miografía cable automático (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-09-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Aprende miografía automática de cable para medir la contracción y relajación de arterias mesentéricas aisladas en ratas. Este método permite evaluar respuestas vasculares a fenilefrina y calcio con precisión.

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El proyecto descrito fue apoyada por números Premio HL064761 R01, R25 HL059868, 1SC1 HL099139 y P20 MD000175 forma Institutos Nacionales de Salud. El contenido es responsabilidad exclusiva de sus autores y no representa necesariamente las opiniones oficiales de los Institutos Nacionales de Salud.

1. El aislamiento de rata pequeña arteria mesentérica <ol><li> Anestesiar a los animales con isoflurano en una cámara cerrada y limpie el abdomen con el alcohol. </li><li> Realizar una laparotomía de la línea media para exponer cama mesentérica. </li><li> Con la tijera, quitar unos 85 cm de intestino con la alimentación de vasos con la arteria mesentérica superior. Corte el extremo proximal de la sección intestinal cerca del píloro y el extremo distal cerca de la unión ileo-coecal. Segmentos del intestino están aislados de ratas que están profundamente anestesiados con isoflurano y sacrificados por tórax abierto punción cardíaca. </li><li> Colocado sección extirpada en un plato de Petri que contiene recubierto PSS y llevar a cabo la disección de la arteria mesentérica a temperatura ambiente. </li><li> Precisar el extremo proximal del intestino en el lado derecho y el pin a cabo el resto de la intestineina las agujas del reloj (al final ieproximal sobre la vasculatura de alimentación a la izquierda en el extremo del intestino). </li><li> Diseccionar la rama II y III segmentos con un pedazo del segmento proximal. </li><li> Diseccionar la vena y aislar la arteria (con punto de ramificación en forma de V) y limpiar, eliminando el tejido adiposo y tejido conectivo. Evite el contacto directo con la arteria tirando suavemente con las pinzas y el corte a través de la membrana del tejido conectivo. </li></ol> 2. De montaje de la embarcación <ol><li> Corta dos segmentos cortos (≈ 4 cm) de una de tungsteno libre 40 m de alambre de acero inoxidable y con unas pinzas finas, inserte una en la luz de cada arteria teniendo cuidado de no dañar el endotelio. Use la punta del alambre para abrir la luz si es necesario. La sangre que salían de la nave es una buena señal de la luz se abre. </li><li> Llenar la cámara miografía con solución salina fisiológica (PSS; mM: 115 NaCl, 4,7 KCl, 1,4 MgSO 4 .7 H 2 O, 5 de NaHCO3, 1,2 K 2 HPO 4, 1,1 Na 2 HPO 4, 1,0 CaCl 2, 20 y HEPES 5 de glucosa, pH 7.4) con ácido ascórbico (100 M) a 37 ° C y el uso de fórceps transferir cuidadosamente el segmento del vaso roscado de la placa de Petri en la cámara a temperatura ambiente y la transferencia del segmento extirpado vaso proximal a la cámara de miografía y tire de la finales a lo largo del cable para alimentar el buque. Evitar el estiramiento del buque. </li><li> Asegure el extremo cercano del cable en sentido contrario en el tornillo de fijación cerca de la mandíbula derecha, conectado con el micrómetro. Coger el extremo libre del alambre con pinzas y seguro que las agujas del reloj en el tornillo de fijación hasta en la mandíbula derecha. Asegúrese de que el segmento de la flota a lo largo del cable se encuentra en la brecha entre las mandíbulas sin hacer contacto con la propia mandíbula. </li><li> Tornillo de las fauces de distancia, y alinear el segundo alambre en paralelo con el buque y la inserta en el extremo más alejado de la luz. Suavemente alimentar el alambre a través del lumen del segmento del vaso en un movimiento con el cable ya está montado como una guía. Mantenga el cable alrededor de 1 cm del recipiente para evitar que se extiende durante la maniobra, y evite tocar el endotelio. </li><li> Tornillo de la mandíbula juntos y asegurar que el segundo montaje se mueve por debajo de alambre de la primera protegido en la mandíbula derecha. </li><li> Asegure el extremo más cercano del segundo cable en el sentido de las agujas del reloj en el tornillo de fijación cerca de la mandíbula