Name: Trabecular Respuesta malla de elevación de la presión en el Living Ojo humano (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: Aprende a cuantificar la respuesta morfométrica de la malla trabecular a la elevación aguda de la presión intraocular en ojos humanos vivos mediante tomografía de coherencia óptica. Este método permite estudiar las propiedades mecánicas del tracto de drenaje del humor acuoso.

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Apoyado en parte por los contratos R01-EY13178 y P30-EY08098 del Instituto Nacional de Salud (Bethesda, MD), la Fundación del Ojo y el Oído (Pittsburgh, PA), y subvenciones sin restricciones de Investigación para Prevenir la Ceguera (Nueva York, NY).

Ética Declaración: Se obtuvo la aprobación de la Junta de Revisión Institucional de la Universidad de Pittsburgh School of Medicine antes de que comenzara el reclutamiento de sujetos. Todos los temas siempre consentimiento informado por escrito antes de la participación en el estudio. 1. Adquisición de Datos <ol><li> Elevación de la presión <ol><li> Tome medidas de referencia (PIO y octubre mediciones) por inculcar una gota de 0,5% proparacaína en el ojo. Espere 3 minutos para la eficacia. </li><li> Aplique suavemente presión a la esclerótica temporal con el ophthalmodynamometer, 30 g en la cohorte 1 y 5 y luego 10 g en la cohorte 2. Luego tome las medidas (PIO y octubre) deseados de la siguiente manera <ol><li> Las mediciones de la PIO <ol><li> Medir la PIO basal. Elevar la presión como se describe en la sección 1.1. </li><li> En cohorte 1 inculcar una gota de proparacaína al 0,5%, 3 min para permitir la eficacia, y aplicar 30 g de la presión a la esclerótica. Mientras se está aplicando la presión, medir la PIO con el tonómetro siguiente Manufalas instrucciones del cturer. </li><li> En la cohorte 2, inculcar una gota de 0,5% proparacaína, permitir 3 min para la eficacia, y aplicar 5 g de presión escleral utilizando un ophthalmodynamometer. Mida la PIO durante la elevación de la presión usando las instrucciones del tonómetro siguiente del fabricante. <ol><li> Espere 5 minutos después de la medición de 5 g. </li><li> Aplicar 10 g de presión escleral por ophthalmodynamometer, y medir la PIO durante la elevación de la presión mediante el tonómetro siguiendo las instrucciones del fabricante. Registre la PIO y la condición (es decir, la línea de base o 10 g) en el registro de estudios. </li></ol></li></ol></li><li> Octubre de barrido <ol><li> Asiente el tema en el escáner de octubre. Introduzca los datos demográficos de los pacientes para los nuevos temas, o recuperar los datos demográficos de la base de datos de octubre de sujetos previamente escaneados. </li><li> Seleccione el segmento anterior protocolo de 512 x 128 de exploración. Centrar la atención en la ventana de imagen de vídeo. Disminuir la distancia entre el escánery el ojo hasta que aparezca la imagen de la córnea de la sección transversal en la ventana de exploración </li><li> Uso de los comandos verbales posicionar el limbo temporal del centro de la ventana de análisis por la dirección de la mirada del paciente en la dirección nasal </li><li> Adquirir la exploración de línea de base, y revisar el análisis de la calidad. Si es aceptable, ahorre, y si no es aceptable, repita este paso. <ol><li> Acepte las exploraciones si no hay parpadeos, y el ángulo se visualiza en todo el volumen sin la deriva fuera del borde de la imagen o mover de un tirón en la parte superior. </li></ol></li><li> Inculcar una gota de 0,5% proparacaína, permitir 3 min para la eficacia, y repita los pasos 1.3.2 a través de 1.3.5. </li><li> Para la cohorte 1, aplicar 30 g de presión escleral por