Name: los En Ovo Chick corioalantoidea de membrana (CAM) Ensayo como un modelo de xenoinjerto eficiente de carcinoma hepatocelular (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Aprende a desarrollar un modelo de xenoinjerto de carcinoma hepatocelular usando el ensayo de membrana corioalantoidea de pollo. Este método permite cultivar tumores vascularizados tridimensionales con tasas de supervivencia embrionaria del 93%.

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A.S. fue parcialmente financiado por subvenciones de los Institutos Nacionales de Salud (NIH), el Instituto Nacional de Investigación Dental y Craneofacial (5R03DE021741-02) y el Instituto Nacional del Cáncer (1K08CA154963-01A1). 
El Instituto Médico Howard Hughes proporcionó fondos para M.L. a través del Programa de Becarios de Investigación Médica del HHMI.

La incubación 1. Huevo <ol><li> Obtener 8 días de edad huevos embrionados libres de patógenos específicos. </li><li> Coloque los huevos en rotación bandeja de huevos, extremos estampadas hacia arriba y coloque la bandeja giratoria dentro de una incubadora de huevos. Incubar los huevos durante 48 horas a 36 ° C y 50% de humedad. </li></ol> 2. Dejar caer la CAM y la apertura de los huevos <ol><li> Recoger los huevos de la incubadora. Coloque los huevos en la canasta de huevos, estampadas hacia arriba, y llevar ante la campana de flujo laminar. </li><li> Apague las luces de la sala y la capilla. </li><li> Mantenga el extremo sellado del huevo ligeramente a la candler huevo para exponer la vasculatura de la CAM, así como el saco de aire. NOTA: El candler huevo es una fuente de luz que se utiliza para visualizar el desarrollo del embrión y el saco de aire asociado y la vasculatura. </li><li> Coloque una marca de lápiz a entre dos grandes vasos sanguíneos. </li><li> Encienda las luces y usar un alfiler estéril para hacer un agujero en la punta del huevo por encima de la salida de aire (extremo sellado) y un agujero en el PEmarca NCIL. No empuje el pasador de empuje hasta el final; un agujero de unos 3 mm de profundidad suele ser suficiente. </li><li> Apagar las luces. Apriete la bombilla de seguridad, presionando firmemente el extremo abierto contra el agujero por encima de la bolsa de aire. Aplicar succión para extraer el aire en el agujero en la marca de lápiz, haciendo que la CAM caiga fuera de la concha en la marca de lápiz. </li><li> Compruebe que la bolsa de aire se ha movido desde el extremo sellado del huevo al agujero lápiz marcada con el Candler. Si no es así, utilice el alfiler para hacer dos agujeros un poco más profundo y luego volver a aplicar el vacío utilizando la bombilla seguridad. </li><li> Enciende las luces. Sostener el huevo en una mano, active la herramienta rotativa Dremel con un disco de corte 15/16 pulgadas conectado y crea dos cortes transversales lo suficiente profundo para cortar a través de la cáscara, pero no lo suficientemente profundo para cortar todo el camino a la depresión CAM. Haga los cortes alrededor de 2 cm de longitud y 1 cm de distancia entre sí. Haga los cortes lo suficientemente amplia como para que un anillo de silicona de 1 cm de diámetro puede pasar a través depero más delgado que la anchura de cinta adhesiva estándar. </li><li> A continuación, hacer 1 corte longitudinal entre y en los extremos de los dos cortes transversales tocando ligeramente la rueda de corte a la cáscara. </li><li> Deslice pinzas estériles debajo de la pieza de shell y paralelo a la cáscara. Coge la pieza de concha con las pinzas y quitar toda la pieza limpiamente. </li><li> Coloque cinta adhesiva sobre la nueva ventana abierta, por lo que asegúrese de doblar un extremo sobre sí misma para facilitar su extracción. </li><li> Coloque los huevos de vuelta en la incubadora en la bandeja de huevos (NO en los bastidores de huevo rotativas) hasta el momento de la inoculación. </li></ol> 3. Inoculación <ol><li> Mantenga sótano mezcla de proteínas de membrana, como matrigel, en hielo (para evitar la polimerización) y el lugar en el capó. </li><li> Utilice EDTA 2 mM para desprender las células (4 - 5 ml por matraz T75) y matraces de cultivo de tejidos en lugar incubadora durante 5 min. </li><li> Resuspender las células desprendidas en los medios de comunicación y contar utilizando un