Name: Simultánea de imágenes PET / RM Durante cerebral del ratón hipoxia-isquemia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
Description: Aprenda a realizar imágenes PET/RM simultáneas durante la lesión hipóxico-isquémica cerebral en ratones. Este método permite analizar cambios dinámicos en la difusión del agua y el metabolismo de la glucosa.

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Los autores desean agradecer el Centro de Molecular y Genómica de imagen en la UC Davis y el Departamento de Imagen Biomédica de Genentech. Esta labor fue apoyada por los Institutos Nacionales de la subvención número Asociación de Investigación de Bioingeniería de Salud R01 EB00993.

Todo el manejo y procedimientos de los animales descritos en este documento, y de acuerdo a la Investigación Animal: Reporte experimentos in vivo (llegar) directrices, se llevaron a cabo de acuerdo con los protocolos aprobados por la Asociación para la Evaluación de Acreditación de Laboratorio Animal Care (AAALAC) Internacional acreditado Institucional Cuidado de Animales y el empleo Comisión de la Universidad de California, Davis. Cirugía apropiada no debe dar lugar a signos de dolor o malestar en el animal, pero las medidas adecuadas se deben tomar si se observan estos síntomas, incluyendo la administración de analgésicos o en algunos casos, la eutanasia. El lado derecho de los animales fue elegido arbitrariamente por el procedimiento unilateral descrito. 1. Unilateral arteria carótida común (CCA) Ligadura <ol><li> Preparar campo estéril con herramientas quirúrgicas esterilizadas y materiales colocados convenientemente. Asegurar almohadilla térmica se calienta a 37 ° C, con sonda de temperatura colocado de forma segura en la almohadilla. &amp; #160; Asegúrese de usar un paño estéril para cubrir el lugar de la cirugía. </li><li> Anestesiar animales (isoflurano, 1.3% en aire a 0,5-1 L / min), y coloque animal en posición supina con la cola de espaldas. Compruebe anestesia apretando el dedo del pie - esto debería provocar ninguna reacción si el animal está anestesiado correctamente. Aplicar pomada oftálmica para los ojos. </li><li> Aplicar crema de depilación a parte inferior del cuello a la zona superior del pecho de 1-2 hisopos de algodón. Espere 03.01 min y, a continuación, eliminar el vello y la crema usando gasa o alcohol hisopos húmedos. Área de Swab incisión con Betadine en forma circular de dentro a fuera, y luego cambiar en guantes quirúrgicos estériles. </li><li> Con unas tijeras quirúrgicas, hacer una incisión de aproximadamente 1 cm a lo largo de la línea media de la parte inferior del cuello. Separe con cuidado la piel externa de la fascia que rodea el uso de tijeras quirúrgicas. </li><li> El uso de dos McPherson fórceps iris micro de sutura, separar la arteria carótida común derecha desde fascia, teniendo cuidado de evitar dañar las venas o disturBing el nervio vago. </li><li> Usando las pinzas de la derecha, exteriorizar el CCA derecha en una posición estable. Aplique varias gotas de solución salina para prevenir el secado. Pasar una longitud adecuada (2-3 cm) de 6-0 sutura de seda por debajo de la CCA derecha y ligar con un nudo doble cuadrado. Opcionalmente, ligar de nuevo utilizando una segunda longitud de sutura de seda 6-0. </li><li> Vuelva a colocar la derecha CCA y limpiar el exceso de líquido de la apertura con una esponja estéril con punta de algodón. Cierre la incisión con sutura de seda 6-0. Aplicar la lidocaína por vía tópica hasta 7 mg / kg. </li><li> Deje que el animal se recupere de la anestesia hasta ambulatoria (aproximadamente 30 min) y realizar el monitoreo post-quirúrgica, hasta los animales está listo para la imagen. </li></ol> 2. Preparación para la proyección de imagen: Verificaciones del sistema y hardware <ol><li> Configurar el hardware y el software para los sistemas de RM y PET y comprobar su funcionalidad como sigue. Asegúrese de que todas las conexiones físicas son seguras y configuración del software se seleccionan adecuadamente. <ol><li&gt; Asegúrese de que el sistema de PET está a la temperatura de funcionamiento