La colonoscopia flexible en ratones para evaluar la gravedad de la colitis y colorrectal tumores utilizando un sistema validado de puntuación endoscópica

Hola.Soy Tomohiro Kani, un visitante de la Universidad de Nintendo en Tokio, y soy Fabio Elli, director del Centro de Investigación de Salud Digestiva, un caso de la Facultad de Medicina de la Universidad de Western Reserve. En este vídeo, describiremos nuestra metodología para realizar la colonoscopia en ratones. Resalte la importancia de familiarizarse con la anatomía endoscópica normal.

Describir cómo solucionar eficazmente los problemas durante la endoscopia para minimizar el traumatismo y los artefactos de imagen. Y por último, describir nuestro sistema de puntuación para la evaluación de la inflamación intestinal en un modelo de colitis y cáncer asociado a la colitis. Gracias por su atención.

Primero, configure el sistema de endoscopia para conectar el endoscopio al centro del sistema de video y a la fuente de luz. Esterilice el endoscopio y coloque una jeringa para la insuflación de aire. Luego encienda el sistema y ajuste el balance de blancos con el animal.

Debidamente anestesiado y sujeto se inicia el examen endoscópico. Se pueden obtener muestras de biopsia según sea necesario. Después de la exploración, caliente el mouse con una luz para recuperarlo al final.

Se explica el sistema de puntuación para la evaluación de la inflamación colónica y el cáncer de colon asociado al colon. Configuración del sistema de endoscopia. El sistema de endoscopia incluye el centro del sistema de video, una fuente de luz de xenón y una grabadora de video.

Utilizamos un ureteroscopio humano para la colonoscopia en ratones. Nuestro visor URFV es un videoscopio flexible que utiliza un sensor CCD. El diámetro exterior del tubo de inserción es de 3,3 milímetros y el extremo distal es de 2,8 milímetros de diámetro.

Para comenzar, conecte el visor al centro del sistema de video y a la fuente de luz. A continuación, esterilice el visor y la superficie de la lente con etanol al 70%. A continuación, conecte una jeringa de tres milímetros al canal de trabajo.

Se utiliza para regular la cantidad de aire intraluminal con insuflación o aspiración. Encienda el interruptor principal y configure el balance de blancos. Además, no olvide configurar en modo NBI Dos, anestesiando el mouse.

Primero, demostraré la anestesia inhalatoria Usando isde flúor, usamos del cuatro al 5% de isde flúor para la inducción. Después de que el ratón deje de moverse, reduzca la concentración a la dosis de mantenimiento de uno a 2%Sujete el ratón sobre la mesa pegando la cola y las extremidades inferiores. El vendaje de la cola es especialmente importante para mantener el ratón inmóvil durante el alcance.

También, Inyección intraperitoneal de tri bromo. El etanol se puede utilizar para la anestesia. Tres. Endoscopia Las lesiones perianales no forman parte de la evaluación endoscópica, pero son un hallazgo importante y deben observarse antes de la inserción y no deben confundirse con el sangrado traumático.

Antes de la inserción, cubra el visor con lubricante quirúrgico, asegúrese de no recubrir el sensor CCD. Inserte el endoscopio a través del ano. Esta inserción inicial debe ser lo más suave posible, ya que la inserción a ciegas puede dañar la mucosa colónica del colon.

Enciende la luz y comienza a grabar. Empuje la jeringa de aire lenta y cuidadosamente para obtener un campo de visión. Demasiada insuflación de aire puede matar la boca.

Se debe juzgar la presencia de sangrado espontáneo cuando el endoscopio se inserta en el ángulo del recto o del colon. El manejo ajusta la vista verticalmente y el control de par es para el ajuste horizontal. La coordinación entre estos dos controles es muy importante.

Observa la transparencia. En el colon normal, la pared es transparente con vascularización normal y sin ningún grosor. La transparencia se define como una visibilidad transmural de los vasos u órganos extramurales.

El movimiento repetitivo de inserción y extracción ayuda a la evaluación en colon normal. Tanto los vasos pequeños como los grandes son visibles durante el examen. Puede tomar fotografías o muestras de biopsia según sea necesario.

Compruebe la presencia de sangrado de contacto. Al retirar el endoscopio, no es necesario raspar la mucosa intencionadamente. El modo de imagen de banda estrecha enfatiza las estructuras finas de los vasos en las membranas mucosas.

El recto está rodeado de músculos, mientras que el colon no está fijado por los tejidos circundantes. Debido a esta diferencia anatómica, las vísceras extramurales no son visibles en el recto. Los gránulos fecales a veces están presentes cerca del ano.

Se pueden eliminar con insuflación de aire, sin embargo, a veces pueden persistir y obstruir la visión endoscópica. En estos casos, usaremos hasta una milésima de pulgada de enema PBS para lavar las heces. Las heces generalmente se excretan después de un par de minutos.

