Name: La evaluación no invasiva de la función endotelial microvascular y (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-01-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 41 s
Description: Aprenda a evaluar la función endotelial microvascular mediante capilaroscopia y pletismografía no invasiva. Esta técnica permite visualizar la microcirculación y medir el flujo sanguíneo del antebrazo de forma económica y eficiente.

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Este trabajo fue apoyado por los números de concesión de subvenciones y R01HL096593 K23HL72825 del Instituto Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre. El contenido es responsabilidad exclusiva de la Universidad Thomas Jefferson y no representa necesariamente la opinión oficial del Instituto Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre o los Institutos Nacionales de Salud.

Presentación de casos (requerido, en su caso): NA, lo que es todavía un procedimiento de investigación experimental, aún no se utilizan clínicamente. Diagnóstico, evaluación y plan (requerido, en su caso): NA, lo que es todavía un procedimiento de investigación experimental, aún no se utilizan clínicamente. Procedimiento (obligatorio): Esta parte debe incluir una descripción paso a paso de los procedimientos pertinentes, cumpliendo con las siguientes pautas. 1. Microscopía capilar (Figura 1) <ol><li> Nuestra técnica es una adaptación de capilaroscopia Serne y sus colegas 1. Un criterio de exclusión para este procedimiento es la enfermedad del colágeno vascular, enfermedad vascular del colágeno ya que produce cambios conocidos capilares 2. </li><li> Después de un mínimo de 10-hr noche de ayuno y 20 min de descanso sentada, las mediciones se llevan a cabo microvasculares durante una media hora entre-7y 11 horas, en una habitación tranquila temperatura, controlada (mantenido entre 21.5-22.5 ° C), con el sujeto en posición sentada y la mano izquierda a la altura del corazón. </li><li> Periungueal capilares en la piel dorsal del tercer dedo se visualizaron utilizando un microscopio estereoscópico (Olympus, Center Valley, PA), vinculado a un Insight megapíxeles 4 SPOT monocromo cámara digital (número de modelo en-1400: instrumentos de diagnóstico, Sterling Heights, MI), y un ordenador portátil (Dell Latitude D600: Dell, Austin, TX). Para limitar el movimiento, la mano y el antebrazo izquierdos están más o menos cubierta con una manta doblada, y reposó en otra manta doblada colocada en la base del microscopio. </li><li> Iluminación lecho ungueal se consigue con una lámpara halógena de 250 W de fibra óptica (KL 2500LCD: Schott-Fostec; Elmsford, NY); iluminación adicional de una fibra suplementaria 150W óptico fuente de luz halógena (B &amp; B Microscopios, Ltd., Warrendale, PA) se utiliza en individuos con pigmentación oscura. </li><li> Para visualizar los capilares, la3.2x objetivo (Olympus 3.2/0.07) se usa con un aumento del sistema total de 38.4x. </li><li> El uso de software de imágenes SPOT proporciona con la cámara, luz / oscuridad de contraste en las fotografías capilares se ve reforzada con la misma función estándar de software SPOT (estiramiento de los niveles de claros y oscuros) para maximizar la visibilidad de los capilares en todas las materias. </li><li> Para cuantificar la densidad capilar, fotomicrografías digitales se toman cada sec 3-5 durante cada una de tres etapas, al inicio del estudio en reposo, durante la hiperemia reactiva postocclusive, y durante la oclusión venosa. (A) Al inicio del descanso, fotomicrografías se toman durante un período de tres minutos para detectar los capilares perfundidos en reposo. (B) durante la hiperemia reactiva postocclusive, se toman fotomicrografías de cuantificar funcionalmente capilares perfundidos (línea de base más capilares reserva), de la siguiente manera. En primer lugar, un manguito de oclusión en la parte superior