prescrita de 5 ° C utilizando el sistema de refrigeración por aire. </li><li> Sistema de montaje de PET en el interior del agujero de resonancia magnética, la alineación del campo de visión (FOV) centros que utilizan desplazamientos axiales conocidos PET y la RM. Montar la bobina de MRI en el interior del orificio del sistema de PET y el centro de la bobina con el sistema PET y centros de imán de MRI. </li><li> A su vez en la electrónica de PET para el poder y la tensión de polarización (Nota: los pasos variarán por instrumento). Realizar un análisis rápido (5 min) usando un cilindro de 68 Ge y comprobar el sinograma resultante para asegurar que todos los detectores están en funcionamiento. </li><li> Opcionalmente adquirir datos que se utilizarán para una matriz de transformación de PET / RM para fines del co-registro: Llenar un fantasma en tres dimensiones (por ejemplo, tres esferas rellenas) con 200 Ci de 18 solución acuosa F y adquirir durante 15 minutos con PET. Adquirir anatómica datos de resonancia magnética: en la ventana de Scan Control, seleccione la multicorte secuencia multi-eco (MIPYME) (véase el cuadro 1 </strong&gt;). Repita el procedimiento para las tres orientaciones principales: axial, sagital y coronal. </li></ol></li><li> Compruebe los ajustes de la bomba de infusión y operación. Ajuste la bomba al 4,44 l por minuto, que a 45 minutos de infusión constante entrega un volumen total de 200 l, el límite recomendado típico para la inyección intravenosa en un 20 g animal. </li><li> Compruebe el funcionamiento del calentador y confirme que la salida de temperatura es suficiente para mantener el calentamiento de los animales (37 ° C). Compruebe que la temperatura y la monitorización respiratoria es operativa en la preparación para la colocación de los animales en la cama animal. </li><li> Compruebe el funcionamiento de los O 2 y N 2 caudalímetros (para 0,5 L / min: O 2 a 57,2 mg / min y N2 a 0,575 g / min) por encender ambos con la fuente de aire comprimido fuera y O 2 y N 2 fuentes sucesivamente. Para evitar el riesgo de dañar los medidores de flujo, no encenderlos sin la suficiente presión de entrada. </li><li> Asegúrese de que el isoflurano vaporizer está suficientemente llena. Antes de la formación de imágenes, iniciar el flujo de la anestesia con isoflurano al 1-2% y de 0,5 a 1 L / min. </li><li> Preparar la cama de animales, garantizando que los de anestesia, almohadilla respiratoria y sistemas calentadores están colocados de forma segura y funcional. Para PET / MRI exactitud adicional co-registro, marcadores de referencia (por ejemplo, tubos capilares llenos de radiotrazador a una concentración similar a la inyecta para formación de imágenes) se pueden unir a la cama de los animales dentro del campo de visión. </li></ol> Flujo de trabajo 3. Imaging Después de todas las revisiones de los equipos necesarios se hayan completado, proceder a la imagen de la siguiente manera: <ol><li> Anestesiar al animal con isoflurano y insertar catéter de la vena de la cola (28 G aguja, PE-10 tubos de menos de 5 cm) rellena con solución salina heparinizada (0,5 ml de heparina, 1000 USP / ml, en 10 ml de solución salina). Calentando el animal y / o la cola puede mejorar la precisión del catéter de inserción. Opcionalmente colocar una gota de adhesivo de cianoacrilato en el sitio de la inserciónpara asegurar la línea IV. </li><li> Traslado al animal a la cama preparados para animales. Asegúrese de que la cabeza del animal es seguro, con incisivos superiores garantizados por el bar y oído bares de dientes en su lugar si se está utilizando. </li><li> Aplicar pomada oftálmica para los ojos para evitar que se seque. Inserte el termómetro sonda rectal. Asegúrese de que la temperatura y las lecturas de respiración son funcionales. </li><li> Extraer la dosis radiotrazador (alrededor de 600 Ci en 200 l) para ser inyectada en heparinizada PE-10 tubo de longitud apropiada - de aproximadamente 3 m para PE-10 tubos y un volumen de 200 l. Conecte un extremo de este tubo a la jeringa de la bomba de infusión, y el otro a la línea de catéter de vena de la