izquierda conectado al transductor. </li><li> Asegure el otro extremo del cable en el tornillo de fijación en la mandíbula izquierda y apretar para estirar el alambre. </li><li> Una vez que el montaje está completo, reiniciar el motor en el menú "montaje" y comenzar la normalización de la embarcación. </li></ol> 3. Normalización El miografía Auto de alambre doble sistema-510A tiene una función de normalización automatizado, el cual se evalúa a partir de la "normalización" del menú y permite que el buque que se alarga en una circunferencia interna normalizado por un procedimiento normalizado de acuerdo con el protocolo del fabricante después de equilibrar durante 30 minutos a 37 ° C. Una curva exponencial se ajusta entonces a los datos de la presión interna de la circunferencia. El procedimiento se define el diámetro de la luz (d 100) que la arteria se han tenido en vivo cuando está relajado y bajo una presión transmural de 100 mmHg 1 Los parámetros de normalización de la arteria mesentérica de rata son los siguientes.: <ol><li> Objetivo de presión transmural = 13,3 kPa (100 mm Hg). </li><li> Tiempo = 60 segundos, la duración de cada uno de los pasos de normalización. </li><li> IC 1 / 100 IC = 0,9 (IC = 1 circunferencia normalizado interna, IC 100 = circunferencia interna que corresponde a la presión deseada. </li><li> Calibración ocular 2 * Δ (mm / ocular división), 2 delta es por razones de programación. </li></ol> Medir la longitud de la arteria mesentérica montado usando el microscopio ocular lecturas cuando el nacimiento del pelo más de los extremos y cerca de la segm instalado en el buqueent. En pocas palabras, la longitud del segmento instalado en el buque se mide con un aumento máximo con un ocular calibrado ocular en el microscopio de disección. La lectura ocular con el pelo-line en el otro extremo del segmento (a 1) y el extremo más cercano del segmento (a 2) en las divisiones ocular se miden y registran. Estos valores, con las lecturas del micrómetro, antes y después de estirar el buque se registran y se entró en los menús para el programa para calcular la curva ajustada y el diámetro interior correspondiente a la presión transmural un objetivo de 100 mm Hg En nuestros estudios, las arterias se establece en el diámetro de la luz del d 1 = 0,9 xd 100, en el desarrollo de la fuerza activa es máximo. Desarrollo de la fuerza activa de ≥ 10 mN en las arterias mesentéricas de rata se considera óptimo para los experimentos de proceder. Los tejidos con menor fuerza activa se descartaron. 4. Medición de las respuestas Después de la normalización, las propiedades mecánicas y funcionales de los vasos se vuelven a activarse mediante la realización de un "nuevo comienzo estándar", que afecta a vasos de un reto con la aplicación repetida (normalmente 2 ó 3) de fenilefrina M 5 (PE) para obtener las contracciones reproducibles. Un típico "inicio normal" en nuestro laboratorio consta de una serie de estímulos y periodos de limpieza de la siguiente manera: <ol><li> Vuelva a colocar la cámara y empezar a cubrir miografía de aireación con un 95% de aire y 5% de CO 2. </li><li> Llene la cámara con PSS fresco (que contiene ácido ascórbico 100 M) </li><li> Contrato recipiente con M PE 5 durante 5 minutos y lavar 4 veces con tampón de PSS. </li><li> Después del último lavado, cámara de recambio con PSS y esperar 3 minutos antes de repetir los pasos (ii) y (iii). </li></ol> Después de la salida estándar, la arteria está listo para el experimento. Relajaciones de los buques contratados son evaluados por adición acumulativa de aumento de las concentraciones de CaCl 2 (0,5 - 4 mm). Buques, cuando se usan inhibidores se pre-incubaron con los compuestos en la cámara de miografía durante 20 minutos y presente durante los ensayos. 5. Análisis de Datos La "normalización" de datos para los buques y los trazados de la fuerza, convierte directamente a los datos de texto, fueron analizados con el programa SigmaPlot 11,0 gráficos (Systat Software, Point Richmond, CA) y se representa como se muestra en la Figura 1. Respuesta a la concentración de datos, calculado a partir de los trazados, se analizaron mediante la determinación de la CE 50 valores a partir de datos experimentales instalados en una función logística de cuatro parámetros en el menú de Farmacología del programa. Las comparaciones entre grupos y dentro de los grupos se realizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) y las diferencias con p &lt;0,05 se consideró significativo. 