Simultánea de imágenes PET / RM Durante cerebral del ratón hipoxia-isquemia

El objetivo general de este procedimiento es obtener simultáneamente datos de tomografía de emisión y resonancia magnética durante el inicio de una lesión hipóxica isquémica. Esto se logra mediante el primer ligado, la arteria carótida común unilateralmente en un ratón. El segundo paso es preparar al animal para la obtención de imágenes y adquirir los datos de referencia de PET y RM.

El paso final es adquirir datos de imágenes durante y después de un desafío hipóxico. En última instancia, la adquisición simultánea de PET y RM se utiliza para demostrar cambios en la difusión del agua y en la absorción de desoxiglucosa de la gripe en la lesión durante y después de la hipoxia. Este método puede proporcionar información sobre los cambios dinámicos en la fisiología y la bioquímica durante el accidente cerebrovascular, pero también se puede aplicar en otros casos en los que el sistema que se observa no está en estado estacionario, sino que está cambiando.

Prepare un campo quirúrgico estéril con las herramientas que se muestran aquí, colocadas convenientemente alrededor del exterior. Encienda la almohadilla térmica y asegúrese de que alcance los 37 grados centígrados. Antes de iniciar el procedimiento.

Anestesiar al ratón con uno a 3% de flúor y aplicar ungüento oftálmico en los ojos. Colóquelo en posición supina y confirme la sedación con el pellizco de la punta. A continuación, aplique la crema detory en la parte inferior del cuello y la parte superior del pecho con uno o dos bastoncillos de algodón.

Espere unos dos minutos y luego retire el cabello y la crema con una gasa húmeda una vez que el área esté libre de vello. Esterilizar la zona de incisión con Betadine aplicándolo de forma circular de interior a exterior. Cámbiese a guantes quirúrgicos estériles y use tijeras quirúrgicas para hacer una incisión de un centímetro a lo largo de la línea media de la parte inferior del cuello.

Separe cuidadosamente la piel exterior de la fascia circundante con unas tijeras quirúrgicas. Usando dos pinzas de sutura de micro iris MCFE sin. Extirpa el tejido conectivo.

Vaya entre las almohadillas de grasa viscoelástica y separe la arteria carótida común derecha de la fascia. Tenga cuidado de evitar dañar las venas o alterar el nervio vago. A continuación, utilice las pinzas para exteriorizar la arteria carótida común derecha.

En una posición estable, aplique varias gotas de solución salina para ayudar a evitar que se seque más allá de dos o tres centímetros de sutura de seda debajo de la arteria carótida común derecha y ligada con un nudo cuadrado doble. A continuación, repita la ligadura utilizando un segundo tramo de sutura. Vuelva a colocar la arteria carótida común derecha y limpie el exceso de líquido de la abertura con un hisopo estéril con punta de esponja.

A continuación, cierre la incisión con seis suturas de seda OTT y aplique lidocaína por vía tópica hasta siete miligramos por kilogramo. Siga las pautas específicas de su institución para el manejo quirúrgico del dolor. Realice un seguimiento posquirúrgico durante la recuperación hasta que el ratón esté listo para la obtención de imágenes.

Verifique el funcionamiento de los medidores de flujo de oxígeno y nitrógeno encendiendo primero las fuentes de aire de oxígeno y nitrógeno. A continuación, encienda los caudalímetros a un caudal de un litro por minuto. Ajuste el flujo de oxígeno a 114,3 miligramos por minuto y el flujo de nitrógeno a 1,150 gramos por minuto.

A continuación, prepare la cama del animal asegurándose de que la anestesia, la almohadilla respiratoria y los sistemas de calefacción estén colocados de forma segura y funcional. A continuación, fije marcadores de referencia que contengan radiotrazador en el lecho del animal dentro del campo de visión. Se anestesia al ratón con flúor y se precalienta su cola para prepararlo para la inserción del catéter.

Una vez listo, inserte hasta cinco centímetros de un catéter PE 10 precargado con solución salina heparinizada. Asegure la vía intravenosa en el sitio de inserción con una gota de adhesivo de cianoacrilato. A continuación, transfiera el animal a la cama de animales preparada.

Vuelva a aplicar el ungüento oftálmico en los ojos del ratón para evitar que se seque y estabilizar la cabeza del animal colocando sus incisivos superiores alrededor de la barra del diente y colocando las barras de la oreja en su lugar. Comience con un flujo de flúor de uno a 2% entre 0,5 y un litro por minuto. Inserte un termómetro de sonda rectal, asegúrese de que las lecturas de temperatura y respiración funcionen.

