Name: El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-24T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Aprende el cateterismo femoral arterial y venoso en ratas para investigación cardiovascular. Este método permite medir presión sanguínea y administrar fármacos en animales conscientes de forma crónica.

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Los autores desean agradecer al Dr. Andrew King, PhD y el rey Katrina por la contribución de las ilustraciones. NIH: R00HL087927.

1. Antes de iniciar procedimiento quirúrgico Nota: Antes de iniciar cualquier procedimiento de animales asegurarse de que usted ha obtenido el permiso correspondiente a través de su institución / organización. Al igual que con todas las cirugías de la supervivencia, asegúrese de que la cirugía se realiza bajo condiciones estériles, y la medicación para el dolor y antibióticos apropiados necesarios se utilizan para un resultado exitoso. <ol><li> Antes de comenzar el procedimiento de cateterismo evaluar los catéteres mediante el lavado con solución salina estéril para asegurar que son patentes. </li><li> Anestesiar la rata. </li><li> Prepare la rata para el procedimiento quirúrgico. <ol class="lalpha"><li> Afeitarse la piel de las regiones quirúrgicas, que incluyen la parte posterior del cuello (entre los omóplatos) y la región de la pierna interior. </li><li> Utilizando Betadine y un lavado de etanol al 70%, respectivamente, matorrales de las regiones afeitado quirúrgico de partida en el centro y hacer un barrido hacia fuera circular. Repetiresto 3 veces para cada región, terminando con una limpieza final con etanol al 70%. </li><li> Colocar el animal sobre una superficie estéril y cubra el lugar estéril sobre las áreas quirúrgicas. (El uso de Press-n-Seal es un drapeado quirúrgica ideal que permite al investigador para controlar el animal durante todo el procedimiento.) </li></ol></li><li> Asegurar que todos los instrumentos quirúrgicos para el procedimiento quirúrgico han sido esterilizadas. </li></ol> 2. Preparación de las áreas quirúrgicas para la colocación del catéter <ol><li> Con la rata por la que se boca abajo (sobre su estómago), que aproximadamente de ½ pulgada (12 mm) incisión horizontal en la parte posterior del cuello a nivel de los hombros con unas tijeras o un bisturí, y luego contundente disección de una inyección subcutánea "bolsillo" en la parte de atrás de aproximadamente el tamaño de una moneda. Este será utilizado como un área para colocar una pequeña cantidad de tubería que compense el crecimiento del animal y / o movimiento, es decir, para que el catéter no se puso y se elimina así de la arteria que era el lugard pulgadas (Como alternativa, este paso puede ser realizado inmediatamente antes de la tunelización del catéter.) </li><li> Coloque el ratón sobre su espalda (posición supina) y hacer una incisión en la zona inguinal [aproximado de ½ pulgada (12 mm) a lo largo de la incisión el ángulo natural de la pata trasera. </li><li> Blunt disección para separar el tejido conectivo (Figura 1) (puede usar tijeras con puntas romas, pinzas hemostáticas, hisopos de algodón, etc) (por lo general mediante la celebración de las tijeras de punta roma y / o hisopos de algodón en un ángulo de 45 grados, lo que garantiza la localización más fácil de la región de interés) hasta que la arteria y la vena femoral se exponen. <ol class="lalpha"><li> La vena es de color rojo oscuro y la arteria es más clara y más brillante que la vena. El nervio que corre a lo largo de la arteria es de color blanquecino en el tono. </li></ol></li><li> Blunt disección en la región de la pierna para hacer una región pequeña y abierta por debajo de la piel (de bolsillo, es decir, aproximadamente del tamaño de un cuarto) a lo largo del interior de la pierna para la colocación de una pequeña sección de la catheter (una vez más a tener en cuenta el movimiento de los animales y el crecimiento de los animales si la colocación crónica). </li><li> Coloque los separadores en el área de la incisión para que usted pueda ver completamente la arteria y la vena. </li><li> Utilizando unas pinzas de punta fina con cuidado separar el nervio (de color blanquecino) que es a lo largo de la arteria femoral de la arteria y la vena. (Figura 2) Tenga cuidado de no cortar o dañar el nervio. </li><li> Separar la arteria y la vena como una unidad, tratando de exponer una sección de aproximadamente ¼ de pulgadas de largo (5-7 mm) de la arteria / vena. </li><li> Repita el proceso en la separación de la vena de la arteria. Mantenga sus instrumentos quirúrgicos (pinzas de punta fina, es decir) perpendicular a los vasos y los vasos separados en paralelo. Esto ayuda a evitar desgarros, pinchazos o daños en los vasos. Mediante la colocación de las pinzas de punta fina con cuidado entre la arteria y la vena desde abajo y poco a poco la apertura de las pinzas y la repetición de este, que separará poco a poco los vasos. Nota: si se rasgan u observar algunossangrado use un hisopo de algodón estéril y / o 2 x 2 de gasa y ejercer presión sobre el área hasta que el sangrado se ha detenido, y luego continuar con la cirugía. </li></ol> 3. Túnel del catéter <ol><li> De solución salina estéril empapada lugar de 2 x 2 gasa sobre la incisión y gire el animal a su estómago. </li><li> Coloque el