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DOI: 10.3791/51200-v
Alireza Behjousiar1,2, Antony Constantinou2, Karen M. Polizzi2, Cleo Kontoravdi1
1Centre for Process Systems Engineering, Department of Chemical Engineering and Chemical Technology,Imperial College London, 2Centre for Synthetic Biology and Innovation, Division of Molecular Biosciences,Imperial College London
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Se presenta una descripción de cómo calibrar Transferencia Förster Resonance Energy sensores biológicos integrados (FIBS) en el perfil metabólico situ. Los FIBS se pueden utilizar para medir los niveles intracelulares de metabolitos de forma no invasiva ayudando en el desarrollo de modelos metabólicos y cribado de alto rendimiento de las condiciones de bioprocesos.
El objetivo general de este procedimiento es monitorizar el nivel de glucosa o glutamina intracelular de forma no invasiva utilizando biosensores basados en proteínas codificadas genéticamente. Esto se logra seccionando primero las células de interés con el gen biosensor que contiene el plásmido y seleccionando aquellas células que expresan el biosensor. En el segundo paso, se toman muestras de cultivos celulares de cultivos por lotes o alimentados con lotes y se miden sus proporciones de trastes.
La concentración intracelular de glucosa o glutamina de las muestras puede determinarse mediante un ensayo independiente. En última instancia, la relación de trastes de las muestras se puede utilizar para calcular la concentración intracelular de glucosa o glutamina de forma no invasiva y en tiempo real. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la mejora de los bioprocesos, ya que se trata de un método fiable para obtener información metabólica en tiempo real que puede utilizarse para la optimización y el control en línea.
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