ophthalmodynamometer, y adquirir la exploración mientras se aplica presión. Quite la presión y revisar la exploración de la calidad. Si es aceptable, ahorre, y si no es aceptable, repita este paso. </li><li> Para la cohorte 2, aplicar 5 g de presión escleral por ophthalmodynamometer, y adquirir la exploración mientras se aplica presión. Quite la presión y revisar la exploración de la calidad. Si es aceptable, ahorre, y si no es aceptable, repita este paso. </li><li> Espere 5 min lo que permite que el ojo se recupere de la 5 g de perturbación de presión. </li><li> Para la cohorte 2, aplicar 10 g de presión escleral por ophthalmodynamometer, y adquirir la exploración mientras se aplica presión. Quite la presión y revisar la exploración de la calidad. Si es aceptable, ahorre, y si no es aceptable, repita este paso. </li><li> Registre el tiempo de exploración, la condición (es decir, la línea de base o 10 g) y la ubicación en el registro de estudios. </li></ol></li></ol></li></ol></li></ol> 2. Procesamiento de Datos <ol><li> Conecte un dispositivo de almacenamiento USB de alta capacidad en la OCT. Seleccione &quot;Exportar&quot; en el menú Registros en la OCT. Designe una ubicación de archivo para los archivos exportados en la unidad USB. De-seleccionar la opción &quot;.zip&quot;. Introduzca el nombre del paciente para scans destinados a la exportación, y seleccione las imágenes para ser exportados. Iniciar la exportación. </li><li> Cuando finaliza la exportación, desmontar la unidad USB y retirar de la OCT. Conecte la unidad USB de alta capacidad que contiene las imágenes exportadas en la estación de trabajo de procesamiento de imágenes. </li><li> Inicie el programa de procesamiento de imágenes, en este caso ImageJ. </li><li> Importar los datos de imagen en bruto; seleccione &quot;Archivo -&gt; Importar -&gt; Raw&quot; en el menú archivo. Seleccione el archivo con el que termina en &quot;_cube_raw.img&quot; para ser procesada desde la unidad USB. </li><li> Guarde el archivo importado utilizando un nuevo nombre, de modo que los datos de imagen original se guarda inalterado (http://www.ori.dhhs.gov/education/products/RIandImages). </li><li> Introduzca los parámetros de importación de la siguiente manera, el tipo de imagen: de 8 bits, Ancho: 512, Altura: 1024, Offset: 0; Número de imágenes: 128. </li><li> Seleccione &quot;Plugins -&gt; R EGISTRO -&gt; StackReg&quot; en el menú de plugins. Y a continuación, seleccione la opción &quot;cuerpo rígidoOpción &quot;. A continuación, seleccione &quot;Archivo -&gt; Guardar como -&gt; TIFF&quot; para guardar la pila alineada. </li><li> Seleccione &quot;Proceso -&gt; Filtros -&gt; La media 3D&quot; en el menú de proceso. Introduzca los parámetros X = 1, Y = 1 y Z = 1, como las opciones de filtro. Repita este paso dos veces. </li><li> Seleccione &quot;Archivo -&gt; Guardar como -&gt; TIFF&quot; para guardar la pila promedio. Haga girar la rueda del ratón para desplazarse a fotograma 1 de la pila activa. </li><li> Seleccione &quot;Proceso -&gt; Mejorar contraste local (CLAHE)&quot; en el menú Procesamiento. Utilice el tamaño de bloque parámetros: 31, intervalos del histograma: 256, Pendiente máxima: 5, Máscara: ninguno, y marque la opción &quot;rápida&quot;. Utilice la tecla de flecha derecha para avanzar al siguiente fotograma. </li><li> Mover al bastidor 2 de la pila activa y repita el Process-&gt; Mejorar contraste local (CLAHE). Repita hasta que todas las tramas han tenido un mayor contraste. </li><li> Seleccione &quot;Archivo -&gt; Guardar como -&gt; TIFF&quot;; guardar la pila con contraste. A continuación, seleccione &quot;Imagen -&gt; Ajustar -&gt; Tamaño&quot; en el menú Imagen. Desactive la opción &quot;Restringir Relación de aspecto&quot;, a continuación, introduzca Anchura: 2.048 y altura: 1.024 valores. </li><li> Seleccione &quot;Imagen -&gt; Transformar -&gt; Voltear verticalmente&quot; en el menú Imagen. A continuación, seleccione &quot;Analizar -&gt; Set Escala&quot; en el menú Analizar. Introducir distancia en píxeles: 2048, distancia Conocido: 4000, y Proporción de píxeles: 1, y haga clic en Aceptar. Seleccione &quot;Archivo -&gt; Guardar como -&gt; TIFF&quot; para guardar el 1 calibrada: relación de pila 1 aspecto. </li><li> Lentamente girar la rueda del ratón para examinar visualmente las exploraciones para identificar un cruce buque distintivo para servir como un punto de referencia dentro de los análisis. Anote el número de la imagen y el número de referencia del marco de la hoja de cálculo de análisis. </li><li> Pulse la flecha izquierda clave 15 veces para ir a la primera trama de medición. Seleccione la opción &quot;SelectionsR a mano alzada21; herramienta de la barra de herramientas. </li><li> Coloque el ratón en el centro de Carolina del Sur y pulse la flecha hacia arriba. Repita este paso hasta SC llene la pantalla. </li><li> Manualmente segmento SC encerrando en un círculo la frontera con el ratón. Mantenga pulsada la tecla control (Ctrl) y pulse D para el marco de imagen actual. Mantenga pulsada la tecla Ctrl y pulse M. Transcribe la medición de SC área transversal y número de fotograma de medición a la hoja de cálculo de análisis. De-seleccionar el área esbozado. Pulse la tecla de flecha hacia la derecha 3 veces. Repita este paso hasta que SC se ha medido en 10 cuadros. </li><li> Pulse la flecha izquierda clave 30 veces para volver a la primera trama de medición. </li><li> Seleccione la herramienta segmento recto de la barra de herramientas. </li><li> Dibuja una línea recta desde los más anterior a posterior-la mayoría de los lugares en SC. Mantenga pulsada la tecla control y pulse D para sólo el marco actual. Mantenga presionada la tecla Control y pulse longitud M. Transcribe SC y número de fotograma a la hoja de cálculo de análisis. De-seleccionar el área esbozado. Pulse la tecla de flecha derecha3 veces. Repita este paso hasta que la longitud SC se ha medido en las mismas 10 fotogramas como el área transversal SC. </li><li> Inserte longitud = SC-CSA / axial la ecuación SC-IOWD en la hoja de cálculo de análisis para calcular la media SC interior de la pared la distancia de pared exterior (SC-IOWD) dividiendo las mediciones de área por las medidas de longitud. </li><li> Pulse la flecha izquierda clave 30 veces para volver a la primera trama de medición. </li><li> Seleccione la herramienta segmento recto de la barra de herramientas. </li><li> Dibuja una línea recta desde el más anterior en Carolina del Sur hasta la frontera de la malla trabecular y la cámara anterior. Asegúrese de que la línea es perpendicular a la frontera. Sostenga la tecla Ctrl y pulse D, entonces M. </li><li> Dibuja una línea desde la parte posterior, más ubicación de Carolina del Sur y la frontera de la TM y la cámara anterior. Asegúrese de que la línea perpendicular a la frontera. Sostenga Control y pulse D, entonces M. </li><li> Dibuja una línea desde el centro de Carolina del Sur y la frontera de la TM y la cámara anterior. Asegúrese de que el line perpendicular a la frontera. Mantenga pulsada la tecla control y pulse D para sólo el marco actual. </li><li> Transcribir las tres mediciones de espesor TM y número de marco a la hoja de cálculo de análisis. Para ello pulse la tecla de flecha hacia la derecha 3 veces. Repita este paso hasta que el espesor TM se ha medido en las mismas 10 fotogramas como el área transversal SC. </li></ol>