cola, con cuidado de no crear perforaciones en el tubo. </li><li> Deslizar la cama de los animales hacia delante en el orificio del imán, asegurándose de no perturbar el posicionamiento de la bobina de resonancia magnética y las líneas o cables, especialmente el tubo de la anestesia. Asegúrese de que el centro del cerebro está alineado con los centros de la MBobina de RI, sistema PET y la RM imán. </li><li> Realizar la sintonización y la congruencia de la bobina de MRI mediante la rotación de los botones de ajuste en la bobina, lo que minimiza la impedancia (verifique las especificaciones de bobina) y frecuencia (300 MHz durante 1 hora a 7 Tesla) desajustes mediante la observación de la pantalla del preamplificador de alta potencia. </li><li> (RM) Después de ajuste y adaptación, adquirir una imagen del explorador: seleccione una secuencia TriPilot RARO y ejecutar la secuencia de la ventana de Control Scan. Compruebe posicionamiento del animal, pasos 3.5 y 3.6 según sea necesario repetir. Restablecer cuñas de valor cero. </li><li> (RM) Adquirir una exploración localizada punto de resolverse la espectroscopia (PRENSA) en un volumen en el cerebro: Ejecutar una secuencia PRESS (ver Tabla 1) en un volumen rectangular con unas dimensiones de 3,9 mm x 6 mm x 9 mm. Compruebe el ancho de línea de agua utilizando el comando de macro CalcLineWidth. Si la anchura total a la mitad del máximo (FWHM) valor es aceptable (por ejemplo, 0,2 ppm), continúe con el paso 3.10. Si no es así, vaya al paso 3.9. </li><li> (RM) Adquirir un mapa de campo: Ejecutar una secuencia FieldMap (ver Tabla 1). Utilice los datos resultantes de una proyección cuña de múltiples ángulos (MAPSHIM) mediante la ejecución del comando de macro MAPSHIM y seleccionando lineales y de segundo orden (z 2) ajustes locales. Repita el paso 3.8. </li><li> (RM) Coloque el plan de la rebanada para la exploración DWI (ver Tabla 1): mediante el Editor de Geometría, asegúrese de que la adquisición FOV está en condiciones de adquirir el volumen deseado de interés dentro del cerebro. Si el plan rebanada resultante esté alineada lo deseas, copiar este plan rebanada en la ventana Scan Control para todos los análisis posteriores de DWI. Comience adquisición. </li><li> (PET) Con la adquisición PET preparado y listo para comenzar, iniciar la bomba de infusión. Después del retardo de pre-determinado en el que se ha inyectado solución salina desde el catéter, comenzar la adquisición PET (véase la Tabla 1) con el fin de capturar la entrada de radiotrazador. Vigilar la tasa de recuento y buscarse un aumento gradualen el recuento de indicativos de una inyección de éxito. </li><li> Después de 10-15 minutos, iniciar el concurrente simulación hipóxica con el paso 3.12. Para iniciar la simulación hipóxica, apague el flujo de aire médica y de inmediato el poder sobre el O 2 y N 2 caudalímetros con los ajustes predeterminados para entregar 8% de oxígeno y 92% de nitrógeno, y reducir isoflurano al 0,8%. No encienda caudalímetros sin la presión de entrada. </li><li> (MRI) Al mismo tiempo que en la etapa 3.12, comience adquisición DWI preparado en la etapa 3.10 (escanear &quot;H1&quot;). </li><li> (RM) Comience adquisición DWI (scan &quot;H2&quot;), preparado en el paso 3.10, inmediatamente después de la exploración H1 se ha completado. Terminar simulación hipóxica apagando caudalímetros, restaurando el flujo de aire medicinal, y volviendo la concentración de isoflurano a un valor adecuado basado en el monitoreo fisiológico. </li><li> (RM) Adquirir un DWI post-hipoxia scan preparado en el paso 3.10. Apague la bomba de infusión después de esta exploración se ha completado. </li><li> (RM) anat Adquiririmágenes omical en la axial y sagital. En la ventana de Control Scan - seleccionar la secuencia MIPYME (ver Tabla 1). Uso del editor de la geometría, asegúrese de que la adquisición FOV cubre el cerebro. </li><li> Retire animal, volver a la jaula cuando ambulatoria y vigilar los signos de morbilidad, la eutanasia si es necesario con la administración de CO 2 seguido por dislocación cervical como método secundario. </li></ol>

