Name: Junio de 2012: Este mes en Jove (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Descubre métodos innovadores para la preparación de injertos corneales desarrollados por grupos de investigación de Italia y Michigan. Estas técnicas mejoran los resultados de la queratoplastia y aumentan la disponibilidad de tejidos para trasplantes oculares.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3709">Hibridación in situ de glándulas salivales, ovarios y embriones de mosquitos vectores</a></h2>
Jennifer Juhn1, Anthony A. James2, 1 1Departamento de Biología Molecular y Bioquímica, Universidad de California, Irvine , 2Departamento de Microbiología y Genética Molecular, Universidad de California, Irvine 
Los análisis de expresión génica temporal y espacial tienen un papel crucial en la genómica funcional. La hibridación in situ de montaje completo es útil para determinar la localización de transcripciones dentro de los tejidos y compartimentos subcelulares. En este trabajo se describe un protocolo de hibridación in situ con modificaciones para tejidos diana específicos en mosquitos.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3763">Estudiando el punto de control mitótico ilustrando el comportamiento dinámico de la proteína cinetocoro y el movimiento cromosómico en embriones sincitiales vivos de Drosophila</a></h2>
Maureen Sinclair1, Jun-Yong Huang2, 1 1 Institutode Biociencias Celulares y Moleculares, Universidad de Newcastle, Reino Unido, 2Instituto de Biociencias Celulares y Moleculares, Universidad de Newcastle
El cinetocoro es donde el SAC inicia su señal de monitoreo de la segregación mitótica de las cromátidas hermanas. Se describe un método para visualizar el reclutamiento y el recambio de una de las proteínas cinetocoro y su coordinación con el movimiento cromosómico en embriones de Drosophila utilizando un sistema confocal de barrido láser Leica.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3765">Una técnica simplificada para la escisión in situ de la córnea y la evisceración del tejido de la retina del globo ocular humano</a></h2>
<color de fuente='black'>Mohit Parekh1, <color de fuente='negro'>Stefano Ferrari1, <color de fuente='negro'>Enzo Di Iorio1, <color de fuente='negro'>Vanessa Barbaro1, <color de fuente='negro'>Davide Camposampiero1, <color de fuente='negro'>Marianthi Karali2, <color de fuente='negro'>Diego Ponzin1, Gianni Salvalaio3, 1 1Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto O.N.L.U.S. , 2Telethon Institute for Genetics & Medicine (T.I.G.E.M.), 3Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto, O.N.L.U.S.
El artículo describe una técnica simplificada para extirpar córnea y eviscerar tejidos de la retina del globo ocular de donantes cadavéricos humanos. La técnica descrita aquí ayudará a extirpar tejidos de buena calidad para ser utilizados con fines de trasplante, quirúrgicos o de investigación sin dañar otros tejidos del globo ocular.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3813">Diferenciación eficiente de células madre embrionarias de ratón en neuronas motoras</a></h2>
Chia-Yen Wu1, Dosh Whye2, 1, Robert W. Mason1, Wenlan Wang1 1Nemours Biomedical Research, Alfred I. duPont Hospital para Niños, 2Departamento de Pediatría, Centro Médico de la Universidad de Columbia
Desarrollamos un nuevo protocolo para mejorar la eficiencia de la diferenciación in vitro de células madre embrionarias de ratón en neuronas motoras. Las células madre embrionarias diferenciadas adquirieron características de neuronas motoras como lo demuestra la expresión de marcadores neuronales y de neuronas motoras mediante técnicas inmunohistoquímicas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3847">Preparación de tejido de donante corneal para queratoplastia endotelial</a></h2>