del brazo izquierdo es inflado a 40 mm Hg por encima de la presión sistólica de 10 min. Las microfotografías son llevados durante ªminutos e inmediatamente después de la liberación primero de la oclusión arterial, visualizando todo funcionalmente perfundidos capilares. Baja densidad capilar tras la hiperemia reactiva indica deterioro reclutamiento capilar funcional, y por lo tanto rarefacción funcional. (C) Durante venosos fotomicrografías de oclusión se toman para cuantificar la densidad máxima capilar, que incluye tanto el perfundido (con celda activa glóbulos rojos (RBC) de movimiento) y nonperfused (lleno de estancamiento, que no se mueven los glóbulos rojos) capilares 3 como sigue. Tras diez minutos de descanso después del procedimiento postocclusive hiperemia reactiva, el brazalete se infla a 60 mm Hg durante 60 segundos, pasivamente forzando la sangre a todos los presentes patente capilares y fotomicrografías fueron tomadas durante este tiempo. Dado que la densidad capilar máxima incluye todo estructuralmente capilares presentes, una reducción en la densidad capilar máxima indica rarefacción estructural. </li><li> La densidad capilar se define como el número de capilares por cuadrado milmilimétricas de la piel del lecho ungueal, y se calcula como la media de cuatro medidas obtenidas de las cuatro imágenes más claramente centradas, al menos distorsionada por el movimiento. En nuestros estudios, los valores típicos para el recuento capilar (capilares / mm 2) han sido 55-80 de línea de base, 65-90 de post-isquémica, y 90-105 de la oclusión venosa. Los valores para el reclutamiento ciento capilar son típicamente entre 5% y 25% (media del ~ 10-15%) y por ciento capilares perfundidos entre 70% y 95% (media del ~ 80-90%), con valores fueron inferiores entre los hipertensos que normotensos. La reproducibilidad del procedimiento de recuento se ha verificado con tres observadores independientes que realizaron las evaluaciones manuales de fotografías de 10 temas diferentes (Figura 2). Los observadores fueron cegados a la identidad y la presión arterial de estos temas. Después del entrenamiento, los recuentos posteriores realizadas de forma independiente demostró un alto nivel de acuerdo. Promedio discrepancias entre calificadores y calificadores intra-eran de la order de 2-3 vasos capilares / mm 2, y los coeficientes de correlación intraclase fueron superiores a 0,90. A corto plazo, la variación de las medidas capilaroscopia eran del mismo orden de magnitud que las discrepancias entre calificadores y calificadores intra-(aproximadamente 2 capilares / mm 2), pero a más largo plazo, la variación observada durante 2-3 años fue un orden de magnitud mayor (aproximadamente 15 capilares / mm 2), lo que indica que los cambios longitudinales se pueden distinguir fácilmente de la variación de calificadores. Fiabilidad de las dos medidas de la función capilar también fue alta (coeficiente de correlación intraclase = 0,84 para el reclutamiento capilar por ciento y 0,82 por ciento para perfusión capilares). </li><li> Los investigadores ahora utilizan un método basado en computadora para cuantificar la densidad capilar utilizando Image-Pro Plus de imágenes de software (versión 6,2, Media Cybernetics, Inc., Bethesda, MD: Figura 3). Correlaciones de Pearson entre la situación basal, post-isquémica y enfermedad venonos cuenta la congestión hecho con el software y los correspondientes recuentos manuales en 10 sujetos fueron 0,78, 0,78, y 0,71, respectivamente (todos p &lt;0,05), lo que indica un acuerdo razonable entre los dos métodos. La fiabilidad de los recuentos basados ​​en computadoras es ligeramente menor que el de recuentos manuales pero todavía alta (coeficiente de correlación intraclase = 0,91 para la línea de base, 0,86 por post-isquémica, y 0,84 para la oclusión venosa). Tenemos datos no publicados que demuestran también la asociación de cuentas