<ol><li>Quigley, H. A., Broman, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+number+of+people+with+glaucoma+worldwide+2010+and+2020%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+journal+of+ophthalmolog%22%5BJournal%5D)">The number of people with glaucoma worldwide 2010 and 2020.</a> The British journal of ophthalmolog. 90, 262-267 (2006).</li>
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<li>Camras, L. J., Stamer, W. D., Epstein, D., Gonzalez, P., Yuan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+trabecular+meshwork+stiffness+on+outflow+facility+in+normal+human+and+porcine+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmolog.%2C+%26+visual+scienc%22%5BJournal%5D)">Differential effects of trabecular meshwork stiffness on outflow facility in normal human and porcine eyes.</a> Investigative ophthalmolog., & visual scienc. 53, 5242-5250 (2012).</li>
<li>Last, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+modulus+determination+of+normal+and+glaucomatous+human+trabecular+meshwork%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmolog.%2C+%26+visual%22%5BJournal%5D)">Elastic modulus determination of normal and glaucomatous human trabecular meshwork.</a> Investigative ophthalmolog., & visual. 52, 2147-2152 (2011).</li>
<li>Lutjen-Drecoll, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+morphology+of+the+trabecular+meshwork+in+primate+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+retinal+and+eye+researc%22%5BJournal%5D)">Functional morphology of the trabecular meshwork in primate eyes.</a> Progress in retinal and eye researc. 18, 91-119 (1999).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pilocarpine-induced+dilation+of+Schlemm%27s+canal+and+prevention+of+lumen+collapse+at+elevated+intraocular+pressures+in+living+mice+visualized+by+OCT%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmolog.%2C+%26+visual+scienc%22%5BJournal%5D)">Pilocarpine-induced dilation of Schlemm's canal and prevention of lumen collapse at elevated intraocular pressures in living mice visualized by OCT.</a> Investigative ophthalmolog., & visual scienc. 55, 3737-3746 (2014).</li>
<li>Francis, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometric+analysis+of+aqueous+humor+outflow+structures+with+spectral-domain+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmolog.%2C+%26+visual%22%5BJournal%5D)">Morphometric analysis of aqueous humor outflow structures with spectral-domain optical coherence tomography.</a> Investigative ophthalmolog., & visual. 53, 5198-5207 (2012).</li>
<li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+visualization+of+aqueous+humor+outflow+structures+in-situ+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+eye+researc%22%5BJournal%5D)">3D visualization of aqueous humor outflow structures in-situ in humans.</a> Experimental eye researc. 93, 308-315 (2011).</li>
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<li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IOP+Elevation+Reduces+Schlemm%27s+Canal+Cross-sectional+Area%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmolog+%26+visual+scienc%22%5BJournal%5D)">IOP Elevation Reduces Schlemm's Canal Cross-sectional Area.</a> Investigative ophthalmolog & visual scienc. , (2014).</li>
</ol>