hemocitómetro y azul de tripano. Usar entre 500.000 to 2.000.000 de células de injerto sobre la CAM, dependiendo de la línea celular. Optimizar el número apropiado en experimentos preliminares. </li><li> Medir el volumen requerido para el número de células apropiadas y centrifugar a 500 xg durante 5 min. </li><li> Desechar el sobrenadante y resuspender a continuación, sedimento celular en 40 μ l de PBS ++ y 20 μ l de mezcla de membrana basal. NOTA: En este punto, las células puede ser tratada con fármacos u otros agentes de prueba según sea necesario para los experimentos mediante la resuspensión en la célula / sótano suspensión mezcla de membrana. Alternativamente, los agentes se pueden pipeta en la célula / sótano suspensión mezcla de membrana después del injerto. </li><li> Recuperar estante huevo con huevos de la incubadora y lugar en la campana de flujo laminar. </li><li> Cinta Despegue de la ventana, recuperar un anillo de silicona 1 mm de la tapa de un vial criogénico utilizando pinzas esterilizadas, y colocar el anillo a través de la ventana. </li><li> Pipetear la solución l celular 60 μ de PBS ++ y membrana basal Mixture directamente en el centro del anillo de silicona que descansa sobre la CAM. </li><li> Re-cinta de la ventana y mover estante huevo de nuevo a la incubadora. En este punto, tenga cuidado al mover los huevos como el anillo y la suspensión celular fácilmente pueden quedar desplazados. </li><li> Permitir que los tumores crezcan durante 5 a 7 días. </li></ol> 4. Recolección de Tumores <ol><li> Coloque bajo-pad en la capucha. Preparar 35 x 10 mm platos y recipientes paraformaldehído según sea necesario para la histología. Ponga 1 ml de PBS ++ en cada placa de 35 mm x 10. </li><li> Coloque la bolsa de riesgo biológico en el capó. Tome las tijeras de disección estéril e introduzca el extremo puntiagudo en el huevo en el agujero cerca del extremo sellado. </li><li> Corte alrededor de todo el huevo longitudinalmente. NOTA: la CAM y el tumor con el anillo deben atenerse a la mitad superior de la carcasa con la ventana. </li><li> Con unas tijeras de disección y pinzas, diseccionar el tumor fuera de la CAM y el lugar del tumor en la placa de 35 mm x 10. Medir y pesar tumores. Tumores fijos en paraformaldehyellos incrustar en parafina de y para su uso en histología e inmunohistoquímica experimentos. </li></ol> 5. (Opcional): Disociación Celular Tumoral <ol><li> Con unas tijeras de disección para picar el tumor en la placa de 35 mm x 10. Vierta tumor picada en un tubo de centrífuga de 15 ml y eliminar la mayor cantidad de PBS ++ como sea posible a través de la pipeta. </li><li> Añadir 2 ml de colagenasa (1 mg / ml en PBS ++), gire tubo varias veces, y se incuba el tubo a 37 ° C durante al menos 30 min (hasta varias horas). </li><li> Añadir 5 ml de medio a cada tubo y resuspender a fondo por pipeteando arriba y abajo 20 - 40x. Pipeteado a fondo es crítico para la disociación celular completa. </li><li> Deje que el sedimento se asiente, y transferir el sobrenadante a un tubo nuevo. Centrifugar a 500 xg durante 5 min. Aspirar el sobrenadante, dejando tras de sedimento celular disociada. NOTA: En este punto, los sedimentos celulares se pueden utilizar para diversos experimentos (citometría de flujo, la lisis para su uso en la transferencia Western, aislamiento de ARN, etc). Recuento total de células tumorales también se puede obtener usando un hemocitómetro y tinción con azul de tripano. Tenga en cuenta que, células de forma ovalada más pequeñas son las células de pollo de la CAM y no deben ser considerados como células tumorales. Debe haber un número mínimo de contaminación de las células no tumorales (CAM) si el tumor se diseca lejos de la CAM con cuidado. </li></ol>

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<li>Hagedorn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF+coordinates+interaction+of+pericytes+and+endothelial+cells+during+vasculogenesis+and+experimental+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">VEGF coordinates interaction of pericytes and endothelial cells during vasculogenesis and experimental angiogenesis.</a> Dev Dyn. 230 (1), 23-33 (2004).</li>
</ol>

A.S. recibe fondos de la compañía farmacéutica Advaxis para apoyar un ensayo clínico iniciado por el investigador.