automatizadas con múltiples factores de riesgo cardiovascular como la hipertensión, que estamos preparando para su publicación. </li><li> La Tabla 1 resume las mediciones de la densidad capilar y cálculos. Reclutamiento ciento capilar se evaluó dividiendo el aumento de la densidad capilar inducida por la hiperemia reactiva postocclusive (postocclusive reactiva densidad hiperemia capilar menos densidad basal capilar), por la densidad capilar máxima (observada durante pasivo venonos oclusión). Porcentaje de capilares perfundidos representa la proporción de todos los presentes capilares que son perfundidos (funcionalmente activo), y se calcula dividiendo la densidad capilar postocclusive reactiva hiperemia por la densidad capilar máxima. Tanto el reclutamiento ciento por ciento capilar y los capilares perfundidos reflejan el número de capilares funcionales. Los valores más bajos para estas medidas indican rarefacción capilar funcional. </li></ol> 2. Evaluación de la función endotelial <ol><li> La función endotelial se evaluó antes y después de la hiperemia reactiva postocclusive, utilizando mediciones no invasivas de pletismografía de flujo sanguíneo del antebrazo, de acuerdo con el método de Sivertsson, 4 que utiliza el estímulo dependiente del endotelio de la hiperemia reactiva para inducir la vasodilatación. </li><li> Con el sujeto en posición sentada después de 10 min de reposo en posición supina, una galga de caucho de mercurio en la cepa estirada a 10% más allá de su longitud de reposo es enrollado around del sujeto antebrazo 5 cm por debajo de la fosa antecubital. </li><li> La cepa de calibre está conectado a un pletismógrafo (CE-4: DE Hokanson, Inc; Bellevue, WA), que a su vez está conectado a un registrador de Doppler (CW-1; DE Hokanson, Inc; Belleveue, WA). </li><li> Un manguito de brazo superior oclusión se aplica, y el brazo está suspendido cómodamente al nivel del corazón usando un vendaje eslinga conectada a un polo intravenosa ajustable. Sistólica y diastólica y frecuencia cardíaca se obtienen con un Dinamap ProCare manguito 100 automático BP (GE Healthcare, Piscataway, NJ) colocado en el brazo opuesto. </li><li> Un manguito pediátrico alrededor de la muñeca se infla a 200 mm Hg para ocluir el flujo a la mano. El manguito de brazo superior es inflada a 50 mm Hg, se desinfla para 1,5 s, y luego vuelto a inflar rápidamente antes de cada medición del flujo sanguíneo del antebrazo, que se obtiene a través de la expansión de la galga de tensión coloca alrededor del antebrazo. </li><li> Flujo sanguíneo del antebrazo (FBF) se mide en la línea base descansaba (FBF base) y de nuevo unt postocclusive hiperemia inducida por la vasodilatación máxima (FBF max). Para las mediciones de referencia de flujo de sangre, cuatro curvas consecutivas FBF se obtienen dentro de 30 seg (FBF base). </li><li> La oclusión arterial se infla entonces a 40 mm Hg por encima de la presión sistólica de 10 min. Después de la liberación de la oclusión arterial (hiperemia reactiva postocclusive), cuatro curvas FBF consecutivos se obtienen dentro de los 30 primeros segundos de flujo (FBF max). </li><li> La relación FBF max / FBF base se calcula como una estimación de la vasodilatación, dividiendo la media de los cuatro valores de FBF max por la media de los cuatro valores de base FBF. 5 resistencia vascular del antebrazo a la vasodilatación máxima (FVR max) se calcula como la la presión arterial media (MAP) dividido por FBF max. FBF max durante la hiperemia reactiva está directamente relacionada con FBF máxima después de la infusión intraarterial de acetilcolina, un vasodilatador dependiente del endotelio. 6 </sup&gt; En consecuencia, max FBF y la relación de la base FBF max / FBF se aceptan medidas no invasivas de la función endotelial. 6.8 Además, tanto FBF max y FVR reflejar los cambios estructurales (resistencia de la arteria aumentado pared / luz ratio) 9. </li></ol>