<ol><li>Donnan, G. A., et al. The Lancet. 371, 1614-1623 (2008).</li>
<li>Turner, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+science+of+cerebral+ischemia+and+the+quest+for+neuroprotection+navigating+past+failure+to+future+success+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">The science of cerebral ischemia and the quest for neuroprotection navigating past failure to future success A review.</a> Journal of Neurosurgery. 118, 1072-1085 (2013).</li>
<li>Vannucci, R. C., Perlman, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interventions+for+perinatal+hypoxic+ischemic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Interventions for perinatal hypoxic ischemic encephalopathy.</a> Pediatrics. 100, 1004-1014 (1997).</li>
<li>Chicha, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells+for+brain+repair+in+neonatal+hypoxia%E2%80%93ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Childs+Nervous+System%22%5BJournal%5D)">Stem cells for brain repair in neonatal hypoxia–ischemia.</a> Childs Nervous System. 30, 37-46 (2014).</li>
<li>Barks, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+controversies+in+hypothermic+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Fetal+and+Neonatal%22%5BJournal%5D)">Current controversies in hypothermic neuroprotection.</a> Seminars in Fetal and Neonatal. 13 (1), 30-34 (2008).</li>
<li>Jantzie, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+ischemic+stroke+a+hypoxic+ischemic+injury+to+the+developing+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Neurology%22%5BJournal%5D)">Neonatal ischemic stroke a hypoxic ischemic injury to the developing brain.</a> Future Neurology. 3, 99-102 (2008).</li>
<li>James, A., Patel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxic+ischaemic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Paediatrics+and+Child+Health%22%5BJournal%5D)">Hypoxic ischaemic encephalopathy.</a> Paediatrics and Child Health. 24 (9), (2014).</li>
<li>Levine, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoxic+ischemic+encephalopathy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Anoxic ischemic encephalopathy in rats.</a> The American Journal of Pathology. 36 (1), (1960).</li>
<li>Vannucci, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+stroke+in+the+female+diabetic+db+db+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Experimental stroke in the female diabetic db db mouse.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 21, 52-60 (2001).</li>
<li>Sheldon, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+related+brain+injury+in+neonatal+mice+subjected+to+hypoxia+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Strain related brain injury in neonatal mice subjected to hypoxia ischemia.</a> Brain Research. 810, 114-122 (1998).</li>
<li>Adhami, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia+hypoxia+induces+intravascular+coagulation+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia hypoxia induces intravascular coagulation and autophagy.</a> American Journal of Pathology. 169 (2), 566-583 (2006).</li>
<li>Catana, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+in+vivo+positron+emission+tomography+and+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Simultaneous in vivo positron emission tomography and magnetic resonance imaging.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 3705-3710 (2008).</li>
<li>Judenhofer, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+PET+MRI+a+new+approach+for+functional+and+morphological+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Simultaneous PET MRI a new approach for functional and morphological imaging.</a> Nature Medicine. 14, 459-465 (2008).</li>
<li>Wehrl, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+PET+MRI+reveals+brain+function+in+activated+and+resting+state+on+metabolic+hemodynamic+and+multiple+temporal+scales%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Simultaneous PET MRI reveals brain function in activated and resting state on metabolic hemodynamic and multiple temporal scales.</a> Nature Medicine. 19, 1184-1189 (2013).</li>
<li>Judenhofer, M. S., Cherry, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+for+preclinical+PET+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Applications for preclinical PET MRI.</a> Seminars in Nuclear Medicine. 43 (1), 19-29 (2013).</li>