Varios pasos clave en este protocolo muy probablemente explican la mejora de la supervivencia embrionaria, así como una mayor fiabilidad de crecimiento del tumor. Dejar caer la CAM alejado de la cáscara aplicando succión a la bolsa de aire es menos invasivo que otros métodos existentes (utilizando una aguja para extraer la albúmina del huevo, disección roma, etc.). El uso de un alfiler estéril para crear los dos pequeños agujeros necesarios para este método es la parte más difícil del protocolo. El uso de una fuerza exc...

El carcinoma hepatocelular (CHC) es la 3ª causa de mortalidad por cáncer en el mundo 1. Actualmente sólo el 30% de los pacientes con HCC son elegibles para los tratamientos quirúrgicos potencialmente curativos 2, y la quimioterapia sistémica no es eficaz 3. Por lo tanto, hay una necesidad apremiante insatisfecha clínico para nuevas terapias HCC, y el desarrollo de sistemas de modelos adecuados para la prueba eficiente de nuevos agentes. La membrana corioalantoidea (CAM) de ensayo polluelo proporciona un método reproducible y rentable, y rápido rendimiento medio de probar posibles fármacos anti-tumorales in vivo. El ensayo de CAM se ha utilizado ampliamente para estudiar la angiogénesis 4. También se ha desarrollado con éxito en un modelo de xenoinjerto de tumor de cánceres, incluyendo glioblastoma 5, el cáncer de páncreas 6, melanoma 7-9, y osteosarcoma 10-11. Tanto in ovo 12 y ex ovo13 técnicas se han utilizado en la literatura, con detalles que varían de un protocolo a otro. Un gran desafío para el modelo de xenoinjerto CAM es la relativamente alta incidencia de muerte embrionaria después de la manipulación del huevo, con tasas de mortalidad de embriones de pollo publicados que van desde 25 hasta 50 por ciento de 11 a 14. En este artículo se describe el desarrollo de un modelo de xenoinjerto in ovo de CHC que produce de forma fiable el crecimiento de tumores vascularizados tridimensionales que histológicamente se asemejan a HCC indiferenciado. Hemos adaptado un protocolo descrito por primera Ossowski et. Al 14 y han logrado de embriones de pollo tasas de supervivencia de hasta el 93% con extremadamente alta injerto tumor.

<table><tbody><tr><td>Huevos incubados de primera calidad</td><td>Charles River</td><td>N/A</td><td>http://www.criver.com/files/pdfs/avian/av_c_spf_egg_price_list.aspx</td></tr><tr><td>Incubadoras de huevos</td><td>GQF</td><td>Hova-Bator 2362N</td><td></td></tr><tr><td>Bandejas de huevos giratorias</td><td>GQF</td><td>1611 Volteador</td><td></td>de huevos automático</tr><tr><td>Vela de huevos</td><td>Lyon</td><td>Hi-Power 950-070</td><td></td></tr><tr><td>Herramienta rotativa Dremel 100 con disco de corte 15/16</td><td>Dremel</td><td>100-N/7</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas estériles, alfiler, tijeras de disección, cinta</td><td></td><td></td><td></td>adhesiva</tr><tr><td>Matrigel</td><td>BD Biosciences</td><td>356234</td><td></td></tr><tr><td>Viales criogénicos, rosca externa con arandela de silicona</td><td>Corning</td><td>430659</td><td></td></tr><tr><td>Colagenasa de Clostridium histolyticum</td><td>Sigma</td><td>C9891</td><td></td></tr></tbody></table>

los<em&gt; en ovo</em&gt; chick corioalantoidea de membrana (cam) ensayo como un modelo de xenoinjerto eficiente de carcinoma hepatocelular

The In Ovo Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay as an Efficient Xenograft Model of Hepatocellular Carcinoma

