El Conejo Modelo Blood-shunt para el Estudio de la aguda y secuelas tardías de Hemorragia subaracnoidea: Aspectos Técnicos

El objetivo general de este procedimiento es establecer un modelo de presión intracraneal independiente del examinador, derivación sanguínea controlada por ICP, hemorragia subaracnoidea aguda o HSA en el conejo. Esto se logra mediante la cánula inicial de la arteria subclavia. En el segundo paso, se realiza una angiografía por sustracción digital y, a continuación, se colocan sondas de neuromonitorización y una aguja de acceso espinal en el paso final.

La aguja de acceso espinal y la arteria subclavia se conectan a una derivación para inducir la HSA aguda controlada por el examinador, en última instancia, se puede monitorizar el flujo sanguíneo cerebral de la PIC, o CBF, y la respuesta cardiorrespiratoria del animal a la HSA aguda. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo neurovascular, como cómo las lesiones cerebrales tempranas y el retraso en la toma de muestras de vasos cerebrales contribuyen al desenlace sin partos y la mortalidad. Después de una hemorragia súbica aneurismática: Comience colocando al conejo sedado en posición supina con las patas delanteras y traseras fijadas a la superficie de operación.

Instale un electrocardiograma de tres canales como tal. Coloque tres electrodos subcutáneos en forma triangular en el lado ventral del conejo. A continuación, desinfecte la piel con povidona yodada o similar sobre el músculo pictórico derecho alrededor del tercio medio de la clavícula, cubra al animal con sábanas estériles.

Después de infiltrar el músculo pectoral con anestésicos locales, haga una incisión lateral en la piel paramorosa y exponga el músculo pectoral. Dividir la fibra muscular superior e inferiormente mediante disección roma hasta visualizar la arteria subclavia. Luego, bajo el microscopio, diseccione la arteria subclavia usando dos micropinzas rectas y luego líguela distalmente, y coloque una ligadura alrededor del extremo proximal expuesto usando cuatro suturas de polifilamento O y una micropinza curva.

A continuación, utilice una microtijera curva para incidir en la pared de la arteria subclavia y canular la arteria retrógrada. A continuación, asegure el catéter mediante una ligadura de doble nudo hacia la ligadura proximal y, además, asegure el catéter mediante una ligadura de doble nudo hacia la ligadura distal para evitar la torsión o flexión arterial de las partes proximales de la arteria, y para evitar el deslizamiento o el sangrado masivo. A continuación, recoja muestras de sangre para conocer el estado del análisis de gases arteriales y controle continuamente los parámetros cardiovasculares y respiratorios estándar.

Colocar un dispositivo de dimensionamiento externo sobre los ángulos de la mandíbula para calibrar el angiografía y permitir una comparación exacta de las mediciones post hoc de la línea de base y el diámetro del vaso de seguimiento. A continuación, realice la inyección retrógrada en bolo intraarterial de LIO IOP no iónica a través de la arteria canulada e inmediatamente enjuague la cánula con solución salina para evitar la oclusión de la escalera. Después de la angiografía por sustracción digital basal, vuelva a colocar al conejo en posición prona, teniendo cuidado de no manipular ni reubicar el catéter intraarterial.

Conecte el monitoreo de la presión arterial y comience a monitorear continuamente los parámetros cardiovasculares y respiratorios estándar, incluido el electrocardiograma, la presión arterial, la saturación periférica de oxígeno, el dióxido de carbono espiratorio y la temperatura central. Transfiera los datos a través de la interfaz de salida analógica a un registrador de datos y almacenamiento de convertidor digital analógico. Coloque la cabeza en un soporte en un ángulo de 30 grados orientado hacia abajo y luego desinfecte la piel sobre la cabeza y el cuello con povidona yodada tres veces durante un minuto cada una.

Después de cubrir la nueva área quirúrgica con sábanas estériles, haga una incisión en la línea media de la piel. Inserte un pequeño retractor quirúrgico para realizar tres osteotomías redondas de acuerdo con los puntos de referencia externos del cráneo y calibre las sondas de neuromonitorización. Coloque la presión intercraneal y las puntas de neuromonitorización del flujo sanguíneo doppler láser interparenquimatoso y selle los orificios de las fresas con cera ósea para mantener el líquido craneal apretado y permitir una condición de cráneo cerrada para mantener el estado estable de I-C-P-C-P-P y MAP.

A continuación, inserte una aguja de acceso espinal pediátrico transcutánea de calibre 22 y 40 milímetros en la cisterna magna. A continuación, deslice la aguja hacia abajo a lo largo de la protuberancia occipital externa ósea hasta que se detecte un espacio. Confirme la posición correcta de la aguja observando el goteo espontáneo del líquido cefalorraquídeo con la cabeza del conejo inclinada hacia abajo en un ángulo de 20 a 30 grados durante unos minutos.

Ahora, use un tubo de monitoreo de presión arterial lleno de sangre para conectar la aguja de acceso espinal en la cisterna magna a la llave de parada de tres vías conectada a la arteria subclavia previamente cateterizada. A continuación, abra la conexión de derivación entre la arteria subclavia y el esternón magna CI para inducir una hemorragia subaracnoidea. Después de abrir la derivación, la presión intracraneal comienza a aumentar a valores cercanos a la presión arterial diastólica.

En ese momento, el flujo en la derivación se detiene si la meseta intercraneal se mantiene durante más de 10 segundos, o si la presión disminuye espontáneamente, cierre la derivación después de que la presión intercraneal alcance su punto máximo, mantenga la aguja de acceso espinal en su lugar hasta que la presión vuelva a un estado estacionario cerca de los valores basales. Por último, retire el flujo sanguíneo cerebral, la aguja fina y las sondas de presión intracraneal. Tape los orificios de la fresa con cera para huesos, luego use sulfato de neomicina para realizar una irrigación rigurosa de la herida y suturar la piel.

Primero, sutura la piel sobre los orificios de la fresa. Luego, después de reposicionar al conejo en posición supina y retirar el catéter de la arteria subclavia, suturar el músculo pectoral y la piel. El modelo de derivación de sangre rabiosa de HSA descrito en este informe produce una lesión cerebral temprana en el hipocampo, la corteza basal y la vasculatura cerebral tan pronto como 24 horas después de la lesión, induciendo una distribución sanguínea característica.

Además, este modelo desencadena grados moderados a severos de vasoespasmo cerebral tardío al tercer día. Después de la inducción de la HSA, la tasa de mortalidad del procedimiento es de aproximadamente el 20% debido a un paro respiratorio o bradicardia grave en el momento de la HSA aguda durante la cual los animales están bajo anestesia completa. Desde un punto de vista técnico, este modelo de derivación sanguínea permite la inducción de la HSA tanto independiente como controlable por el examinador.

Al intentar este procedimiento, es importante recordar asegurar firmemente esta arteria subclavón, llevar un buen coche y reposicionar al animal, y ser muy amable y paciente durante la acupuntura del esternón.