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Los autores no tienen conflictos de intereses financieros relacionados con la realización o publicación de esta obra a revelar.

Capilaroscopia (microscopia capilar) es una medida no estándar de la estructura capilar. Sin embargo, en la actualidad, no existen métodos estándar para la evaluación directa de structure.Furthermore capilar, microscopía capilar ha sido ampliamente utilizado para la evaluación directa de capillarydensity en un cuerpo grande y creciente de trabajo publicado 12, 13, 10, 11, 14-18 . Adicionalmente, se han validado la técnica de microscopía capilar mediante la correlación de los resultados capilaroscopia con fluj...

la evaluación no invasiva de la función endotelial microvascular y

Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

Los autores han utilizado capilaroscopia antebrazo y técnicas de flujo de sangre para investigar el papel de la disfunción microvascular en la patogénesis de la enfermedad cardiovascular. Capilaroscopia es un no-invasivo, metodología relativamente barato para la visualización directa de la microcirculación. Reclutamiento ciento capilar se evaluó dividiendo el aumento de la densidad capilar inducida por postocclusive hiperemia reactiva (postocclusive reactiva densidad hiperemia capilar menos densidad basal capilar), por la máxima densidad capilar (observada durante la oclusión venosa pasiva). Porcentaje de capilares perfundidos representa la proporción de todos los presentes capilares que son perfundidos (funcionalmente activo), y se calcula dividiendo la densidad capilar postocclusive reactiva hiperemia por la densidad capilar máxima. Tanto el reclutamiento ciento por ciento capilar y los capilares perfundidos reflejan el número de capilares funcionales. El flujo sanguíneo del antebrazo (FBF) Técnica de provides aceptado medidas no invasivas de la función endotelial: La relación FBF max / FBF base se calcula como una estimación de la vasodilatación, dividiendo la media de los cuatro valores de FBF max por la media de los cuatro valores de base FBF. Resistencia vascular del antebrazo a la vasodilatación máxima (FVR max) se calcula como la presión arterial media (MAP) dividido por FBF max. Tanto el capilaroscopia y técnicas de antebrazo son fácilmente aceptable para los pacientes y se puede aprender rápidamente. La función endotelial microvascular y las medidas obtenidas con los métodos descritos en este documento pueden ser útiles en el futuro clínicos de pacientes cardiovasculares estrategias de reducción de riesgos. Como hemos publicado informes que demuestran que la disfunción endotelial microvascular y se encuentran en las etapas iniciales de la hipertensión como prehipertensión, medidas de la función endotelial y microvasculares pueden llegar a ayudar en la identificación temprana, Estratificación del riesgo vascular y la prevención de patologías en fase terminal, con sus consecuencias potencialmente fatales.

Las diferencias en la aparición de la microvasculatura entre personas normotensas e hipertensas son fácilmente evidentes mediante la comparación de las figuras 4 y 5. Figura 4 muestra la red típico de recta capilares en filas bien organizadas en un individuo normotensos. En contraste, la Figura 5 muestra un patrón más desordenado de encogido capilares, en espiral. Los autores tienen un interés continuo en el papel de la disfunción microvascu...

Capilaroscopia es un no-invasivo, metodología relativamente barato para la visualización directa de la microcirculación. La sangre del antebrazo técnica de flujo proporciona aceptados medidas no invasivas de la función endotelial.

La evaluación no invasiva de la función endotelial microvascular y

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

El objetivo general de estos procedimientos es visualizar de forma no invasiva la microcirculación mediante capilar y evaluar la función endotelial con pletismografía mediante capilar. Esto se logra induciendo primero una hiperemia reactiva postoclusiva en el brazo del sujeto. Se toman las siguientes imágenes para identificar todos los capilares funcionalmente perfundidos.Luego, mediante pletismografía, se coloca una galga extensométrica alrededor del antebrazo del sujeto y se registran las mediciones de pletismografía del flujo sanguíneo del antebrazo. En última instancia, se pueden obtener resultados no invasivos que muestran la densidad capilar a través de la visualización directa de la función capilar y endotelial a través de la pletismografía de galgas extensométricas con hiperemia post-reacción. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como el video cap y la pletismografía invasiva, es que es menos costosa y no invasiva.Ayudarme a demostrar el procedimiento será náuseas. Los capilares del pliegue ungueal en la piel dorsal del tercer dedo se visualizan utilizando un microscopio estereoscópico que utiliza una lámpara halógena de fibra óptica de 250 vat

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Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

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Un procedimiento no invasivo para evaluar la función endotelial se demuestra con el 2000 Endo-PAT.

Valoración de la función endotelial vasodilatador con el 2000 Endo-PAT

El grado de disfunción vascular y contribuir mecanismos fisiológicos se puede evaluar en los pacientes con enfermedad renal crónica mediante la medición de la dilatación de la arteria braquial mediada por flujo, velocidad de onda de pulso aórtica y vascular endotelial la expresión de proteínas de la célula.