Dr. Schuman recibió regalías por propiedad intelectual licenciada por el Instituto de Tecnología de Massachusetts y Massachusetts Eye and Ear Infirmary de Zeiss, Inc.

La presente técnica aprovecha la observación no invasiva de la respuesta mecánica de los tejidos blandos para cuantificar colapso SC. Se necesita trabajo futuro usando los ojos de cadáveres humanos para calibrar deflexiones tejido rigidez del tejido real después de la disección. Pero, estos estudios van a sufrir las mismas limitaciones de los modelos de flujo de salida anteriores; en concreto, que las contribuciones de los músculos que viven a la tensión del tejido no estarán presentes. Además de calibración en un model...

El glaucoma es la segunda causa mundial de ceguera irreversible 1. La presión intraocular elevada (PIO) es un importante factor de riesgo causal para la presencia y la progresión de glaucoma 2-7. &#160; PIO está regulado por el equilibrio entre la formación y el drenaje del humor acuoso 8. Los lugares de mayor resistencia de salida son el tejido juxtacanicular y la pared interior del canal de Schlemm (SC), la interfaz entre el SC y la malla trabecular (TM) 9-11. Mientras que la rigidez TM puede contribuir a la prevención de colapso SC en la cara de elevación de la PIO, Overby et al. 12 demostraron recientemente que la expresión génica en el glaucoma se altera, lo que resulta en una mayor rigidez SC endotelial, lo que impide la formación de poros, lo que conduce a la elevación de la PIO en ojos glaucomatosos 13. Morfología TM y la rigidez se correlacionan con la posibilidad de salida 14,15, haciendo hincapié en tque necesita para medir sus características biomecánicas. Mediciones de microscopía de fuerza atómica de la TM muestran rigidez elevada en los ojos donados por los pacientes con glaucoma (81 kPa) en comparación con los ojos de donantes sin glaucoma (4,0 kPa) 16, pero estas mediciones se hicieron en vivo tejidos disecados ex. El TM posterior está anclada en el músculo ciliar a través de tendones anteriores de las células musculares longitudinales que se insertan en el laminosa y cribiforme TM exterior 17. Actividad muscular (CM) ciliar puede aumentar tirantez TM, imitando elevada rigidez TM 17. La capacidad de observar alteraciones en la resistencia a SC colapso inducido por perturbaciones de músculo liso se ha demostrado en un modelo animal 18. Hemos demostrado la capacidad de imagen no invasiva del sistema de salida del humor acuoso primaria en que viven los ojos humanos distal e incluyendo SC usando espectral tomografía de coherencia óptica de dominio (OCT) &lt;sup&gt; 19-21. Usando esta técnica, hemos demostrado la capacidad de cuantificar la respuesta morfométricos de la TM y SC a la elevación de la presión intraocular aguda 22. El objetivo general del método descrito en el presente documento fue cuantificar la respuesta morfométricos del tracto de salida vivir a la elevación de la presión intraocular aguda en los tejidos vivos in situ. Esta técnica tiene la ventaja de examinar el TM en condiciones fisiológicas, que incluye las contribuciones tanto de la actividad contráctil de la fibra dentro de la TM y CM a la rigidez TM, en comparación con las mediciones realizadas publicados en los tejidos disecados. El fundamento de la aplicación de esta técnica para la observación de la respuesta TM mecánica es que nos proporciona conocimientos de otro modo no disponibles en el comportamiento mecánico de la TM, que ahora sabemos que estar vinculados directamente a la resistencia de salida y la regulación de la PIO 13. Para discernir la contribución de los tejidos contráctiles a la rigidez general, una pequeña cohort de los sujetos fue examinada con y sin supresión de la actividad del músculo liso mediante la administración de tropicamida.

<table><tbody><tr><td>Dominio espectral OCT</td><td>Zeiss</td><td>Cirrus</td><td></td></tr><tr><td>Imaging Workstation</td><td>Apple</td><td>iMac</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmodinamometer</td><td>Baillairt Matalene Ophthalmodinamometer, Surgical instruments CO., Inc. Nueva York, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Programa de Procesamiento de Imágenes</td><td>rsb.info.nih.gov/ij</td><td>ImageJ, FIJI</td><td></td></tr></tbody></table>