Rochester Pean fórceps (pinzas rectas largas) en la incisión en la espalda que se hizo anteriormente y guía de los fórceps por vía subcutánea en la parte posterior al nivel de las caderas [garantizar las puntas de las pinzas hemostáticas están apuntando hacia arriba, no (hacia la columna ) para evitar lesiones en la médula espinal]. Aproximadamente a la región de la cadera a su vez la punta de la pinza hemostática hacia la incisión que se hizo en la región de la pierna y empujar la punta de los hemostáticos de la incisión de la pierna preparada. </li><li> Pellizque suavemente el extremo del catéter (no es el fin que se insertará en la arteria / vena) con las pinzas y tire suavemente los catéteres a través de la cavidad que se hizoy, finalmente, la incisión en el cuello. </li><li> Coloque la punta roma apropiada aguja de la jeringa llena con 20 U / ml de heparina / solución salina en el extremo de las sondas correspondientes y llenar los catéteres (asegurarse de que no hay burbujas de aire) con la heparina / solución salina. Una vez más, comprobar que los catéteres son patentes y no el daño ha llegado a los catéteres. Deje las jeringas adjunta al final de las líneas de catéter para asegurar el aire no es capaz de entrar en las vías del catéter y gire a la rata en la espalda una vez más. </li></ol> 4. La inserción de los catéteres en la vena femoral y la arteria (Figura 3) <ol><li> Coloque una hoja doblada estéril 4,0 de seda / hilo por debajo de la vena femoral y luego se corta la seda en el extremo doblado. Ahora habrá dos piezas de seda en la vena. O bien, colocar 2 piezas de 4,0 seda en la vena de forma individual. </li><li> Separada de la seda que ha colocado en la vena, una pieza hacia la pierna (extremo distal) y el otro hacia el cuerpo. Tes decir, una ligadura suelta en la parte más cercana al cuerpo, a continuación, utilizando pinzas hemostáticas pequeñas, sujete y tire de la seda enseñado, pero no apretar el nudo. Tire de la otra pieza de seda en lo posible hacia la pierna (extremo distal) y este empate en un nudo triple, captar la seda con pinzas hemostáticas pequeñas y tirar enseñado. Este método permite que las venas se llenan de sangre, por lo que es más fácil hacer la incisión de la que se requiere para la inserción del catéter (paso 4). </li><li> Colocar 1-2 gotas de lidocaína en la vena. </li><li> Utilizando el micro-disección Vanna tijeras, hacer una pequeña incisión en la vena a través de aproximadamente ¼ y en un ángulo de 45 grados. </li><li> Coloque unas pinzas de punta fina (45 pinzas) en la incisión y con otro par de pinzas, con cuidado de alimentación en el catéter de la vena. Abra con cuidado las pinzas que se colocan en la vena, ya que esto permitirá a los investigadores colocar suavemente el catéter venoso en las pinzas y en la vena. </li><li> Cuando el catéter está completamente insertado (aprox. 6-7 cm) (la hora de hacer el catéter se coloca una marca en la sonda para asistir al cirujano en la identificación cuando el catéter está completamente insertado) (esto coloca el catéter venoso en la vena cava abdominal), apretar la ligadura anterior alrededor de la vena y el catéter, un nudo triple (asegurarse de que no es la oclusión de la vena). Utilice la sutura de seda cerca de la pierna (ligadura posterior) para asegurar de nuevo el catéter (nudo triple) y asegurar la colocación. Poco a poco marcha atrás de la jeringa hasta que haya un poco de sangre visible en el catéter, el cual ayuda a asegurar que los nudos de sutura no estén demasiado apretadas y que el catéter es funcional. Después de comprobar, presione el émbolo hasta que la sangre ya no es visible en el catéter. Nota: es posible insertar dos catéteres en la vena femoral si es necesario. </li><li> Repita los pasos 9-13 para colocar un catéter en la arteria femoral con las siguientes excepciones: <ol class="lalpha"><li> Lazo más cercano a la pierna de seda (posterior), con un nudo triple y tirar de tauGHT antes de atar la ligadura suelta cerca del cuerpo (anterior) antes de hacer la incisión para la colocación del catéter. Esto permitirá que la arteria se llene de sangre por lo que es más fácil de cortar. Asegúrese de que la sutura proximal es jalada para ocluir la arteria antes de cortar la arteria. Esto evitará la pérdida de sangre cuando se hace el corte. </li><li> Insertar el catéter arterial unos 5 cm de la arteria femoral (esto coloca el catéter en la aorta abdominal). </li><li> Al asegurar que el catéter con la sutura, asegúrese de que la sutura no es demasiado apretado y la oclusión del catéter. </li></ol></li></ol> 5. Quirúrgica Wrap-up <ol><li> Hacer una moneda de diez centavos de bucle trimestre de tamaño en los catéteres y el lugar en el interior de la pierna (el bucle debe caber en el área que fue contundente disección anterior). Después de colocar los catéteres, los seguros, con 2.1 puntos de 5.0 sutura quirúrgica en la capa muscular. </li><li> Cerrar la incisión con 4,0 Ethilon con no continua sutures. </li><li> A su vez la rata en su estómago y hacer que otro lazo en los catéteres sobre el tamaño de una moneda y el lugar en el bolsillo disecado en la espalda. Cerrar la incisión con una sutura. </li><li> Con una gota de vetbond, seguro de los catéteres en la espalda. </li><li> Fije el catéter cerca de la incisión de vuelta con pinzas hemostáticas acolchado y eliminar las jeringas de los extremos. </li><li> Ajustar la rata con una chaqueta de tipo correa, tapa de los catéteres (para mantener el bloqueo de heparina), y quitar el relleno pinzas hemostáticas. </li></ol> - Por mantenimiento a largo plazo reemplazar la solución salina del catéter con 20 U / ml de heparina / solución salina. 