Evaluación de la función vascular en pacientes con enfermedad renal crónica

La disfunción endotelial se asocia con numerosos estados de enfermedad y es predictivo de eventos cardiovasculares adversos en los seres humanos. Vasodilatación mediada por flujo (DMF) es un método de ultrasonido no invasivo de evaluación de la función endotelial. Opciones metodológicas y la experiencia del operador pueden afectar los resultados. Un enfoque sistemático para la fiebre aftosa en los estudios en humanos se discute aquí.

Evaluación ecográfica de dependiente del endotelio vasodilatación mediada por flujo de la arteria braquial en Investigación Clínica

El presente artículo describe las consideraciones metodológicas para varias evaluaciones no invasivas de la función vascular y la morfología que se utilizan comúnmente en la investigación médica para evaluar diferentes etapas de la aterosclerosis.

Un enfoque metodológico para las evaluaciones no invasivas de la función vascular y Morfología

La prueba de dilatación mediada por flujo (FMD) es la evaluación ecográfica no invasiva más utilizada de la función endotelial en humanos. Aunque la prueba de DFM se ha relacionado con la predicción de futuras enfermedades y eventos cardiovasculares, es una evaluación fisiológica con muchos factores de confusión inherentes que deben tenerse en cuenta.

La evaluación ecográfica de la función endotelial: Una guía técnica de la prueba de dilatación mediada por flujo

Sistemas de videomicroscopía se utilizan para examinar propiedades funcionales de las arteriolas aisladas de tejido adiposo en respuesta a estímulos fisiológicos y farmacológicos. Esta técnica se puede utilizar para examinar fenotipos microvasculares en dominios diferentes de tejido adiposo en humanos obesos.

Evaluación de la función Microvascular del tejido adiposo humano mediante videomicroscopía

La microdiálisis intradérmica es una técnica mínimamente invasiva que se utiliza para investigar la función microvascular en la salud y la enfermedad. Tanto los protocolos dosis-respuesta como los de calentamiento local se pueden utilizar para esta técnica para explorar los mecanismos de vasodilatación y vasoconstricción en la circulación cutánea.

Microdiálisis intradérmica: un enfoque para investigar nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos

Describimos un protocolo para medir de forma no invasiva y continua el índice de flujo sanguíneo microvascular absoluto y la saturación de oxígeno en sangre utilizando un dispositivo multimodal basado en óptica difusa de infrarrojo cercano. A continuación, evaluamos la tasa metabólica del consumo de oxígeno y la hiperemia reactiva mediante una prueba de oclusión vascular.

Monitorización no invasiva de la oxigenación microvascular y la hiperemia reactiva mediante espectroscopia óptica difusa híbrida de infrarrojo cercano para cuidados intensivos

En este trabajo describimos un enfoque no invasivo que utiliza espectroscopia de infrarrojo cercano para evaluar la hiperemia reactiva en el miembro inferior. Este protocolo proporciona una evaluación estandarizada de la capacidad de respuesta vascular y microvascular que puede utilizarse para determinar la presencia de disfunción vascular, así como la eficacia de las intervenciones terapéuticas.

Espectroscopia de infrarrojo cercano durante la hiperemia reactiva para la evaluación de la función vascular de las extremidades inferiores 

Se combinaron dominio de la frecuencia del infrarrojo cercano las medidas de espectroscopia de oxigenación cerebral difusa con hemoglobina medidas de espectroscopia de correlación del índice de flujo sanguíneo cerebral para estimar un índice de metabolismo del oxígeno. Pusimos a prueba la utilidad de esta medida como una herramienta de detección de cabecera para evaluar la salud y el desarrollo del cerebro del recién nacido.

No invasiva de medición óptica del metabolismo cerebral en lactantes y Hemodinámica

Aprenda a evaluar la función endotelial microvascular mediante capilaroscopia y pletismografía no invasiva. Esta técnica permite visualizar la microcirculación y medir el flujo sanguíneo del antebrazo de forma económica y eficiente.

La evaluación no invasiva de la función endotelial microvascular y

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