6. Los resultados representativos: <table border="1"><tbody><tr><th> Parámetros </th><th> Wistar </th><th> Dahl sensibles a la sal </th><th> Dahl resistentes a la sal </th></tr><tr><td> L 100 (m) </td><td> 83,26 ± 2,33 </td><td> 91,52 ± 4,67 </td><td> 117.45 ± 8.43 * </td></tr><tr><td> X 1 </td><td> 604,21 ± 41,97 </td><td> 752,24 ± 85,25 </td><td> 745,84 ± 110,09 </td></tr><tr><td> r 2 </td><td> 0,99 ± 0,003 </td><td> 0,97 ± 0,008 </td><td> 0,97 ± 0,007 </td></tr></tbody></table> * La diferencia entre los valores de L 100 Wistar y la República Dominicana son estadísticamente significativas. Shapiro-Wilk test de normalidad pasado (p = 0,588), análisis de varianza de Igualdad aprobada (p = 0,237). L 100 = Diámetro interior del segmento de montaje correspondiente a la presión transmural de destino. X 1 = El valor de posición micro requerida para estirar el instalado en el buque a su circunferencia normalizado interna (es decir, el valor de la lectura del micrómetro en el que los experimentos se llevaron a cabo). r 2 = coeficiente de regresión para el ajuste de (X i, Y i) a una curva exponencial. Nota: El procedimiento detallado se describe en el manual del sistema 510A miografía 6. Tabla 1. Ejemplo de lectura de los parámetros de normalización para los segmentos de la arteria mesentérica de Wistar, DS y DR de programa básico se muestra en el menú "normalización". Los valores son medias (± SEM) de 5 animales. * Las diferencias entre los valores de L 100 Wistar y DS son estadísticamente significativas (p &lt;0,05). <table border="1"><tbody><tr><th> Wistar </th><th> DS </th><th> DR </th></tr><tr><td> 14,2 ± 0,6 </td><td><td> 20,9 ± 1,3 * </td></td></tr></tbody></table> Tabla 2. Tensiones adelantados (MN) en las arterias mesentéricas aisladas de Wistar, DS y ratas DR, después de las aplicaciones de 5 M PE a cada uno. Los valores informados son medias (± SEM) de 6-8 animales. * Significativamente diferente de los controles Wistar (p &lt;0,05). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Ca 2 + e inducida por la relajación de la arteria mesentérica PE-contratados a partir de una rata Wistar montado en un cable miografía en solución salina fisiológica que contiene 1 mM Ca 2 +. La arteria se equilibró durante 30 min a 37 º C con aireación constante y las respuestas a Ca 2 + e determinado. Un grupo de representantes de seguimiento en la adición de 5 M PE seguido por la adición acumulativa de Ca 2 + se muestra. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Ca 2 + e inducida por la relajación de la arteria mesentérica PE-contratados a partir de una rata DS montado en un cable miografía en solución salina fisiológica que contiene 1 mM Ca 2 +. La arteria se equilibró durante 30 min a 37 º C con aireación constante y las respuestas a Ca 2 + e determinado. Un grupo de representantes de seguimiento en la adición de 5 M PE seguido por la adición acumulativa de Ca 2 + se muestra. Ca 2 + de relajación se vio gravemente comprometida en este tejido en comparación con los de ratas Wistar y la República Dominicana. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Ca 2 + e inducida por la relajación de la arteria mesentérica PE-contratados a partir de una rata DR montado en un cable miografía en solución salina fisiológica que contiene 1 mM Ca 2 +. La arteria se equilibró durante 30 min a 37 º C con aireación constante y las respuestas a Ca 2 + e determined.A fuerza representativa de seguimiento en la adición de 5 M PE seguido por la adición acumulativa de Ca 2 + se muestra. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3119/3119fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 4"> Figura 4. A. [Ca 2 +] e-respuesta de las curvas. Diagrama de barras que muestra B. CE 50 valores para la relajación determinada por ajuste de los datos a una expresión curve.C.CaR cuatro parámetros logísticos en las máquinas recreativas mesentéricos aislados de ratas DR y DS.