trabecular respuesta malla de elevación de la presión en el living ojo humano

Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

Las características mecánicas de la malla trabecular (TM) están vinculados a la resistencia de salida y la presión intraocular (PIO) la regulación. El fundamento de esta técnica es la observación directa de la respuesta mecánica de la TM a la elevación de la PIO aguda. Antes de la exploración, la PIO se midió al inicio y durante la elevación de la PIO. El limbo es escaneado por el dominio espectral tomografía de coherencia óptica al inicio y durante la elevación de la PIO (ophthalmodynamometer (ODM) que se aplica a 30 g fuerza). Escanea se procesan para mejorar la visualización de la salida del humor acuoso vía utilizando ImageJ. Vasculares puntos de referencia se utilizan para identificar ubicaciones correspondientes en la línea de base y los volúmenes de escaneo de elevación de la PIO. Schlemm del canal (SC) área transversal (SC-CSA) y la longitud de SC de anterior a posterior a lo largo de su eje largo se miden manualmente en 10 lugares dentro de un segmento de 1 mm de SC. Significa interior a distancia de la pared exterior (longitud del eje corto) se calcula como el área de SC dividido por sulongitud del eje largo. Para examinar la contribución de los tejidos adyacentes a los efectos de las elevaciones de la PIO, las mediciones se repiten sin y con la relajación del músculo liso con la instilación de tropicamida. Migración TM en SC es resistido por la rigidez TM, pero se ve reforzada por el apoyo de su fijación al músculo liso adyacente dentro del cuerpo ciliar. Esta técnica es la primera para medir la respuesta vivir TM humano a la elevación de la presión in situ en condiciones fisiológicas dentro del ojo humano.

El uso de estas técnicas de adquisición de datos y de análisis de imagen, se obtienen los efectos de los cambios pequeños y grandes en la PIO en los parámetros morfológicos del tracto de salida, tales como SC área de sección transversal (Figura 1). Podemos ver que los altos niveles de aumento de la PIO producen un colapso observable de SC, como se representa por una gran reducción en el área de la sección transversal. El ojo parece ser capaz de acomodar los pequeños aumentos en la PIO, como lo demuestra...

Malla trabecular (TM) la migración al espacio del canal de Schlemm se puede inducir por elevación de la presión aguda por ophthalmodynamometer, y observado por dominio espectral tomografía de coherencia óptica. El objetivo de este método es cuantificar la respuesta morfométrico del tracto de salida vivir a elevación de la presión aguda en los tejidos vivos in situ.

Trabecular Respuesta malla de elevación de la presión en el Living Ojo humano

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale ...

El objetivo general de este procedimiento es cuantificar la respuesta morfométrica del trayecto de salida vivo ante la elevación aguda de la PIO en ojos humanos vivos in situ, mediante el examen de la malla trabecular en condiciones fisiológicas. Esto se logra primero midiendo la presión intraocular en condiciones basales y obteniendo imágenes del limbo, ubicación de la vía de salida del humor acuoso, mediante tomografía de coherencia óptica. El segundo paso consiste en repetir las mediciones de presión y los escaneos del limbo mientras se eleva la PIO aplicando cinco y diez gramos de presión sobre la esclera lateral mediante un dinamómetro oftálmico.A continuación, tras relajar el músculo liso con una gota de tropicamida. Se repiten las mediciones de presión y los escaneos del limbo sin y durante la elevación de la PIO. Luego, los datos de imagen se exportan y procesan, y se miden la estructura y la morfología de la vía de drenaje. La comparación del cambio morfológico en respuesta a la elevación de la PIO con y sin relajación del músculo liso proporciona información sobre las propiedades mecánicas de la malla trabecular.La principal ventaja que tiene esta técnica frente a otras,

trabecular-meshwork-response-to-pressure-elevation-living-human

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Fuente: Sharma, T. P., et al., Modelo de sistema autónomo translaminar para la modulación de la presión intraocular e intracraneal en segmentos posteriores de donantes humanos. J. Vis. Exp. (2020). Este video muestra el procedimiento de preparación de un ojo humano para estudiar los efectos de la presión translaminar en la señalización de las células ganglionares de la retina mediante la simulación de presiones intraoculares e intracraneales en un sistema autónomo translaminar.

 Desarrollo de un modelo de presión translaminar utilizando un sistema autónomo translaminar

Fuente: Lani-Louzada, R., et al., Cauterización de círculo completo del plexo vascular limbal para el glaucoma inducido quirúrgicamente en roedores. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demuestra la inducción y monitorización de la presión intraocular (PIO) elevada en un modelo de rata. El proceso consiste en cauterizar los vasos sanguíneos limbales, lo que provoca la oclusión de los vasos y una PIO elevada. A continuación, se permite que la rata se recupere y la PIO se monitoriza regularmente tanto...