La membrana corioalantoidea de pollo (CAM) comienza a desarrollarse el día 7 después de la fecundación y madura por día 12. El CAM es naturalmente inmunodeficientes y altamente vascularizado, por lo que es un sistema ideal para la implantación del tumor. Además, la CAM contiene proteínas de matriz extracelular tales como fibronectina, laminina, colágeno, la integrina alfa (v) beta3, y MMP-2, por lo que es un modelo atractivo para estudiar la invasión tumoral y la metástasis. Los científicos han tardado mucho provecho de la fisiología de la CAM utilizando como modelo de la angiogénesis. Más recientemente, el ensayo de CAM se ha modificado para que funcione como un sistema modelo de xenoinjerto in vivo para varios tipos de cáncer que sirve de puente entre el trabajo básico in vitro y modelos animales de cáncer más complejos. El ensayo de CAM permite el estudio del crecimiento del tumor, las terapias anti-tumorales, y pro-tumorales vías moleculares en un sistema biológicamente relevante que es a la vez en tiempo y costo efectiva. Aquí se describe el desarrollo de la CAM xenograft modelo de carcinoma hepatocelular (HCC) con tasas de supervivencia de embriones de hasta 93% y tumor fiable tomar conduce al crecimiento de los tumores en tres dimensiones, vascularizados.

Imágenes representativas de los pasos clave en el protocolo se muestran aquí. Figura 1A muestra el uso de la candler visualizar el embrión en desarrollo, el saco de aire, y la vasculatura de la CAM. Figura 1B-1C muestran el proceso de abandonar la CAM al hacer los dos orificios y luego aplicando presión negativa utilizando la bombilla de seguridad, y la Figura 1d muestra una eliminado satisfactoriamente CAM con una gran burbuja de aire bajo el orificio ...

La membrana corioalantoidea (CAM) del pollo es inmunodeficiente y altamente vascularizada, lo que la convierte en un modelo natural in vivo de crecimiento tumoral y angiogénesis. En este protocolo, describimos un método confiable para el crecimiento de tumores tridimensionales de carcinoma hepatocelular vascularizado (CHC) utilizando el ensayo CAM.

los<em&gt; En Ovo</em&gt; Chick corioalantoidea de membrana (CAM) Ensayo como un modelo de xenoinjerto eficiente de carcinoma hepatocelular

The chick chorioallantoic membrane (CAM) begins to develop by day 7 after fertilization and matures by day 12. The CAM is naturally immunodeficient and ...