<li>Wehrl, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+and+Translational+PET%2FMR+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preclinical and Translational PET/MR Imaging.</a> Journal of Nuclear Medicine. 55, Suppl 2. 11S-18S (2014).</li>
<li>Heiland, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusion+and+Perfusion+Weighted+MR+Imaging+in+Acute+Stroke+Principles+Methods+and+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Imaging+Decisions+MRI%22%5BJournal%5D)">Diffusion and Perfusion Weighted MR Imaging in Acute Stroke Principles Methods and Applications.</a> Imaging Decisions MRI. 7, 4-12 (2003).</li>
<li>Loubinoux, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spreading+of+vasogenic+edema+and+cytotoxic+edema+assessed+by+quantitative+diffusion+and+T2+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Spreading of vasogenic edema and cytotoxic edema assessed by quantitative diffusion and T2 magnetic resonance imaging.</a> Stroke. 28, 419-427 (1997).</li>
<li>Ouyang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+2+%5B18F%5Dfluoroacetate+kinetics+in+rodent+models+of+cerebral+hypoxia%E2%80%93ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 2 [18F]fluoroacetate kinetics in rodent models of cerebral hypoxia–ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 34 (5), 836-844 (2014).</li>
<li>Kuhl, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+stroke+on+local+cerebral+metabolism+and+perfusion+mapping+by+emission+computed+tomography+of+18FDG+and+13NH3%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Effects of stroke on local cerebral metabolism and perfusion mapping by emission computed tomography of 18FDG and 13NH3.</a> Annals of Neurology. 8, 47-60 (1980).</li>
<li>Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Brain+Imaging+in+Small+Animal+Stroke+Models+MRI+and+PET%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromethods%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Brain Imaging in Small Animal Stroke Models MRI and PET.</a> Neuromethods. 47, 139-165 (2010).</li>
<li>Marik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+of+glial+metabolism+using+2-18F-fluoroacetate%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">PET of glial metabolism using 2-18F-fluoroacetate.</a> Journal of Nuclear Medicine. 50 (6), 982-990 (2009).</li>
<li>Martín, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depressed+glucose+consumption+at+reperfusion+following+brain+ischemia+does+not+correlate+with+mitochondrial+dysfunction+and+development+of+infarction%3A+an+in+vivo+positron+emission+tomography+study%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Neurovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Depressed glucose consumption at reperfusion following brain ischemia does not correlate with mitochondrial dysfunction and development of infarction: an in vivo positron emission tomography study.</a> Current Neurovascular Research. 6, 82-88 (2009).</li>
<li>Carson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+physiological+measurements+using+constant+infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">PET physiological measurements using constant infusion.</a> Nuclear Medicine and Biology. 27, 657-660 (2000).</li>
<li>Greve, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+BOLD+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">The BOLD effect.</a> Methods in Molecular Biology. 771, 153-159 (2011).</li>
<li>Flores, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+anesthetic+agent+and+carrier+gas+on+blood+glucose+and+tissue+uptake+in+mice+undergoing+dynamic+FDG-PET+imaging+sevoflurane+and+isoflurane+compared+in+air+and+in+oxygen%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">The effects of anesthetic agent and carrier gas on blood glucose and tissue uptake in mice undergoing dynamic FDG-PET imaging sevoflurane and isoflurane compared in air and in oxygen.</a> Molecular Imaging and Biology. 10, 192-200 (2008).</li>
<li>Delso, G., Ziegler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+MRI+system+design%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">PET MRI system design.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 36, 86-92 (2009).</li>
</ol>