 Inducción de presión intraocular elevada en un modelo de rata

Presentamos un método para inducir presión intraocular (PIO) elevada, mediante la inyección de microesferas magnéticas en el ojo de rata, para modelar el glaucoma. Esto conduce a fuertes aumentos de presión y muerte neuronal extensa. Este protocolo es fácil de realizar, no requiere inyecciones repetidas y produce aumentos estables y duraderos de la PIO.

Experimental glaucoma inducido por inyección ocular de microesferas magnéticas

Aquí, se presenta un protocolo para inducir hipertensión ocular en el ojo murino que resulta en la pérdida de células ganglionares de la retina tal como se observa en el glaucoma. microperlas magnéticas se inyectan en la cámara anterior y atraídos por el ángulo iridocorneal usando un imán para bloquear el flujo de salida del humor acuoso.

A Magnetic Microbead Oclusión Modelo para inducir hipertensión ocular dependiente de glaucoma en ratones

Aquí, describimos un protocolo para un microdissection de la captura del laser reproducible (LCM) para aislar la red trabecular (TM) para posteriores análisis de ARN. La capacidad de analizar los cambios en la expresión génica en el TM ayudarán en la comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes de enfermedades oculares relacionadas con la TM.

Microdissection de la captura del laser de la malla Trabecular muy pura de ojos de ratón para análisis de expresión génica

La hipertensión ocular crónica se induce mediante la aplicación de una sutura de circumlimbal en ratas y ratones, llevando al deterioro funcional y estructural de las células ganglionares de la retina compatibles con glaucoma.

Un modelo de Glaucoma inducido por sutura de Circumlimbal en ratas y ratones

Describimos y detallamos el uso del sistema autónomo translaminar. Este sistema utiliza el segmento posterior humano para regular independientemente la presión dentro del segmento (intraocular) y que rodea el nervio óptico (intracraneal) para generar un gradiente de presión translaminar que imita las características de la neuropatía óptica glaucomatosa.

Modelo de sistema autónomo translaminar para la modulación de la presión intraocular e intracraneal en segmentos posteriores de donantes humanos

El objetivo de este protocolo es caracterizar un nuevo modelo de neurodegeneración glaucomatosa basado en la cauterización térmica de 360° del plexo vascular limbal, induciendo hipertensión ocular subaguda.

Cauterización de círculo completo del plexo vascular limbal para el glaucoma inducido quirúrgicamente en roedores

Este protocolo describe la Trabeculoplastia por Túnel (3T), una cirugía de glaucoma mínimamente invasiva que incluye incisión trabecular, dilatación del canal de Schlemm (SC) e implantación de suturas por tensión para restaurar el flujo acuoso fisiológico, acompañada de una serie de casos no comparativa.

Trabeculoplastia por túnel de trabeculotomas (3T): Protocolo quirúrgico paso a paso para el glaucoma primario de ángulo abierto

Una nueva técnica para registrar las presiones dentro del cráneo se describe. El método mínimamente invasiva usa un sistema de presión de fibra óptica de detección para medir con precisión la presión intracraneal (PIC) en ratas anestesiadas, sin causar un trauma cerebral importante. La técnica se puede utilizar en una amplia gama de modelos experimentales.

Medición de la presión intracraneal epidural en ratas, utilizando un transductor de presión de fibra óptica

Aprende a cuantificar la respuesta morfométrica de la malla trabecular a la elevación aguda de la presión intraocular en ojos humanos vivos mediante tomografía de coherencia óptica. Este método permite estudiar las propiedades mecánicas del tracto de drenaje del humor acuoso.

Trabecular Respuesta malla de elevación de la presión en el Living Ojo humano

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