<ol><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260, 617-619 (1976).</li>
<li>Bevan, J. A., Osher, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+direct+method+for+recording+tension+changes+in+the+wall+of+small+blood+vessels+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Agents+Actions%22%5BJournal%5D)">A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro.</a> Agents Actions. 2, 257-260 (1972).</li>
<li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedures+for+investigating+of+small+vessels+using+small+vessel+myograph%5BTitle%5D)+AND+%22DMT+Danish+Myo+Technology%22%5BJournal%5D)">Procedures for investigating of small vessels using small vessel myograph.</a> DMT Danish Myo Technology. , (2004).</li>
<li>Angus, J. A., Wright, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+to+study+the+pharmacodynamics+of+isolated+large+and+small+blood+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Techniques to study the pharmacodynamics of isolated large and small blood vessels.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 44, 395-407 (2000).</li>
<li>Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+smooth+muscle+cells+in+the+walls+of+arterial+resistance+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels.</a> J. Physiol. 275, 85-101 (1978).</li>
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<li>Eley, S. L., Allen, C. M., Williams, C. L., Bukosi, R. D., Pointer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+thiazide+on+renal+interstitial+calcium%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Action of thiazide on renal interstitial calcium.</a> Am. J. Hypertens. 21, 814-819 (2008).</li>
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<li>Breitwieser, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+calcium+as+an+integrator+of+tissue+function%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biochem.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Extracellular calcium as an integrator of tissue function.</a> Int. J. Biochem. Cell Biol. 40, 1467-1480 (2008).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Wang, Y., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+chronic+sensory+denervation+on+Ca2%2B-induced+relaxation+of+isolated+mesenteric+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of chronic sensory denervation on Ca2+-induced relaxation of isolated mesenteric resistance arteries.</a> Am. J. Physiol. 274, 1655-1661 (1998).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Ishioka, N., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+Ca2%2B+undergoes+dynamic+changes+sufficient+to+stimulate+nerve-dependent+Ca2%2B-induced+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Interstitial Ca2+ undergoes dynamic changes sufficient to stimulate nerve-dependent Ca2+-induced relaxation.</a> Am. J. Physiol. 276, 1035-1042 (1999).</li>
<li>Mupanomunda, M. M., Tian, B., Ishioka, N., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+interstitial+Ca2%2B%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Renal interstitial Ca2+.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 278, F644-F649 (2000).</li>
<li>Awumey, E. M., Hill, S. K., Diz, D. I., Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytochrome+P-450+metabolites+of+2-arachidonoylglycerol+play+a+role+in+Ca2%2B-induced+relaxation+of+rat+mesenteric+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cytochrome P-450 metabolites of 2-arachidonoylglycerol play a role in Ca2+-induced relaxation of rat mesenteric arteries.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2363-2370 (2008).</li>
<li>Chen, W., Bergsman, J. B., Wang, X., Gilkey, G., Pierpoint, C. R., Daniel, E. A., Awumey, E. M., Dauban, P., Dodd, R. H., Ruat, M., Smith, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presynaptic+external+calcium+signaling+involves+the+calcium-sensing+receptor+in+neocortical+nerve+terminals%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Presynaptic external calcium signaling involves the calcium-sensing receptor in neocortical nerve terminals.</a> PloS One. 5, e8563-e8563 (2010).</li>
<li>Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+perivascular+sensory+nerve+Ca2%2B+receptor+and+blood+pressure+regulation%3A+a+hypothesis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Hypertens%22%5BJournal%5D)">The perivascular sensory nerve Ca2+ receptor and blood pressure regulation: a hypothesis.</a> Am. J. Hypertens. 11, 1117-1123 (1998).</li>
<li>Bukoski, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+Ca2%2B+and+blood+pressure%3A+evidence+that+Ca2%2B-sensing+receptor+activated+sensory+nerve+dilator+activity+couples+changes+in+interstitial+Ca2%2B+with+vascular%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Dietary Ca2+ and blood pressure: evidence that Ca2+-sensing receptor activated sensory nerve dilator activity couples changes in interstitial Ca2+ with vascular.</a> 16, 218-221 (2001).</li>
</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