JM y SW son empleados de Genentech.

RM anatómica simultánea y dinámica [18 F] FDG PET datos DWI-RM y se adquirieron con éxito de los animales de experimentación durante la simulación hipóxica después de la ligadura de la arteria carótida común. Esto representa un poderoso paradigma experimental para formación de imágenes multimodal de la fisiopatología de rápida evolución asociado con lesiones isquémicas en el cerebro y fácilmente podría extenderse a estudiar otros radiotrazadores de PET (por ejemplo, marcadores de la neuroinflamación) y secuen...

A nivel mundial, el accidente cerebrovascular es la segunda causa de muerte y una causa importante de discapacidad 1. La cascada de acontecimientos bioquímicos y fisiológicos que se producen durante y después de un evento agudo accidente cerebrovascular se produce rápidamente y con implicaciones para la viabilidad del tejido y en última instancia resultado 2. Cerebral por hipoxia-isquemia (HI), que conduce a la encefalopatía hipóxico-isquémica (EHI), se estima que afecta hasta el 0,3% y el 4% de los a término y prematuros nacidos, respectivamente 3,4. La tasa de mortalidad en recién nacidos con EHI es de aproximadamente 15% a 20%. En el 25% de los sobrevivientes de HIE, complicaciones permanentes surgen como consecuencia de la lesión, incluyendo retraso mental, déficit motor, parálisis cerebral y epilepsia 3,4. Intervenciones terapéuticas anteriores no han demostrado ser dignos de adopción como estándar de atención, y el consenso aún no se ha llegado a que los métodos más avanzados, basados ​​en la hipotermia, están reduciendo efectivamente la morbilidad 3,5. Otras cuestiones of contención incluyen el método de administración de la hipotermia y paciente selección 6. Por lo tanto, las estrategias de neuroprotección y neurorestoration siguen siendo un área fértil para la investigación 7. Modelos de rata de HI cerebral han estado disponibles desde la década de 1960, y posteriormente se adaptaron a los ratones 8,9. Debido a la naturaleza del modelo y la ubicación de la ligadura, hay variabilidad inherente en el resultado debido a la diferencia en el flujo colateral entre los animales 10. Como resultado, estos modelos tienden a ser más variable en comparación con modelos similares, tales como oclusión de la arteria cerebral media (MCAO). Medición en tiempo real de los cambios fisiológicos se ha demostrado con la flujometría láser Doppler, así como de difusión ponderada MRI 11. La variabilidad intra-animal que se observó en el flujo sanguíneo cerebral durante e inmediatamente después de la hipoxia, así como en los resultados agudos tales como el volumen del infarto y neurológicodéficit, sugieren que la adquisición simultánea y correlación de datos multimodales sería beneficioso. Los recientes avances en la tomografía por emisión de positrones simultánea (PET) y la resonancia magnética (MRI) han permitido nuevas posibilidades en la formación de imágenes preclínica 12-14. Las ventajas potenciales de estos sistemas híbridos, combinados para aplicaciones preclínicos se han descrito en la literatura 15,16. Mientras que muchas preguntas preclínicos pueden ser abordadas por imágenes de un secuencialmente animal individual o por imágenes de grupos de animales separados, ciertas situaciones - por ejemplo, cuando cada instancia de un evento como el derrame cerebral se manifiesta de forma única, con la rápida evolución fisiopatología - que sea conveniente e incluso necesario utilizar la medición simultánea. La neuroimagen funcional proporciona un ejemplo de ello, donde simultánea 2-desoxi-2- (18 F) fluoro-ᴅ-glucosa ([18 F] FDG) PET y Blood-nivel de oxígeno dependiente (BOLD) RM ha demostrado recientemente en la estimulación bigote rata estudia 14. Aquí, demostramos simultánea PET / RM de imagen durante el inicio de un derrame cerebral hipóxico-isquémica en la que la fisiología del cerebro no está en estado de equilibrio, pero en cambio, es rápida e irreversiblemente cambiando durante la simulación hipóxica. Los cambios en la difusión del agua, medida por resonancia magnética y cuantificados por el coeficiente de difusión aparente (ADC) derivado de imágenes de difusión ponderada (DWI), ha sido bien caracterizado para el accidente cerebrovascular en los datos clínicos y preclínicos 17,18. En modelos animales, tales como MCAO, la difusión de agua en el tejido cerebral afectado cae rápidamente debido a la cascada de la bioenergética que conduce a edema citotóxico 18. Estos cambios agudos en el ADC se observan también en modelos de roedores de isquemia cerebral por hipoxia 11,19. [18 F] FDG PET se ha utilizado en pacientes con ictus para evaluar los cambios en gl localesmetabolismo ucose 20, y un pequeño número de estudios in vivo en animales también han utilizado [18 F] FDG 21, incluido en el modelo de hipoxia-isquemia cerebral 22. En general, estos estudios muestran una disminución de la utilización de glucosa en las regiones isquémicas, aunque un estudio usando un modelo con reperfusión encontró ninguna correlación de estos cambios metabólicos con el desarrollo de miocardio posterior 23. Esto está en contraste a los cambios de difusión que se han asociado con el núcleo dañado irreversiblemente 21. Por lo tanto, es importante ser capaz de obtener la información complementaria derivada de [18 F] FDG PET y DWI de manera simultánea durante la evolución del accidente cerebrovascular, ya que es probable que el rendimiento información significativa acerca de la progresión de la lesión y el impacto de intervenciones terapéuticas. El método que describimos aquí es fácilmente susceptible de usar con una variedad de trazadores de PET y secuencias de RM. Por ejemplo, [15 O] H 2 O PETimágenes, junto con DWI y las imágenes de perfusión ponderada (PWI) de la RM puede ser utilizado para explorar aún más el desarrollo de la penumbra isquémica y validar las técnicas actuales en el campo de la imagen derrame cerebral.