6. Mantenimiento de catéter (guantes estériles deben ser usados ​​durante el procedimiento) <ol><li> Sujete el catéter con pinzas acolchada. </li><li> Retire el tapón del catéter. </li><li> Coloque una jeringa con punta roma solución de bloqueo en el catéter. </li><li> Quite las pinzas fórceps. </li><li> Llenar el catéter con la solución de bloqueo (el volumen es pre-determined-por lo general 0,3 ml). </li><li> Fije el catéter durante la descarga para evitar cualquier reflujo de sangre hacia la punta del catéter y retire la jeringa. </li><li> Vuelva a colocar el tapón del catéter. </li><li> Quite las pinzas las pinzas y empuje suavemente el enchufe en un poco para asegurar que no hay sangre en la punta del catéter. </li></ol> 7. De muestra de sangre (guantes estériles deben ser usados ​​durante el procedimiento) Sujete el catéter con pinzas acolchada. <ol><li> Retire el tapón del catéter. </li><li> Retire lentamente la solución de bloqueo con una jeringa de punta roma y desechar. </li><li> Conecte la jeringa a la sonda de muestreo y retirar lentamente la muestra. </li><li> Sujete el catéter con pinzas acolchada y el lugar de una jeringa con una solución de bloqueo en el catéter y volver a llenar el catéter con la solución de bloqueo. </li><li> Fije el catéter mientras que re-llenar el catéter con la solución. </li><li> Vuelva a insertar el conector del catéter. </li><li> Retire la pinza y empuje suavemente acolchados t que conecte un poco más. </li></ol> 8. De infusión de fármacos <ol><li> Sujete el catéter con pinzas acolchada. </li><li> Retire el tapón del catéter. </li><li> Retire lentamente la solución de bloqueo con una jeringa de punta roma y desechar. </li><li> Coloque la jeringa llena de drogas con el catéter e inyectar la sustancia en el animal. <ul><li> se puede usar una llave de 3 vías, así como un intermedio, si se requieren múltiples inyecciones, por lo que requiere menor cantidad de líquido de infusión en el animal. </li><li> también se puede conectar una bomba de infusión constante de la jeringa con un filtro estéril para infusión continua. </li></ul></li><li> Abrazadera con unas pinzas acolchadas y el lugar de una jeringa con una solución de bloqueo en el catéter y volver a llenar el catéter con la solución de bloqueo. </li><li> Fije el catéter mientras que re-llenar el catéter con la solución. </li><li> Vuelva a insertar el conector del catéter. </li><li> Retire las pinzas acolchadas y empuje suavemente el enchufe de un poco más. </li></ol>e "Sangre&gt; 9. presión y frecuencia de muestreo del Corazón <ol><li> Fije el catéter arterial con pinzas acolchada y quitar el tapón del catéter. </li><li> Conecte la línea arterial para el transductor de presión. </li><li> Siga las instrucciones del fabricante para el uso del software para la recopilación de la presión arterial. </li><li> Al finalizar el período de control de la presión arterial, el uso de fórceps acolchado pinza del catéter y se desconecta del transductor. </li><li> Enjuague el catéter con la solución de bloqueo y coloque el tapón del catéter como se describió anteriormente. </li></ol> 10. Resultados representante Una medida de la presión arterial representante fue tomado de un animal consciente se mueve libremente y se presenta en la Figura 4. Fenilefrina (3 ug / kg, iv), un agonista de los receptores alfa-1 adrenérgicos, se administró en la línea de la vena femoral para aumentar la presión arterial, al mismo tiempo que la medición de la presión arterial de la línea arterial femoral. Fentolamina (4 mg / kg, iv),un selectivo antagonista de los alfa-adrenérgicos, se administró después a disminuir la presión arterial. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig1.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Disección roma de los tejidos. Con la rata en su espalda, se le han hecho alrededor de ½ pulgada (12 mm) incisión en el ángulo de las patas traseras y el uso de tijeras de punta roma o pinzas hemostáticas se romo disecar el tejido conectivo para exponer la arteria y la vena femoral. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig2.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Separación de la arteria femoral y la vena del tejido conectivo. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig3.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Colocación de catéter. Vanna utilizando micro-disección tijeras lugar de una pequeña incisión de aproximadamente ¼ de la manera a través de la nave en un ángulo de 45 grados (arriba) y el lugar unas pinzas de punta fina en the incisión y con otro par de pinzas de alimentación del catéter en el vaso (medio). Por último, una vez finalizada la colocación del catéter de sutura el catéter en su lugar (abajo). <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig4.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 4"> Figura 4. Representante medida de presión arterial tomadas de un animal consciente se mueve libremente.