A continuación, extraiga alrededor de 600 microcuries de la dosis de radiotrazador en 200 microlitros de solución salina en una jeringa de un mililitro y colóquela en una bomba de jeringa. Conecte aproximadamente tres metros de tubo de PE 10 heparinizado a la jeringa y el otro extremo a la línea del catéter de la vena de cola. Verifique que la posición de la bobina de resonancia magnética y cualquiera de las líneas y cables, especialmente los tubos de anestesia, no estén enredados.

Asegúrese de que el centro del cerebro esté alineado con los centros del sistema PET de la bobina de resonancia magnética y el imán de resonancia magnética. A continuación, deslice con cuidado la cama del animal hacia delante en el orificio del imán. Realice la sintonización y la adaptación de la bobina de resonancia magnética girando las perillas de ajuste de la bobina para minimizar los desajustes de impedancia y frecuencia.

A continuación, seleccione una secuencia piloto de viaje poco común y ejecute la secuencia desde la ventana de control de escaneo para adquirir una imagen de exploración. Verifique la posición del animal y ajuste su posición si es necesario hasta que el cerebro esté centrado. A continuación, restablezca las cuñas al valor cero.

Ahora ejecuta un punto. Resuelva la secuencia de escaneo espectroscópico dentro del cerebro utilizando un volumen rectangular de 3,9 milímetros por seis milímetros por nueve milímetros. Compruebe la anchura de la línea de flotación con el comando macro anchura de la línea de cálculo.

Si el ancho completo a la mitad del valor máximo es aceptable, coloque el plano de corte para el escaneo de imágenes ponderadas de difusión utilizando el editor geométrico cuando el plano de corte resultante esté alineado como se desee. Copie este plano de corte en la ventana de control de escaneo para todos los escaneos posteriores y comience la adquisición de la imagen. A continuación, con la adquisición de PET preparada y lista para comenzar, ponga en marcha la bomba de infusión Una vez inyectada la solución salina del catéter, comience la adquisición de PET.

Con el fin de capturar la entrada del radiotrazador. Controle la tasa de conteo y busque un aumento gradual en los recuentos indicativo de una inyección exitosa. Después de 10 a 15 minutos, inicie el desafío hipóxico apagando el flujo de aire médico y encendiendo inmediatamente los medidores de flujo de oxígeno y nitrógeno para suministrar 8% de oxígeno y 92% de nitrógeno.

En este punto, reduzca la dosis de flúor al 0,8% inmediatamente después de iniciar el desafío hipóxico. Comience la adquisición de imágenes ponderadas de difusión utilizando la configuración de escaneo anterior. Comience una segunda adquisición de imágenes ponderadas de difusión inmediatamente después de que se complete el primer escaneo.

Termine con el desafío hipóxico apagando los medidores de flujo, restaurando el flujo de aire médico y devolviendo la concentración de flúor a uno a 2%Adquiera una exploración de imágenes ponderadas por difusión posterior a la hipoxia, luego apague la bomba de infusión y adquiera imágenes anatómicas en los planos axial y sagital utilizando el editor de geometría. Asegúrese de que el campo de visión de adquisición cubra el cerebro. Con este método, los cambios en la difusión son detectables rápidamente después del inicio de un accidente cerebrovascular, como se esperaba.

Los valores del coeficiente de difusión aparente en el lado ocluido del cerebro disminuyen a medida que avanza la lesión. Mostrado. Aquí hay cortes coronales y transversales de un animal que muestran la absorción de FDG. La imagen de la mascota está en primer plano y se registra infundida con una imagen de resonancia magnética anatómica en el fondo para su visualización.

Simultáneamente con cambios en el coeficiente de difusión aparente, se pueden observar diferencias hemisféricas en la absorción de FDG después de comenzar el desafío hipóxico. En dos de los tres casos, la captación tardía de EPS disminuyó en relación con la captación contralateral después de la hipoxia. Aunque esto no fue cierto, en todos los casos probablemente debido a la variabilidad animal, podemos utilizar este procedimiento general con diferentes tipos de resonancia magnética y contraste para mascotas con el fin de observar otros parámetros fisiológicos u objetivos en el cerebro.