La hipertensión es una causa importante de morbilidad cardiovascular, cerebral y renal / mortalidad. La aparición de la hipertensión arterial es alta en la población y la hipertensión sensible a sal es particularmente alta en el envejecimiento de la población, y más frecuente en los negros que los blancos. Se cree que esto se debe a la tendencia de los negros a retener sodio en los riñones 9. Sensibilidad a la sal es un factor importante que contribuye a la enfermedad renal y se asocia con la disfunción endot...

<table border="1"><tbody><tr><th> Nombre de equipo / reactivo </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th><th> Comentarios (opcional) </th></tr><tr><td> Miografía Auto de alambre doble sistema-510A-DMT EE.UU., Inc. </td><td> Atlanta, GA. </td><td> 100151 </td><td></td></tr><tr><td> Sistema de Adquisición de Datos PowerLab/4SP </td><td> ADInstruments, Colorado Springs, CO </td><td> ML750 </td><td> Nuevos modelos con 16.4 canales de entrada están disponibles. </td></tr><tr><td> Dell Dimension XPS Gen 4 Ordenador </td><td> Dell </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Stemi SV II (Apo) microscopio de disección con Ocular </td><td> Carl Zeiss International. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Wistar, Dahl sensibles a la sal, Dahl resistentes a la sal ratas </td><td> Harlan Sprague Dawley, Indianapolis, IN. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Roedores chow </td><td> Harland Tekland, Madison, WI. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fenilefrina </td><td> Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Otros productos químicos </td><td></td><td></td><td> Todos los productos químicos utilizados fueron de los grados más puros disponibles en el mercado. </td></tr></tbody></table>

contracción de la arteria mesentérica y estudios de relajación con miografía cable automático