<color de fuente='negro'>Maria A. Woodward1, <color de fuente='negro'>Michael Titus2, <color de fuente='negro'>Kyle Mavin2, <color de fuente='negro'>Roni M. Shtein1 1Departamento de Oftalmología, Universidad de Michigan, 2Bancos de ojos del Medio Oeste
El trasplante endotelial de córnea es una técnica quirúrgica para el tratamiento de las enfermedades de la córnea posterior. La disección mecánica de microqueratomos para preparar el tejido da como resultado injertos más delgados y simétricos con menos pérdida de células endoteliales y mejores resultados. Las disecciones se pueden realizar en el banco de ojos antes de la cirugía de trasplante de córnea.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3958">Microfluídica endotelial para el estudio de las interacciones microvasculares en enfermedades hematológicas</a></h2>
<color de fuente='negro'>David R. Myers1, 2, 3, 4,*, <color de fuente='negro'>Yumiko Sakurai1, 2, 3, 4,*, <color de fuente='negro'>Reginald Tran1, 2, 3, 4, <color de fuente='negro'>Byungwook Ahn1, 2, 3, 4, <color de fuente='negro'>Elaissa Trybus Hardy1, 2, 3, 4, <color de fuente='negro'>Robert Mannino1, 2, 3, 4, <color de fuente ='negro'>Ashley Kita1, 2, 3, 4, <color de fuente='negro'>Michelle Tsai1, 2, 3, 4, <color de fuente='negro'>Wilbur A. Lam1, 2, 3, 4 1Departamento de Pediatría, Facultad de Medicina de la Universidad de Emory, 2Wallace H. Coulter Departamento de Ingeniería Biomédica, Instituto de Tecnología de Georgia y Universidad de Emory, 3Centro de Cáncer Aflac y Servicio de Trastornos de la Sangre de Children's Healthcare de Atlanta , 4Instituto Oncológico Winship de la Universidad de Emory* Estos autores contribuyeron igualmente
Se describe un método para cultivar una monocapa de células endoteliales a lo largo de toda la superficie 3D interna de un dispositivo microfluídico con canales de tamaño microvascular (<30 μm). Este modelo de microvasculatura in vitro permite el estudio de las interacciones biofísicas entre las células sanguíneas, las células endoteliales y los factores solubles en las enfermedades hematológicas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3993">Grabación de señales electrocorticográficas humanas (ECoG) para investigación neurocientífica y mapeo cortical funcional en tiempo real</a></h2>
N. Jeremy Hill1, Disha Gupta2, 1, Peter Brunner2, 1, Aysegul Gunduz2, 1, Matthew A. Adamo3, Anthony Ritaccio2, Gerwin Schalk1, 2, 4, 5, 6, 7 1Centro Wadsworth, Departamento de Salud del Estado de Nueva York, 2Departamento de Neurología, Facultad de Medicina de Albany, 3Departamento de Neurocirugía, Facultad de Medicina de Albany, 4Departamento de Neurocirugía, Universidad de Washington, 5Departamento de Biomedicina. Ing., Instituto Politécnico Rensselaer, 6Departamento de Biomedicina. Ciencias, UNIVERSIDAD ESTATAL DE NUEVA YORK EN ALBANY, 7Departamento de Elec. e Ing. Comp., Universidad de Texas en El Paso 
Presentamos un método para recolectar señales electrocorticográficas con fines de investigación de humanos que se someten a un seguimiento invasivo de la epilepsia. Mostramos cómo utilizar la plataforma de software BCI2000 para la recopilación de datos, el procesamiento de señales y la presentación de estímulos. En concreto, demostramos SIGFRIED, una herramienta basada en BCI2000 para el mapeo funcional del cerebro en tiempo real.