El objetivo general de este experimento es desarrollar un modelo de xenoinjerto en CAM de carcinoma hepatocelular confiable. Esto se logra primero incubando los huevos para prepararlos para la inoculación. Como segundo paso, se hunde la membrana corioalantoidea o CAM del huevo y se realiza una ventana en la cáscara del huevo.A continuación, el huevo se inocula con células de carcinoma hepatocelular humano a través de la ventana en el cascarón para inducir el crecimiento tumoral. Los resultados muestran que se lograron cultivar con éxito tumores vascularizados tridimensionales utilizando líneas celulares de carcinoma hepatocelular humano. Mediante este protocolo, se alcanzaron tasas de supervivencia embrionaria de hasta el 93 %.Las principales ventajas del ensayo CAM frente a otras técnicas in vivo, como los modelos de tumores en ratón, son el breve tiempo experimental, el bajo costo total del experimento y la disponibilidad. Los ensayos CAM pueden utilizarse para estudiar la angiogénesis, el tumor, la invasión celular y la metástasis. Asimismo, pueden emplearse para determinar el efecto de moléculas pequeñas y fármacos sobre el crecimiento y desarrollo de tumores.La demostración visual de este procedimiento es importante porque los diferentes pasos necesarios para preparar el huevo, incluyendo la candela, la identificación de la vasculatura, la realización de pequeñas perforaciones cerca del saco de aire y en la parte superior del huevo sin vaciarlo, pueden resultar difíciles para los usuarios novatos. Cortar las ventanas sin agrietar la cáscara del huevo y asegurarse de que la cámara esté intacta durante todos los procesos podría ser un reto. Para comenzar coloque.Huevos de gallinas autóctonas libres de patógenos específicos de ocho días de edad en una bandeja giratoria con los extremos marcados orientados hacia arriba. Coloque la bandeja giratoria dentro de una incubadora de huevos a 36 grados Celsius con 50% de humedad e incube los huevos durante 48 horas. Después de la incubación, coloque los huevos en una rejilla para huevos con los extremos marcados hacia arriba y colóquelos dentro de una cabina de flujo laminar.Apague las luces de la habitación y de la campana, sostenga suavemente el extremo marcado del huevo contra el candil para huevos para exponer la vasculatura de la membrana corioalantoidea del pollo, conocida como CAM, y la bolsa de aire. Haga una marca entre los dos vasos sanguíneos principales con un lápiz. A continuación, haga un orificio en la punta del huevo, por encima de la bolsa de aire, en el extremo marcado, y un segundo orificio en la marca hecha con el lápiz.Utilizando un alfiler estéril, el agujero debe tener aproximadamente tres milímetros de profundidad. Presione el aire fuera de una perilla de seguridad y coloque firmemente el extremo abierto contra el agujero por encima del saco de aire. Libere lentamente la perilla para aplicar succión, atrayendo el aire hacia el agujero en la marca del lápiz y haciendo que la leva se desprenda del caparazón.Confirme que la bolsa de aire se ha desplazado desde el extremo marcado del huevo hasta el orificio señalado con lápiz, utilizando el candilador. Si no es así, haga ambos orificios ligeramente más profundos y vuelva a aplicar succión con la perilla de seguridad. A continuación, sostenga el huevo en una mano utilizando una herramienta rotatoria con una fresa de corte de 1516 pulgadas.Realice dos cortes transversales a través de la cáscara sin tocar el eje excéntrico. Los cortes deben tener dos centímetros de longitud y estar separados por un centímetro. A continuación, realice cortes longitudinales en los extremos de los dos cortes transversales tocando ligeramente la rueda de corte a la cáscara.Para retirar la cáscara, deslice unas pinzas estériles debajo y en paralelo al fragmento de cáscara. Sujete el fragmento con las pinzas y retírelo limpiamente. Sostenga un extremo de un trozo de cinta sobre sí mismo y luego coloque la cinta sobre la abertura en el huevo.Coloque el huevo en una bandeja para huevos y coloque la bandeja en la incubadora sin rotación durante no más de dos o tres horas antes de la inoculación. Para prepararse para la inoculación, coloque una mezcla de proteínas de la membrana basal, como matrigel, en hielo para evitar la polimerización. A continuación, use de cuatro a cinco mililitros de una solución de dos milimolar de EDTA por frasco para desprender las células tumorales y coloque el frasco en la incubadora de cultivo tisular durante cinco minutos.Reuspenda las células desprendidas en el medio y cuente el número de células. Utilice entre 500.000 y 2 millones de células para el injerto sobre la CAM, según la línea celular. A continuación, transfiera el volumen necesario para obtener el número adecuado de células a un tubo nuevo y centrifugue durante cinco minutos.A 500 veces la gravedad, deseche el sobrenadante y resuspenda el botón celular en 40 microlitros de PBS que contiene calcio y magnesio, conocido como PBS más más, y 20 microlitros de mezcla de membrana basal. En este punto, se pueden añadir fármacos u otros agentes de prueba a la suspensión celular.A continuación, coloque la bandeja de huevos en la cabina de flujo laminar. Retire la cinta del huevo y deje caer un anillo de silicona estéril de un milímetro de un vial criogénico a través de la abertura y sobre el conducto cam. Añada la solución de 60 microlitros de células, PBS más más y mezcla de membrana basal en el centro del anillo de silicona, vuelva a colocar la cinta en la ventana y traslade cuidadosamente la bandeja de huevos de regreso al incubador.Deje crecer los tumores durante cinco a siete días. Para la recolección de los tumores, coloque una almohadilla absorbente y una bolsa de riesgo biológico en la cabina. Prepare placas de 35 milímetros de diámetro por 10 milímetros de altura que contengan un mililitro de PBS más más y recipientes con paraformaldehído según sea necesario para histología. Introduzca el extremo puntiagudo de unas tijeras estériles para disección en el huevo a través del orificio cercano al extremo marcado y corte alrededor de toda la longitud del huevo. La membrana corioalantoidea y el tumor con el anillo deben quedar adheridos a la mitad superior de la cáscara con la abertura.Extraiga el tumor del cam mediante disección, tijeras y pinzas, y coloque el tumor en una placa de 35 milímetros por 10 milímetros. Mida y pese el tumor. Fije el tumor en paraform, aldehído e inclúyalo en parafina para su uso en experimentos de histología e inmunohistoquímica.Después de extraer el tumor, pique el tumor en la placa con tijeras de disección. Luego vierta el tejido picado en un tubo cónico de 15 mililitros y elimine el PBS más más mediante pipeteo. Añada dos mililitros de una solución de un miligramo por mililitro de colagenasa en PBS más más y mezcle invirtiendo el tubo varias veces.Incube el tubo a 37 grados Celsius durante al menos 30 minutos y hasta varias horas. A continuación, agregue cinco mililitros de medio al tubo y mezcle bien pipeteando de 20 a 40 veces. Esto es fundamental para disociar completamente las células.Después de que el sedimento se haya asentado, transfiera el sobrenadante a un tubo nuevo, centrifugue el tubo a 500 veces la gravedad durante cinco minutos y deseche el sobrenadante, dejando atrás el pellet de células disociadas. Cuando la CAM se implantó con células tumorales HUH-7, se observó un tumor vascularizado dentro del anillo. Después de cinco días de crecimiento, el análisis histológico del tumor HUH-7 procedente del ensayo en CAM mostró que las células tumorales se asemejan a células de carcinoma hepatocelular indiferenciado.Al trabajar con este método, es importante recordar que podrían requerirse ciertas optimizaciones en lo que respecta a diferentes células o fármacos. Por ejemplo, algunas líneas celulares podrían necesitar densidades más altas o más bajas para formar tumores tridimensionales.