La visión borrosa causada por la presencia de manchas en la lente también es un problema común, especialmente en el caso de colitis o sangrado. En esta situación, intentamos limpiar la lente con insuflación de aire. Este procedimiento puede ser exitoso para despejar la lente sin retirar el visor.

El movimiento peristáltico es una de las actividades fisiológicas normales del intestino. Debido a que la insuflación de aire no logra dilatar la luz durante el peristaltismo, debe esperar hasta que pase la onda peristáltica. Número cuatro, biopsia Las muestras de biopsia se obtienen utilizando pinzas de copa de biopsia flexibles.

Las copas se abren y cierran mediante el mango. Inserte las pinzas en el canal de trabajo. Tenga cuidado de no perforar el intestino.

Abra las tazas a un tamaño adecuado y coloque la punta en el área de interés. Cierre suavemente las copas y tire con firmeza. Retire la muestra enjuagándola con una solución adecuada.

Número cinco, recuperación. Después del examen, caliente el ratón hasta que se recupere. Usamos una luz eléctrica para calentar seis puntos para la inflamación del colon.

Nuestro sistema de puntuación consta de cuatro parámetros, una lesión perianal, dos, transparencia de la pared colónica, tres hemorragias intestinales y cuatro lesiones focales. Cada parámetro se puede puntuar de cero a tres. La puntuación total máxima es 12.

Además, hemos incluido una escala de unidades decimales que se puede utilizar para resaltar hallazgos endoscópicos específicos. La descripción detallada de cada parámetro está disponible en el manuscrito adjunto. He aquí un resumen número uno, la lesión perianal.

Este hallazgo debe observarse antes de introducir el endoscopio en el recto. Esto evita la confusión con el sangrado traumático. Una puntuación de cero es normal.

La puntuación dos es para la secreción sanguinolenta. La puntuación tres es para tejido de granulación o prolapso rectal. Dos. Transparencia: Representa la capacidad de visualizar los vasos sanguíneos en la pared del colon y las vísceras circundantes.

Una puntuación de cero indica que los vasos sanguíneos son claramente visibles. Anota uno. Los vasos pequeños son parcialmente invisibles, pero los vasos grandes son visibles.

Puntuación dos. Los vasos pequeños son invisibles generalmente e incluso los vasos grandes no son transparentes. La puntuación tres es la misma que en la puntuación dos y la apariencia engrosada del colon. Tres.

Sangrado, el sangrado espontáneo debe diferenciarse del sangrado de contacto. Júzgalo en consecuencia. La puntuación uno indica que el sangrado de contacto es inducido por el procedimiento de alcance estándar suave, puntuación tres.

Aviso de sangrado espontáneo al entrar en el colon. Número cuatro, lesión focal. Estos hallazgos reflejan las condiciones locales que a menudo acompañan a la inflamación.

Anota uno. La placa es una elevación plana cubierta por mucosa aparentemente normal. Puntuación dos.

Las erosiones rojas de la zona final puntúan tres. Erosiones ulceradas cubiertas por material similar a la fibrina. NBI es útil para reconocer esto.

Descriptores decimales. Añadimos tres parámetros adicionales y les dimos puntuaciones decimales.0.1. Para la estenosis, puntuación de 0,2 para desgarro o perforación intestinal, puntuación de 0,5 para la lesión tumoral, presentación del caso uno.

Ratón con infección por Clostridium difficile. Tiene una transparencia normal pero una erosión temprana. Se observa una pequeña erosión, pero la mucosa de fondo es normal.

Tras una observación minuciosa, se revela un ligero edema que rodea esta lesión. Además. En otras partes, no hay hallazgos que indiquen la presencia de inflamación. Caso dos.

Ratón con colitis inducida por DSS en una dieta alta en grasas. En este caso se observa falta de transparencia, sangrado espontáneo y estenosis. Al principio, se observa sangrado.

Es espontáneo. Aquí hay una constricción. No se dilata por insuflación de aire y el endoscopio no puede pasar.

La mucosa de fondo está enrojecida y engrosada. Además, los golpes de contacto ocurren aquí y allá. Indica la fragilidad del caso de colon. Tres.

Se observa un ratón con colitis crónica DSS, falta de transparencia, grosor de la pared y protuberancias tumorales. Generalmente, se ve el grosor de la pared con cuello blanco y la pared no es transparente. Se trata de una ulceración alrededor de los flexores esplénicos que son notables.

Caso cuatro. Ratón con cáncer asociado a colitis inducida con azoximetano y DSS. Tiene múltiples tumores y ulceración.

En la pared derecha se encuentra una gran lesión protrusiva de tipo plano y en una zona un poco más proximal se observa otra lesión de tipo plano inferior. La estructura de la superficie es aparentemente diferente a la de la mucosa normal. El NBI es útil para la detección y el diagnóstico de este tipo de lesiones.

Hay una ulceración geográfica grande cubierta por material fibroso en el recto. Gracias por mirar.