junio ​​de 2012: este mes en jove

June 2012: This Month in JoVE

En 1905, en lo que hoy es la República Checa, Eduard Zirm realizó la primera cirugía de trasplante de córnea (queratoplastia), que restauró la visión de un paciente cegado por una lesión corneal. Hoy en día, los bancos de ojos de todo el mundo preparan, almacenan y distribuyen córneas donadas a hospitales para que se puedan realizar miles de queratoplastias que salvan la vista cada año. En junio de 2012, JoVE presta atención a dos grupos de investigación, uno de Italia y otro de Michigan, que demuestran dos métodos distintos para la preparación del injerto corneal antes del trasplante.
Nuestros autores de Italia nos muestran su técnica para extirpar la córnea del globo ocular, que consiste primero en sumergirla en una serie de soluciones esterilizantes para prepararla para un manejo estéril, crear una incisión en la superficie escleral y, finalmente, separar el borde corneoescleral del globo. Una vez que se ha extraído la córnea, se verifica la densidad y viabilidad de las células endoteliales y se prepara para almacenamiento a largo plazo, durante el cual el medio se analiza periódicamente de forma de alto rendimiento junto con otros injertos depositados en el banco de ojos.
En las cirugías de trasplante corneal, se utilizan injertos de espesor completo en un procedimiento denominado queratoplastia penetrante; sin embargo, JoVE descubre que en algunas córneas enfermas, solo se ve afectada la capa endotelial. Nuestros autores de la Universidad de Michigan y del Midwest Eye Bank demuestran un procesamiento adicional de las córneas donadas mediante la queratoplastia endotelial automatizada con disección de la membrana de Descemet (DSAEK), un procedimiento que consiste en injertar únicamente la capa endotelial corneal. Este procedimiento relativamente reciente es posible gracias al uso de un microqueratomo, un dispositivo que puede cortar con precisión a través de la córnea para separar la capa endotelial y trasplantarla. La uniformidad y calidad del tejido donado se verifica mediante microscopía de hendidura y microscopía especular, y el injerto se almacena para su uso en cirugía de trasplante corneal.
Juntos, dos grupos de autores, procedentes de diferentes continentes, han documentado los pasos para extraer la córnea completa del ojo y aislar la capa posterior para la queratoplastia endotelial, un proceso que disminuye el riesgo de infección o rechazo del injerto y mejora la capacidad visual del paciente.
En JoVE Neurociencia, un equipo multidisciplinario de clínicos y científicos presenta nuevas aplicaciones de investigación de la electrocorticografía (ECoG). La ECoG es un procedimiento invasivo que utiliza electrodos en forma de tira y de rejilla colocados directamente sobre el cerebro para localizar los focos convulsivos en pacientes con epilepsia. Este procedimiento también puede emplearse para mapear regiones corticales que deben conservarse durante una cirugía resectiva. El mapeo cortical se logra monitoreando si la estimulación de un electrodo determinado provoca la interrupción del movimiento o del habla. Por lo general, los pacientes se someten a un monitoreo intracraneal para localizar los focos convulsivos durante aproximadamente una semana, y este período proporciona una ventana única de oportunidad para que los investigadores estudien el cerebro humano en acción mediante la ECoG, que presenta mejores propiedades de relación señal-ruido y menor susceptibilidad a artefactos de registro que la electroencefalografía (EEG) no invasiva.
Después de determinar la actividad basal en reposo, nuestros autores registran la actividad cerebral en el rango de frecuencia gamma alta, durante tareas cognitivas simples o tareas motoras. Luego, estos investigadores demuestran cómo utilizar el sistema de software SIGFRIED para realizar una cartografía funcional rápida y en tiempo real basada en señales de ECoG, que se analizan posteriormente para proporcionar información sobre las regiones cerebrales asociadas con tareas específicas.
En Bioingeniería, JoVE presenta un equipo de científicos que demuestra que la microvasculatura puede recrearse aproximadamente en un chip. Este «chip» es en realidad un dispositivo con canales microfluídicos recubiertos con células endoteliales. Se utiliza la fotolitografía SU-8 para grabar el patrón de los canales en una oblea de silicio, que actúa como molde para el PDMS. Una vez fabricado el dispositivo, se siembran células endoteliales que se cultivan dentro de los canales. Gracias a la transparencia del PDMS, las células pueden observarse mediante microscopía. Este modelo in vitro de la microvasculatura proporciona un microentorno controlado que puede utilizarse para estudiar procesos hemodinámicos normales, así como enfermedades hematológicas. Este breve resumen es solo una muestra de algunos contenidos de JoVE para el mes de junio. Una investigación más detallada podría conducir a métodos de hibridación in situ en tejido adulto y embrión de mosquito, visualización de la mitosis en drosófila y diferenciación de células madre embrionarias en neuronas motoras. Permanezcan atentos.