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En este video, describimos el método para co-cultivar ganglios de la raíz dorsal y células cancerosas en la membrana corioalantoidea de pollo o CAM para estudiar la invasión perineural.

Membrana corioalantoidea de pollo o modelo tumoral CAM: un método in ovo para simular la invasión perineural de células tumorales

Este video muestra el aislamiento de la membrana corioalantoidea portadora de tumores del embrión de pollo. El CAM cosechado se puede utilizar para otras aplicaciones posteriores.

Cosecha de membrana corioalantoidea de pollo: un método para aislar la membrana corioalantoidea portadora de injerto tumoral del huevo de gallina

La<em&gt; En ovo</em&gt; CAM-ensayo como un Xenograftmodel para el sarcoma

La invasión perineuronal es un fenotipo agresivo para carcinomas de células escamosas de cabeza y cuello y otros tumores. El modelo de membrana corioalantoica de polluelos se ha utilizado para estudiar angiogénesis, invasión de cáncer, y metástasis. Aquí demostramos cómo este modelo se puede utilizar para evaluar la invasión perineural in vivo.

El modelo Chick Chorioalantoic Membrane In Vivo para evaluar la invasión perineural en el cáncer de cabeza y cuello

El carcinoma metastásico de células renales de células claras es una enfermedad sin un modelo animal completo para una investigación preclínica exhaustiva. Este protocolo ilustra dos nuevos modelos animales para la enfermedad: el modelo de ratón implantado ortopédicamente y el modelo de membrana corioalantoica de pollo, que demuestran metástasis pulmonar similar a los casos clínicos.

Comparación de metastática célula sin fin renal Modelo establecido en el riñón del ratón y en la membrana chorioalantoica del pollo

Presentamos el modelo de membrana corioalantoica de pollo como un modelo alternativo, trasplantable, in vivo para el injerto de líneas celulares de cáncer ginecológico y urológico y tumores derivados del paciente.

Uso de la membrana chorioalantoica de pollo en vivo modelo para estudiar cánceres ginecológicos y urológicos

Este protocolo describe tres métodos sobre cómo obtener y utilizar embriones de pollo de 5 a 8 días de edad y su membrana corioalantoidea (CAM) como modelo in vivo para estudiar imágenes de ultrasonido con contraste y administración de fármacos mediada por microburbujas.

La preparación de embriones de pollo ex ovo y vasos de membrana corioalantoicos como modelo in vivo para imágenes de ultrasonido con contraste y estudios de administración de fármacos mediados por microburbujas

Aquí, describimos un protocolo para desarrollar un modelo de xenoinjerto de membrana corioalantoidea (CAM) de pollo para tejido ovárico humano y demostramos la efectividad de la técnica, el marco de tiempo de revascularización del injerto y la viabilidad del tejido durante un período de injerto de 6 días.

El modelo de membrana corioalantoidea de pollo (CAM) como herramienta para estudiar el trasplante de tejido ovárico

Aprende a desarrollar un modelo de xenoinjerto de carcinoma hepatocelular usando el ensayo de membrana corioalantoidea de pollo. Este método permite cultivar tumores vascularizados tridimensionales con tasas de supervivencia embrionaria del 93%.

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