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Arterial y la cateterización de la vena se han utilizado históricamente para tanto aguda como crónica monitor de presión arterial, la sangre de la muestra y entrega de sustancias en el modelo de rata con animales de experimentación 1-4. Una ventaja importante de estas instrumentaciones quirúrgicas es que permite que los procedimientos de supervisión, incluyendo, la administración de muestra de sangre de drogas y control de la presión arterial, que se realizará con un mínimo de perturbaciones y / o estrés en el animal 1. Numerosos investigadores han escrito los protocolos y tienen metodologías específicas por lo que su laboratorio lleva a cabo el procedimiento quirúrgico 5-8. El vídeo y las ilustraciones muestran lo que nuestro laboratorio ha encontrado para tener éxito en lo que respecta a la arteria femoral y el procedimiento de cateterización venosa. Las ratas son comúnmente utilizados en el laboratorio para una multitud de estudios científicos debido a su pequeño tamaño y la comodidad en su manejo. Hay varios lugares donde una crónicacatéter puede ser colocado dentro de un animal, incluyendo la vena yugular, la aorta abdominal, la arteria carótida y la arteria femoral, para nombrar unos pocos. La localización femoral de ratas a los resultados del cateterismo crónica en una mayor duración de la permeabilidad del catéter y que la recuperación más rápida de peso del animal antes de la cirugía en comparación con otros lugares del catéter 9. Numerosos investigadores han usado catéteres para extracción de sangre aguda, así como crónicas 1-5,11-13. En muchos estudios de sangre múltiples sorteos se requiere de un animal y la canalización externa / cateterismo es una metodología que es ventajoso debido a su naturaleza no traumática, y además se puede hacer mientras el animal está consciente, por lo tanto no está limitado por los efectos de los anestésicos y también el animal puede ser libre movimiento 1,10. El mejor método para obtener muestras de sangre y para medir las hormonas del estrés en los roedores se ha debatido durante mucho tiempo 6,13. En cuanto a la farmacocinética studies, la cateterización de la investigación con animales permite repetir la toma de sangre con un mínimo de moderación cuando se utiliza un sistema de catéter implantados en forma permanente. Además, los estudios han demostrado reducción de la concentración basal de la adrenalina, la noradrenalina y la dopamina en el plasma de las ratas se mueven libremente (catéter yugular) en comparación con los animales que han sido manipulados (30 segundos) o una restricción, y (5 minutos) 14. Un método adicional por el que discernir aumentos en el estrés es mediante la medición de los niveles de corticosterona en plasma. Anteriormente se sugirió que incluso después de tres a cuatro días de tiempo de recuperación quirúrgica que los niveles de corticosterona en plasma fueron elevados en la rata crónica cánula 15. Sin embargo, las recientes mejoras en la metodología se ha determinado que no existen diferencias en los niveles plasmáticos basales de corticosterona en las ratas la vena yugular canulado en comparación con las ratas uncannulated 16. Además, la metodología de HPLC para el análisis de corticosterona también reveló que corticosteruno se elevan los niveles de estrés moderación, sin embargo, estable tras cateterismo yugular 16. Un uso adicional de la cateterización crónica es la medición de la presión arterial y frecuencia cardíaca de los roedores. Existen múltiples metodologías que se utilizan para medir la presión arterial y frecuencia cardíaca en ratas, los cuales incluyen las metodologías de la cola no invasiva del manguito, los procedimientos de radiotelemetría y directa catéteres. Cada método tiene sus ventajas y desventajas, que se describen en detalle en otras publicaciones. Que mora en nosotros llenos de líquido puede ser implantado catéteres en las arterias múltiples dentro de la rata. La arteria femoral es más que una arteria que puede ser utilizado para esta medida. Para las medidas de la sangre de presión / del corazón, el extremo distal del catéter se conecta a un transductor de presión calibrada. El catéter puede ser ubicado en un muelle de protección que está conectado a un pivote para permitir la libre circulación de los animales, o conectado a un botón quirúrgicoscamente implantado en el animal. Catéteres tienen la ventaja de reducir el estrés a largo plazo sobre el animal 17,18. Además de los materiales son baratos, la calibración es fácil para las medidas de presión y continuas medidas a largo plazo se pueden obtener en condiciones de estrés relativamente bajo de numerosas semanas 19. Seríamos negligentes si no mencionamos que hay desventajas de esta técnica, incluso, que es una técnica quirúrgica invasiva, el mantenimiento de la sonda es necesaria para mantener la permeabilidad, daño a la arteria debido a la implantación del catéter y la potencial de infección para nombrar unos pocos. Para las medidas de crónica de las grabaciones de la presión arterial de forma crónica directa implantados catéteres arteriales son técnicamente más difíciles, pero son más precisos y se puede hacer de manera continua sin molestar a los animales. Manguito de la cola mediciones son menos precisas, sin embargo, no requieren cirugía y también se puede repetired. Manguito de la cola metodologías requieren manipulación, así como la calefacción de los animales para dilatar los vasos de cola para facilitar la detección del pulso de 20. Manejo y el estrés por calor añadido pueden afectar las mediciones de la presión arterial, por lo tanto no proporciona medidas verdaderamente precisa. Por otra parte, los no directos cola-manguito método no permite fácil muestreo de sangre simultánea o administración de fármacos. Un método adicional por el cual puede ser medida directa se logra utilizando la metodología de telemetría. La telemetría permite grabaciones de alta calidad de la presión arterial (y otras medidas) de forma continua durante largos períodos de tiempo en la conciencia los animales se mueven libremente, sin restricción o anestésicos 18. Sin embargo, los dispositivos de telemetría mientras ideales son muy costosos. Cuando se compara con la telemetría, los beneficios del cateterismo incluyen: disminución de &quot;setup&quot; y los costes operativos, la capacidad de administrar fácilmente las drogas y el fácil tomar muestras de sangre en los animales se mueven libremente consciente. El administration de drogas y sustancias, y la obtención de muestras de sangre de los animales de investigación se puede hacer mientras mínimamente perturbar el animal, lo que reduce el estrés para el animal y que permite una medición más precisa.