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Vasos proximales de resistencia, como las arterias mesentéricas, contribuyen sustancialmente a la resistencia periférica. Estas pequeñas embarcaciones de entre 100 a 400 micras de diámetro, en función principalmente de dirigir el flujo de sangre a varios órganos de acuerdo a los requisitos generales del cuerpo. La arteria mesentérica de rata tiene un diámetro superior a 100 micras. La técnica miografía, describió por primera vez por Mulvay y Halpern 1, se basó en el método propuesto por Bevan y Osher 2. La técnica proporciona información sobre las embarcaciones pequeñas en condiciones isométricas, donde se evita el acortamiento sustancial de la preparación muscular. Dado que la producción de fuerza y ​​sensibilidad de los buques a diferentes agonistas depende de la magnitud de estiramiento, de acuerdo a la tensión activa de larga duración respecto, es esencial para llevar a cabo estudios de contracción isométrica en condiciones de evitar el cumplimiento de los cables de montaje. Alambres de acero inoxidable son preferibles a los cables de tungsteno debido a la oxidación de este último, que afecta a las respuestas registradas 3. La técnica permite la comparación de las contracciones inducidas por el agonista de los vasos montado en la obtención de pruebas para la función normal de los receptores del músculo liso vascular de la célula. Hemos demostrado en varios estudios que las arterias mesentéricas aisladas que tienen un contrato con phenylyephrine relajarse con la adición de concentraciones acumuladas de calcio extracelular (Ca 2 + e). Los resultados nos llevaron a concluir que los nervios sensoriales perivasculares, que expresan la proteína G-acoplada Ca 2 +-receptor sensible (CAR), mediar esta respuesta vasodilatación. El uso de un método de transferencia bancaria miografía automatizado, se muestra aquí que las arterias mesentéricas de Wistar, Dahl sensibles a la sal (DS) y Dahl resistentes a la sal (DR) las ratas responden de manera diferente a Ca 2 + e. Los tejidos de ratas Wistar mostraron mayor Ca 2 +-sensibilidad en comparación con los de DR y DS. Reducción de la expresión de coches en las arterias mesentéricas de ratas DS se correlaciona con una reducción de Ca 2 + e inducida por la relajación de los aislados, pre-contratados arterias. Los datos sugieren que el coche es necesario para la relajación de las arterias mesentéricas en tono adrenérgico aumentado, como ocurre en la hipertensión, e indicar un defecto inherente en la vía de señalización del CaR en animales de Dahl, que es mucho más grave en el DS. El método es útil para determinar in vivo la reactividad vascular ex en arterias de resistencia mesentéricas y similares los pequeños vasos sanguíneos y las comparaciones entre los distintos agonistas y / o antagonistas pueden ser fácil y constantemente evaluado de lado a lado 6,7,8.

Un método automatizado para miografía las medidas de fuerza en las arterias mesentéricas aisladas se describe. Se emplea un miografía Auto Mulvany-Halpern alambre doble 510A para determinar las respuestas a la fenilefrina y el calcio extracelular. El método permite la determinación constante de respuestas a los agonistas isométricos en los pequeños vasos de diámetros de 60 a 300 micras, de forma independiente.

Contracción de la arteria mesentérica y Estudios de relajación con miografía cable automático

Los vasos de resistencia proximales, como las arterias mesentéricas, contribuyen sustancialmente a la resistencia periférica. Estos vasos pequeños de entre...

Este procedimiento utiliza ratas sensibles y resistentes a la sal para comparar la reactividad de las arterias de resistencia mesentéricas frente a la tensión inducida por fenilefrina en presencia de calcio extracelular. Esto se logra primero aislando el arco mesentérico de los animales y diseccionando las ramas de las arterias de resistencia. A continuación, se introduce un primer alambre de acero inoxidable a través de un segmento corto de la arteria diseccionada y se monta el vaso en la cámara del miógrafo.Luego, se introduce un segundo alambre de acero inoxidable a través de la luz del vaso sanguíneo en paralelo al primer alambre. A continuación, se estira el vaso montado hasta alcanzar una circunferencia interna normalizada. El paso final del procedimiento consiste en reactivar el vaso mediante aplicaciones repetidas de fenilefrina y relajarlo con aplicaciones acumulativas de calcio.En última instancia, los resultados muestran cambios en la tensión del vaso, que pueden convertirse en una curva de respuesta al calcio y utilizarse para determinar los valores de CE 50. Para comparación. Tuvimos la idea inicial de usar este método cuando descubrimos que la red nev de baterías Maso

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Investigación

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Medicina

Las mediciones de la KV7 (KCNQ) la actividad del canal de potasio en los miocitos aislados arteriales (patch clamp utilizando técnicas electrofisiológicas) en paralelo con las medidas de respuesta constrictor / dilatador (utilizando miografía presión) puede revelar información importante acerca de las funciones de los canales KV7 en la fisiología del músculo liso vascular y farmacología.