Junio ​​de 2012: Este mes en Jove

En 1905, en lo que hoy es la República Checa, Eduard Zirm realizó la primera cirugía de trasplante de córnea (queratoplastia), la cual devolvió la visión a un paciente cegado por una lesión corneal. Hoy en día, los bancos de ojos de todo el mundo preparan, almacenan y distribuyen córneas donadas a los hospitales para que cada año se puedan realizar miles de queratoplastias que salvan la vista. En junio de 2012, JoVE se centra en dos grupos de investigación, uno de Italia y otro de Michigan, que demuestran dos métodos distintos para la preparación del injerto corneal antes del trasplante. Nuestros autores de Italia nos muestran su técnica para la escisión de la córnea del globo ocular, que consiste primero en sumergirla en una serie de soluciones esterilizantes para prepararla para su manipulación estéril, realizar una incisión en la superficie escleral y, finalmente, separar el anillo corneal-escleral del globo. Una vez extraída la córnea, se comprueba la densidad y viabilidad de las células endoteliales y se prepara para su almacenamiento a largo plazo, periodo durante el cual el medio se analiza periódicamente de forma automatizada y de alto rendimiento junto con otros injertos depositados en el banco de ojos. En las cirugías de trasplante de córnea, se utilizan injertos de espesor total en un procedimiento llamado queratoplastia penetrante; sin embargo, JoVE ha constatado que, en algunas córneas enfermas, solo se ve afectada la capa endotelial. Nuestros autores de la University of Michigan & Midwest Eye Bank demuestran el procesamiento posterior de córneas donantes mediante la queratoplastia endotelial automatizada con desbridamiento de la membrana de Descemet (DSAEK), un procedimiento que consiste en injertar únicamente la capa endotelial corneal. Este procedimiento, relativamente reciente, es posible gracias al uso de un microquerátomo, un dispositivo que puede cortar la córnea con precisión para que la capa endotelial pueda separarse para el trasplante. La uniformidad y la calidad del tejido donante se verifican mediante lámpara de hendidura y microscopía especular, y el injerto se almacena para la cirugía de trasplante de córnea. Juntos, dos grupos de autores, de diferentes continentes, han documentado los pasos para extraer la córnea completa del ojo e aislar la capa posterior para la queratoplastia endotelial, un proceso que disminuye el riesgo de infección o rechazo del injerto y mejora la capacidad visual del paciente. En JoVE Neuroscience, un equipo multidisciplinar de clínicos y científicos presenta nuevas aplicaciones de investigación de la electrocorticografía (ECoG). La ECoG es un procedimiento invasivo que utiliza electrodos en tira y rejilla colocados directamente sobre el cerebro para localizar los focos epilépticos en pacientes con epilepsia. Este procedimiento también puede utilizarse para mapear las regiones corticales que deben preservarse durante la cirugía resectiva. El mapeo cortical se logra monitorizando si la estimulación de un electrodo determinado provoca la interrupción del movimiento o del habla. Los pacientes suelen someterse a una monitorización intracraneal para localizar los focos epilépticos durante aproximadamente una semana, y esta duración proporciona una oportunidad única para que los investigadores estudien el cerebro humano en acción mediante ECoG, que posee mejores propiedades de relación señal-ruido y es menos susceptible a los artefactos de registro que la electroencefalografía (EEG) no invasiva. Tras determinar la actividad basal en reposo, nuestros autores registran la actividad cerebral en el rango de frecuencia gamma alta durante tareas cognitivas o motoras sencillas. A continuación, estos investigadores demuestran cómo utilizar el sistema de software SIGFRIED para realizar un mapeo funcional rápido y en tiempo real basado en señales de ECoG, que se analizan posteriormente para proporcionar información sobre las regiones cerebrales asociadas con tareas concretas. En Bioengineering, JoVE presenta a un equipo de científicos que demuestran que la microvasculatura puede recrearse aproximadamente en un chip. Este «chip» es, en realidad, un dispositivo con canales microfluídicos recubiertos de células endoteliales. Se utiliza la fotolitografía SU-8 para grabar el patrón del canal en una oblea de silicio, que actúa como molde para el PDMS.

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Descubre métodos innovadores para la preparación de injertos corneales desarrollados por grupos de investigación de Italia y Michigan. Estas técnicas mejoran los resultados de la queratoplastia y aumentan la disponibilidad de tejidos para trasplantes oculares.

Junio ​​de 2012: Este mes en Jove (Video) | JoVE Journal

Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

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