<html><table border="1"><tbody><tr><td> Nombre </td><td> Tipo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Catéter arterial </td><td> Consumible </td><td> EFS de infusión </td><td> RFA-01 </td></tr><tr><td> Catéter venoso </td><td> Consumible </td><td> Commodities Scientific, Inc. </td><td> BB518-20 y BB31785-V 2 / </td></tr><tr><td> 27 g de 1 / 2 &quot;aguja de punta roma </td><td> Equipo </td><td> Soluciones Integradas de dispensación, Inc. </td><td> 9991113 </td></tr><tr><td> 23g 1 / 2 &quot;aguja de punta roma </td><td> Equipo </td><td> Soluciones Integradas de dispensación, Inc. </td><td> 9991109 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508/" target="_blank">PowerLab/8SP</a> </td><td> Equipo </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td>w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; ML765 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">Cuádruple puente</a> </td><td> Equipo </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">ML118</a> </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/software/research/LabChart-Software/" target="_blank">LabChart 7.2</a> </td><td> Software </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td></td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">BP transductor con llave de paso y cable</a> </td><td> Equipo </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a></td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">MLT844</a> </td></tr><tr><td> Giratorio de un solo canal </td><td> Equipo </td><td> Instech </td><td> 375/22PS </td></tr><tr><td> Un solo eje-Counter Balance de montaje giratorio </td><td> Equipo </td><td> Instech </td><td> CM375BP </td></tr><tr><td> Covance arnés de infusión </td><td> Equipo </td><td> Instech </td><td> CIH105 </td></tr><tr><td> Table Top Unidad de anestesia con isoflurano </td><td> Equipo </td><td> Protech International, Inc. </td><td> 61020 </td></tr><tr><td> Roedores mascarilla de anestesia </td><td> Equipo </td><td> Protech International, Inc. </td><td> RAM-02 </td></tr><tr><td> Roedores Cámara de inducción </td><td> Equipo </td><td> Protech International, Inc. </td><td> RIC-01 </td></tr><tr><td> Anestesia granada de gas filtro </td><td> Equipo </td><td> Protech Internacionalal, Inc. </td><td> 80120 </td></tr><tr><td> Laminar Flow mesa Hood </td><td> Equipo </td><td> Sentry Air Systems, Inc. </td><td> SS-200-WSL </td></tr><tr><td> Oster A5 de Oro </td><td> Equipo </td><td> Oster Profesional Productos </td><td> 78005-140 </td></tr><tr><td> La luz de fibra óptica con la Guía de cuello de cisne doble </td><td> Equipo </td><td> LW Scientific, Inc. </td><td> ILL-1502-DGG1 </td></tr><tr><td> Deltaphase isotérmico Pad </td><td> Equipo </td><td> Braintree Científico </td><td> 39DP </td></tr><tr><td> Bastoncillos de algodón </td><td> Consumible </td><td> Solón Manufacturing Company </td><td> 36200 </td></tr><tr><td> Esponjas de gasa 2 &quot;x2&quot; </td><td> Consumible </td><td> Kendall Curity </td><td> 2146 </td></tr><tr><td> 5-0 Nylon Sutura </td><td> Consumible </td><td> Ethicon </td><td> 661G </td></tr><tr><td> Sutura de seda 4-0 </td><td> Consumible </td><td> DekNatel </td><td> 8-S, 136075-0208 </td></tr><tr><td> Adhesivo tisular </td><td> Consumible </td><td> 3M </td><td> 1469SB </td></tr><tr><td> Astilla y fijación Pinzas </td><td> Equipo </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-55 </td></tr><tr><td> Pinzas estudiante de tejido </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 91121-12 </td></tr><tr><td> Micro Pinza / Pinza Bracken </td><td> Equipo </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 10-1942 </td></tr><tr><td> Pinza Graefe extra fino </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 11152-10 </td></tr><tr><td> Olsen-Hegar Porta-agujas </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 12002-12 </td></tr><tr><td> Estudiantes Halsted-Mosquito Pinzas hemostáticas </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 91308-12 </td></tr><tr><td> Rochester Pean Fuerzap </td><td> Equipo </td><td> Investigación Biomédica Instruments, Inc. </td><td> 31-1640 </td></tr><tr><td> Estudiante Tijeras quirúrgicas </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 91402-12 </td></tr><tr><td> Dumont Pinzas </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 11251-35 </td></tr><tr><td> Micro tijeras de disección </td><td> Equipo </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-210 </td></tr><tr><td> Tijeras estrabismo </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 14075-11 </td></tr><tr><td> Hartman Pinzas hemostáticas </td><td> Equipo </td><td> Bellas Ciencia Tools, Inc. </td><td> 13003-10 </td></tr><tr><td> Tijeras de tejido </td><td> Equipo </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-150 </td></tr><tr><td> Retractor </td><td> Equipo </td><td> Por encargo </td><td></td></tr></tbody></table>

el cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la administración de drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

En múltiples campos de estudio, el acceso al sistema circulatorio en los estudios de laboratorio es necesario. Los estudios farmacológicos en ratas utilizando catéteres implantados en forma permanente permite que un investigador eficaz y humana administrar sustancias, lleve a cabo el muestreo repetido la sangre y ayuda en la conciencia de mediciones directas de la presión arterial y frecuencia cardíaca. Una vez que el catéter se implanta a largo plazo muestra que es posible. La vida y la permeabilidad del catéter depende de múltiples factores, incluyendo la solución de bloqueo que se utiliza, el régimen de limpieza y material del catéter. Este video mostrará la metodología de la arteria femoral y cateterización venosa de la rata. Además, el vídeo se muestra el uso de la vena femoral y catéteres arteriales para muestras de sangre, la administración del fármaco y el uso del catéter arterial en la toma de mediciones de la presión arterial y frecuencia cardíaca en ratas libremente una conciencia de movimiento. Una correa y arnés conectado a un sistema giratorio permite que el animal se houtilizado y se han tomado muestras por parte del investigador con una interrupción mínima para el animal. Para mantener la permeabilidad del catéter, un cuidadoso mantenimiento diario de la sonda es necesario utilizar una solución de bloqueo (100 U / ml de solución salina heparinizada), tierra de la máquina-agujas punta roma jeringa y el uso de filtros de jeringa para minimizar la contaminación potencial. Con cuidado las técnicas de asepsia quirúrgica, los materiales apropiados del catéter y cuidado de las técnicas de mantenimiento del catéter, es posible mantener los catéteres de patentes y los animales sanos por largos períodos de tiempo (varias semanas).

Cateterización crónica de los vasos sanguíneos de la rata es a menudo necesaria para la administración de sustancias, obtener muestras de sangre durante un período de tiempo o por mediciones directas consciente de la presión arterial. Cateterización arterial femoral de la rata y las mediciones correspondientes de la presión arterial en el animal consciente se ha demostrado.

El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco

En múltiples campos de estudio, es necesario el acceso al sistema circulatorio en los estudios de laboratorio. Los estudios farmacológicos en ratas que utilizan de manera crónica...