Exploración del músculo liso arterial KV7 función del canal de potasio mediante electrofisiología Patch Clamp y miografía presión

En miografía de presión, un pequeño segmento intacta de un recipiente está montado sobre dos pequeñas cánulas y se presuriza a una presión luminal adecuado. A continuación, se describe el método para medir la respuesta de vasodilatación del ratón...

La evaluación de la resistencia murino Función Arterial Utilizando miografía Presión

Miografía de presión se utiliza para evaluar vasoactividad de las pequeñas arterias que se desarrollan constricción sostenida cuando se presuriza. Este manuscrito proporciona un protocolo detallado para evaluar en segmentos aislados de pequeñas arterias mesentéricas de ratas, vasoactividad y el efecto de la presión intraluminal del diámetro vascular.

Evaluar Miogénica Respuesta y Vasoactividad En arterias mesentéricas Resistencia Usando Miografía Presión

Este manuscrito describe en vitro protocolos video microscopia para evaluar la función vascular en las arterias de resistencia cerebral de rata. El manuscrito también describe técnicas para evaluar la densidad de microvessel con fluorescencia marcada perfusión lectinas y tejido mediante flujometría Doppler láser.

Evaluación de mecanismos de Control Vascular utilizando microscopia Video de arterias de resistencia aislada de ratas

La técnica del miógrafo de alambre se utiliza para investigar las funciones del músculo liso vascular y nuevos fármacos de la pantalla. Se presenta un protocolo detallado para medir la contractilidad isométrica de la arteria mesentérica de ratón y para la detección de nuevos relajantes del músculo liso vascular.

Medición de la contractilidad isométrica de la arteria mesentérica de ratón con cable miografía

El protocolo describe el uso de la miografía por cable para evaluar la tensión isométrica transmural de las arterias mesentérica aisladas de los ratones, con especial consideración de la modulación por factores liberados de las células endoteliales y los tejidos adiposo perivasculares.

Evaluación de la capacidad de respuesta del tono vascular utilizando arterias mesentérica aisladas con un enfoque en la modulación por tejidos adiposo perivasculares

El presente protocolo describe los conceptos y la aplicación técnica de la técnica del miógrafo tensométrico utilizando un sistema de miógrafo multicámara en la evaluación experimental ex vivo de la función endotelial aórtica del ratón.

Medición de la vasorelajación dependiente del endotelio en la aorta torácica del ratón mediante miografía tensométrica de cámara de pequeño volumen

El intestino delgado se expone frecuentemente a las toxinas que pueden influir en el flujo sanguíneo y afectar negativamente a la absorción de nutrientes. El uso de una arteria multimyograph y mesentérica y la vena aislados, compuestos o toxinas de interés puede ser examinado para vasoactividad.

El aislamiento y uso de las Secciones de bovino mesentérica arteria y la vena como un bioensayo para la Prueba de Vasoactividad en el intestino delgado

Describimos una técnica quirúrgica que produce una lesión con alambre en la arteria femoral de ratones para inducir hiperplasia neointimal para servir como sistema de prueba modelo para la administración perivascular de compuestos terapéuticos para la inhibición de la reestenosis.

Modelo murino de la arteria femoral Lesiones Alambre con implantación de un perivascular Drug Delivery Patch

El modelo de lesión de alambre arteria femoral de ratón de la reestenosis es técnicamente difícil. En este protocolo se muestran los detalles técnicos clave esencial para llevar a cabo con éxito la lesión de alambre para inducir neointima consistente para estudios de reestenosis.

Un modelo murino de restenosis arterial: Aspectos Técnicos del femoral Lesiones alambre

Aprende miografía automática de cable para medir la contracción y relajación de arterias mesentéricas aisladas en ratas. Este método permite evaluar respuestas vasculares a fenilefrina y calcio con precisión.

Contracción de la arteria mesentérica y Estudios de relajación con miografía cable automático

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