<table><tbody><tr><td>Cirugía</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras quirúrgicas</td><td>Roboz</td><td>RS-5852</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>Roboz</td><td>RS-5237</td><td></td></tr><tr><td>Hartman pinza para mosquitos</td><td>Miltex</td><td>7-26</td><td></td></tr><tr><td>2x pinzas de sutura McPherson, 8,5 cm</td><td>Accurate Surgical & Scientific Instruments</td><td>4473</td><td>Es útil reducir el ancho de apertura con una banda en las pinzas utilizadas para sujetar la arteria carótida</td></tr><tr><td>6-0 sutura de seda trenzada recubierta de silicona con aguja 3/8 C-1</td><td>Covidien Sofsilk</td><td>S-1172</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de manta homeotérmica</td><td>Harvard Apparatus</td><td>507220F</td><td></td></tr><tr><td>Super glue</td><td>(Genérico)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hypoxia</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Caudalímetro para O2</td><td>Alicat Scientific</td><td>MC-500SCCM-D</td><td></td></tr><tr><td>Flómetro para N2</td><td>Alicat Scientific</td><td>MC-5SLPM-D</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de O2</td><td>MSA</td><td>Altair Pro</td><td></td></tr> Imaging 7.05 Tesla Sistema de <tr><td>resonancia</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>magnética</td><td>Bruker</td><td>BioSpec</td><td>20 cm diámetro interior del orificio con conjunto de gradiente. Software Paravision 5.1.</td></tr><tr><td>Volumen Tx/Rx 1H Bobina, 35 mm ID</td> Sistema <td>Bruker</td><td>T8100</td><td></td></tr><tr><td>PET</td> <td>(Interno)</td><td></td> <td>4x24 detectores LSO-PSAPD, 10x10 LSO array por detector, paso de cristal de 1,2 mm y 14 mm de profundidad. 14 x 14 mm PSAPD. Campo de visión: 60x35 mm. Ventana energética de 350-650 keV. Ventana de temporización de 16 nseg.</td></tr><tr><td>Canulación de vasos Pinza Dumont</td><td>Roboz</td><td>RS-4991</td><td></td></tr><tr><td>PE-10 tubo de polietileno</td><td>BD Intramedic</td><td>427401</td><td></td></tr><tr><td>bomba de infusión</td><td>Braintree Scientific</td><td>BS-300</td><td></td></tr><tr><td>Equipo de monitoreo y compuerta de animales</td><td>Small Animal Instruments Inc.</td><td>Modelo 1025</td><td>Solo se utiliza el control de la respiración</td></tr><tr><td>Cama para animales con regulación de temperatura</td> <td>(Interna)</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