El objetivo general de este procedimiento es ilustrar la metodología para la cateterización de la arteria y la vena femoral con usos crónicos y agudos. Esto se logra primero preparando un bolsillo en la pierna inferior para la colocación del catéter. El segundo paso consiste en aislar la arteria y la vena femoral y prepararlas para la colocación del catéter.El tercer paso consiste en insertar y asegurar los catéteres dentro de la vena y la arteria femoral. El último paso es el cierre quirúrgico, que incluye asegurar los catéteres para prevenir su movimiento durante el desplazamiento del animal o su crecimiento. Cierre las incisiones y coloque al animal en una chaqueta del tipo con sujetador, utilizando técnicas quirúrgicas asépticas cuidadosas, así como colocación y mantenimiento adecuados de los catéteres.Es posible mantener catéteres crónicos permeables para futuras extracciones de sangre, administración de fármacos o mediciones de presión arterial y frecuencia cardíaca. La demostración visual de este método es fundamental. Las ilustraciones y protocolos textuales actualmente disponibles carecen en gran medida de la representación visual detallada necesaria para implementar este método.El procedimiento será demostrado por la Dra. Carrie Northcott. Después de anestesiar, afeitar y desinfectar al animal experimental, coloque un campo estéril sobre las áreas quirúrgicas. A continuación, comience el procedimiento realizando una incisión horizontal de aproximadamente uno a uno y medio centímetros en la parte posterior del cuello de la rata, a la altura de los omóplatos, utilizando un par de tijeras de punta roma. Diseque un bolsillo subcutáneo de aproximadamente el tamaño de una moneda de veinticinco centavos en la espalda del animal.Cubra la incisión con un trozo estéril de gasa empapada en solución salina. Luego, después de colocar la rata boca arriba, realice una incisión de aproximadamente uno a un centímetro y medio a lo largo del ángulo de la pata trasera. Ahora, sosteniendo las tijeras de punta roma en un ángulo de 45 grados, diséque dentro de la incisión para separar el tejido conectivo hasta exponer la arteria y la vena femorales.Después de realizar, mediante disección romo, otro pequeño bolsillo del tamaño de un cuarto debajo de la piel, esta vez a lo largo de la cara interna de la pierna, coloque los retractores en el área de la incisión para poder visualizar completamente la arteria y la vena. Luego, utilizando pinzas de punta fina, separe suavemente el nervio que se encuentra junto a la arteria femoral, alejándolo de la arteria y la vena, teniendo cuidado de no dañar el nervio. A continuación, separe la arteria y la vena como una unidad, exponiendo una sección de aproximadamente medio a un centímetro de longitud de ambos vasos.Ahora, sosteniendo la pinza perpendicularmente a los vasos, sepárelos en paralelo para evitar dañarlos. Para comenzar, primero empape una gasa de dos por dos en solución salina estéril. Luego, después de colocar la gasa sobre las incisiones, gire la rata hacia el estómago, asegurándose de que la parte superior de los hemostatos apunte hacia arriba, es decir, lejos de la columna vertebral.Inserte una pinza de Rochester larga y recta. Introduzca cuatro pasos dentro de la incisión en la parte posterior del animal y guíela subcutáneamente a lo largo de la espalda hasta el nivel de las caderas, aproximadamente en la región de la cadera. Gire la pinza hacia la incisión y saque la punta de la pinza a través de la incisión preparada en la pata.Luego, sujetar suavemente con la pinza los extremos de los catéteres opuestos a los extremos que se insertarán. Tirar cuidadosamente de los catéteres a través de la espalda y hacia afuera por el cuello. Incisión. Llenar jeringas con aguja rompada con solución salina heparinizada a 20 unidades por mililitro y luego colocarlas en los extremos de los catéteres, teniendo cuidado de asegurarse de que no haya burbujas de aire; llenar los catéteres y verificar que estén permeables.Finalmente, dejando las jeringas conectadas al extremo de los conductos, gire la rata sobre su espalda. Una vez más, coloque primero un trozo doblado de seda estéril 4-0 debajo de la vena femoral y luego corte la seda por el extremo doblado, de modo que queden dos trozos de seda debajo de la vena.Luego, separe las dos piezas de seda tirando de una pieza distalmente hacia la pata del animal y de la otra proximalmente hacia el cuerpo. Con la sutura en el lado proximal, más cercano al cuerpo, ate una ligadura suelta. No la apriete completamente.Ahora sujete la seda en el nudo con pinzas hemostáticas pequeñas, tirando con firmeza sin apretar el nudo. Tire de la otra parte de la seda todo lo posible hacia la pata para disponer de una buena longitud de vaso con la que trabajar. Utilice pinzas.Anude esta sutura con un nudo triple. Ocluyendo el vaso. Coloque una o dos gotas de lidocaína sobre la vena utilizando la pinza microdisectora van.Realice una pequeña incisión en un ángulo de 45 grados y aproximadamente a un tercio o un cuarto de la profundidad de la vena. Luego, use una pinza para agarrar cuidadosamente el catéter venoso. A continuación, introduzca la punta fina de una pinza de 45 grados dentro de la incisión.Abrir suavemente las pinzas de 45 grados dentro de la vena y luego colocar cuidadosamente el catéter venoso debajo de las pinzas e insertar el catéter en la vena. Una vez que el catéter esté dentro del vaso, asegurarse de sujetarlo siempre con un par de pinzas hasta que esté fijo en el animal, ya que de lo contrario es probable que el catéter se salga al llegar al ligadura. Aflojar el nudo ajustando las pinzas hemostáticas para que el hilo de seda ya no esté tenso y el catéter pueda insertarse completamente.Cuando el catéter esté completamente insertado, apriete la ligadura proximal alrededor de la vena en el catéter haciendo un nudo triple con la seda cerca de la pata. Para una ligadura distal, ate la seda alrededor del catéter. Luego, retire lentamente la jeringa hasta que se vea una pequeña cantidad de sangre dentro del catéter, para asegurarse de que el nudo no esté demasiado apretado.Después de verificar que el catéter es funcional, presione el émbolo hasta que la sangre ya no sea visible. Finalice haciendo un nudo triple en la seda para asegurar que el catéter no se salga de la vena. A continuación, cateterice la arteria femoral de manera similar.Coloque brevemente cuatro hilos de seda debajo de la arteria. Luego, separe las dos piezas de seda tirando de una pieza en dirección distal hacia la pata del animal y tirando de la otra en dirección proximal hacia el cuerpo. A diferencia de lo que se hace con la vena, cuando se cateteriza primero la arteria, tire del hilo distal hacia la pata y ate esta sutura.Con un nudo triple que obstruye el vaso debido al flujo sanguíneo que va desde el corazón hacia la pierna. Esto hará que el vaso se dilate. Ahora, con el extremo proximal del hilo de seda restante, realice una ligadura suelta, sujete la seda en el nudo con pequeños hemostatos tirando de ella con tensión, sin apretar el nudo.A continuación, coloque una o dos gotas de lidocaína sobre la arteria. Haga una pequeña incisión en un ángulo de 45 grados, aproximadamente entre un tercio y un cuarto del grosor de la arteria, usando una pinza para mantener abierta la luz, e introduzca el catéter en la arteria. Luego, utilizando la ligadura proximal, ate un nudo triple alrededor de la arteria y el catéter.A continuación, verifique el flujo sanguíneo en el catéter y ate la ligadura distal como antes. Después de comprobar que el catéter funciona, presione el émbolo hasta que la sangre ya no sea visible y termine de atar un nudo triple en la seda. Para asegurarse de que el catéter no se salga, haga un lazo del tamaño de una moneda de diez centavos a una de veinticinco centavos en los catéteres y colóquelos en la parte interna de la pierna.Después de colocar ambos catéteres, fíjelos con uno o dos puntos de sutura quirúrgica 5-0 en la capa muscular. Cierre la incisión con suturas continuas utilizando hilo 4-0, y luego, tras colocar a la rata en posición prona, haga otro lazo en los catéteres del tamaño aproximado de una moneda de veinticinco centavos y colóquelo en el bolsillo diseccionado en la espalda del animal. Cierre la incisión con suturas.Luego, utilizando una gota de vet bond, asegure los catéteres en la espalda. Sujete los catéteres cerca de la incisión en la espalda con pinzas hemostáticas acolchadas y retire las jeringas de los extremos. Finalmente, coloque al ratón una camisa con tira de sujeción, pasando los catéteres a través del resorte de la camisa.Coloque las jeringas nuevamente en los catéteres. Retire los hemostatos y apriete la chaqueta. Luego, vuelva a colocar los hemostatos y corte los catéteres.Ahora tape los catéteres para mantener el bloqueo con heparina y retire los hemostatos. Comience por pinzar el catéter con pinzas acolchadas. Luego retire el catéter.Conecte una aguja de punta roma y coloque una jeringa de punta roma con solución de bloqueo en el catéter, despinche las pinzas y luego llene el catéter con 0,3 mililitros de solución de bloqueo rec. Pinche el catéter y retire la jeringa. A continuación, reemplace el tapón del catéter y despinche las pinzas.Finalmente, empuje suavemente el tapón ligeramente hacia adentro para asegurarse de que no haya sangre en la punta del catéter. Tras la recuperación quirúrgica, se pueden obtener mediciones de la presión arterial del animal despierto y en movimiento libre. El equipo utilizado para estas mediciones incluye el power lab, eight sp, el quad bridge y el transductor de presión arterial, tal como se indica con las líneas punteadas.En este experimento, se administró un agonista de los receptores alfa-1 adrenérgicos, fenil, rina y adrenérgico, en la línea venosa femoral. Simultáneamente, se midió la presión arterial del animal a partir de la línea arterial femoral, y como se puede observar en la figura, la presión del pulso representada en el gráfico superior y la presión arterial media representada en el gráfico inferior aumentaron inmediatamente en respuesta al fármaco. Sin embargo, la frecuencia cardíaca disminuyó temporalmente y luego aumentó gradualmente hasta alcanzar los niveles previos a la administración del fármaco tras la inyección de fenilefrina.Luego, tras recuperarse de los efectos del agonista alfa adrenérgico, la administración del antagonista alfa adrenérgico no selectivo, fentolamina, indicado con la segunda línea punteada, provocó una disminución de la presión arterial del animal. Una vez más, cuando se domina esta técnica, puede realizarse en 20 a 30 minutos.

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Medicina

Los accesos vasculares para medir la hemodinámica, proporcionar líquidos y realizar muestras de sangre son importantes para cualquier estudio de modelo animal pequeño. Presentamos una técnica de implante de catéteres en la arteria carótida y en la vena yugular común en una rata anestesiada para su conexión a un sistema de monitorización, infusiones y toma de muestras.

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El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco (Video) | JoVE Journal

El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco

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