simultánea de imágenes pet / rm durante cerebral del ratón hipoxia-isquemia

Simultaneous PET/MRI Imaging During Mouse Cerebral Hypoxia-ischemia

Los cambios dinámicos en la difusión del agua tisular y metabolismo de la glucosa se producen durante y después de la hipoxia cerebral en la hipoxia-isquemia reflejando una perturbación bioenergética en las células afectadas. La resonancia magnética ponderada en difusión (RM) identifica las regiones que están dañados, potencialmente irreversible, por la hipoxia-isquemia. Las alteraciones en la utilización de glucosa en el tejido afectado pueden ser detectables mediante tomografía de emisión de positrones (TEP) de 2-desoxi-2- (18 F) fluoro-ᴅ-glucosa ([18 F] FDG) captación. Debido a la naturaleza rápida y variable de la lesión en este modelo animal, la adquisición de ambos modos de datos debe realizarse simultáneamente con el fin de correlacionar significativamente datos de PET y RM. Además, la variabilidad inter-animal en la lesión hipóxico-isquémica debido a las diferencias vasculares limita la capacidad de analizar los datos multimodales y observar cambios en un enfoque de grupo de sabios si los datos no se adquiere de forma simultánea en los sujetos individuales. El método presintieron aquí le permite a uno adquirir tanto difusión ponderada RM y [18 F] FDG captación de datos en el mismo animal antes, durante y después de la simulación hipóxica con el fin de interrogar a los cambios fisiológicos inmediatos.

La Figura 1 muestra el resultado de una ligadura apropiada de la arteria carótida común, antes de cerrar la herida con sutura de seda 6-0. En este método, los datos obtenidos a partir de imágenes es altamente dependiente de la disposición temporal del experimento, que a su vez dicta y también está dictada por limitaciones experimentales incluidos los sistemas de adquisición de imágenes y la configuración del equipo. Estas y otras consideraciones se exploran más en la sección...

El método presentado aquí utiliza simultánea tomografía por emisión de positrones y la resonancia magnética. En el modelo de hipoxia-isquemia cerebral, cambios dinámicos en el metabolismo de la glucosa y de difusión se producen durante y después de la lesión. El daño en evolución e irreproducible en este modelo requiere la adquisición simultánea si los datos de imágenes multimodales significativas son a adquirir.

Simultánea de imágenes PET / RM Durante cerebral del ratón hipoxia-isquemia

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics ...

El objetivo general de este procedimiento es obtener simultáneamente datos de tomografía de emisión y resonancia magnética durante el inicio de una lesión hipóxica isquémica. Esto se logra mediante el primer ligado, la arteria carótida común unilateralmente en un ratón. El segundo paso es preparar al animal para la obtención de imágenes y adquirir los datos de referencia de PET y RM.El paso final es adquirir datos de imágenes durante y después de un desafío hipóxico. En última instancia, la adquisición simultánea de PET y RM se utiliza para demostrar cambios en la difusión del agua y en la absorción de desoxiglucosa de la gripe en la lesión durante y después de la hipoxia. Este método puede proporcionar información sobre los cambios dinámicos en la fisiología y la bioquímica durante el accidente cerebrovascular, pero también se puede aplicar en otros casos en los que el sistema que se observa no está en estado estacionario, sino que está cambiando.Prepare un campo quirúrgico estéril con las herramientas que se muestran aquí, colocadas convenientemente alrededor del exterior. Encienda la almohadilla térmica y asegúrese de que alcance los 37 grados centígrados. Antes de iniciar el pr

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Investigación

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Medicine

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Hemos desarrollado un método de traducción simultánea de imágenes de resonancia magnética funcional y de registro electrofisiológico en el cerebro de roedores, proporcionando una plataforma para la investigación de la relación entre la actividad neuronal y el nivel de oxigenación de la sangre depende de (BOLD) señal de resonancia magnética.

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De imagen no invasivas y Análisis de la isquemia cerebral en ratas vivas utilizando Tomografía por emisión de positrones con<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

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Un accidente cerebrovascular trombótico Basado En transitoria cerebral por hipoxia-isquemia Modelo

Se describe un protocolo para la estimación de tiempo de inicio de carrera en un modelo de rata de movimiento aprovechando la proyección de imagen de resonancia magnética cuantitativa (qMRI) parámetros. El procedimiento aprovecha la difusión MRI para la delineacion de la lesión de accidente cerebrovascular agudo y cuantitativa T1 y T2 (1 de qT y qT2) tiempos de relajación para la regulación del movimiento.

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Este manuscrito describe un método para grabaciones continuas de video EEG utilizando electrodos de profundidad múltiple en ratones neonatales sometidos a hipoxia-isquemia.

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Simultánea de imágenes PET / RM Durante cerebral del ratón hipoxia-isquemia

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