Name: Heterotópico cervical trasplante cardiaco en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Aprende el trasplante cardíaco cervical en ratones usando la técnica de manguito para estudiar lesión por isquemia-reperfusión y rechazo de injerto. Este método simplifica la anastomosis vascular y mejora la reproducibilidad experimental.

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M.-A. Deutsch cuenta con el apoyo de Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014), Deutsche Stiftung für Herzforschung y Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane cuenta con el apoyo de Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) y Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)

Todos los experimentos fueron aprobados por el alemán Corazón Centro de Múnich y el Gobierno de Baviera, Alemania (Gz. 55.2-1-54-2532.3-17-13). Los animales fueron alojados en una instalación específica libre de patógenos y recibieron atención humana en el cumplimiento de los &quot;Principios de Laboratorio Animal Care&quot; formuladas por la Sociedad Nacional para la Investigación Médica y de la &quot;Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio&quot; proporcionada por la Academia Nacional de Ciencias y publicado por los Institutos Nacionales de Salud (NIH Publication no. 86-23, revisado 1985). NOTA: Un conjunto completo de instrumentos de microcirugía estériles, incluyendo dos pinzas curvas y dilatadores de los vasos, es necesario para el procedimiento (Figura 2a). La profilaxis antibiótica perioperatoria no es habitualmente necesaria, pero pueden estar indicados en animales inmunocomprometidos. Los animales fueron sacrificados por inhalación de isoflurano usando terminal. Donantes de Preparación y la cosecha del injerto &lt;ol&gt; <li> Anestesiar al animal mediante intraperitoneal (ip) de inyección de midazolam (5,0 mg / kg), medetomidina (0,5 mg / kg) y fentanilo (0,05 mg / kg de peso corporal). Coloque el ratón en una posición supina en el campo operatorio y confirmar la tolerancia quirúrgica por el reflejo de retirada pedal. </li><li> Desinfectar la piel tres veces con clorhexidina y realizar una incisión abdominal en la línea media. Retraer los intestinos con una gasa húmeda a la izquierda para exponer la vena cava inferior. </li><li> Inyectar 50 UI de heparina diluida en 0,4 ml de solución salina a través de la vena cava inferior para la anticoagulación. Incisión en el vaso 1 min después de heparinización. </li><li> Abra el diafragma y realizar una toracotomía bilateral para exponer el corazón. La pared torácica anterior se refleja en sentido superior y se mantiene en su lugar con una abrazadera. </li><li> Retire el timo y sin rodeos diseccionar el tejido conectivo entre la aorta y el tronco pulmonar. Incisión en la vena cava superior derecha. </li><li> Perforar la aorta ascendente movilizado a nivel de latronco braquiocefálico con una aguja de 30 G montado en una jeringa de 5 ml y lentamente perfundir el corazón retrogradually sin una presión excesiva con 3 ml de 4 ° C solución cardiopléjica fría. Evitar la entrada de aire en la circulación coronaria. Caída de solución salina enfriada con hielo en el injerto para mejorar aún más el paro cardiaco. </li><li> Seccionar la aorta proximal al origen del tronco braquiocefálico. </li><li> Ligar la vena inferior y ambas cavas superior cerca del corazón con 8-0 seda y seccionar los distalmente a las ligaduras. </li><li> Diseccionar libre el tronco pulmonar lo más distante posible. Ligar las arterias pulmonares cerca de la bifurcación con 8-0 seda y seccionar ellos distal. </li><li> Ligar las venas pulmonares todos juntos con una sola ligadura de 8-0 seda y seccionar ellos. </li><li> Quite el corazón del donante y almacenarlo en la solución cardiopléjica helada hasta la implantación. </li></ol> 2. Destinatario Preparación <ol><li> Prepararlos puños para anastomosis cortando el tubo de poliimida con un bisturí No. 11 o una tijera bajo el microscopio. El manguito se compone de un cuerpo cilíndrico y una extensión (1/3 de la circunferencia) para la colocación de la pinza vascular, cada uno de una longitud de 1 mm (figura 2b). </li><li> Anestesiar al animal y de confirmar la tolerancia quirúrgica como se describe anteriormente. Inyectar 0,25 ml de solución salina caliente por vía subcutánea (sc) para la reposición de líquidos. </li><li> Quite el pelo de la región cervical derecha usando una máquina de afeitar eléctrica y coloque el animal en posición supina sobre una almohadilla caliente. Asegure las piernas con hebras de cinta evitando estiramiento excesivo de las extremidades anteriores, ya que puede comprometer la respiración. Cubra los ojos utilizando pomada oftálmica para evitar la sequedad. Desinfectar el sitio quirúrgico tres veces con clorhexidina. </li><li> Hacer una incisión cutánea transversal desde el ángulo mandibular derecho a la muesca yugular. </li><li> Sin rodeos movilizar a la extvena yugular ernal. Cauterizar ramas laterales con unas pinzas bipolares y seccionar ellos. </li><li> Divida la vena yugular externa entre ligaduras en el nivel de la confluencia con la vena de la glándula submandibular. </li><li> Tire de la vena yugular externa a través del manguito y ocluir el vaso proximal mediante la colocación de una pinza vascular en la extensión del manguito. Retire la abrazadera y el riego de la luz del vaso con solución salina heparinizada 01:10. </li><li> Evert la pared del vaso sobre el manguito y fijarlo con una circunferencia 8-0 ligadura de seda preestablecido. </li><li> Retire la parte superficial del músculo esternocleidomastoideo. </li><li> Movilizar a la arteria carótida común derecha y seccionar el buque entre ligaduras por debajo de la bifurcación de la carótida. </li><li> Tire de la arteria carótida a través del manguito y ocluir el vaso proximal mediante la colocación de una pinza Yasargil en la extensión del manguito. Retire la abrazadera y el riego de la luz del vaso con solución salina heparinizada 01:10. </li><li> Suavemente dilate la luz arterial con un dilatador buque, Evert la pared del vaso sobre el manguito y arreglarlo con un circunferencial 8-0 ligadura de seda preestablecido. </li><li> Para ganar espacio suficiente para la implantación del injerto, quitar el lóbulo derecho de la glándula submandibular. </li><li> Mantenga el campo quirúrgico húmedo hasta la implantación. </li></ol> 3. Implantación del injerto <ol><li> Coloque el injerto en la región cervical receptor boca abajo con la aorta orientado medialmente y la arteria pulmonar lateralmente. </li><li> Tire de la aorta del injerto sobre el brazalete con la arteria carótida y asegurar la anastomosis con una ligadura circunferencial 8-0 seda. </li><li> Incisión en el tronco pulmonar en su cara anterior y tire de ella sobre el brazalete con la vena yugular externa. Una vez más asegurar la anastomosis con una ligadura circunferencial de 8-0 seda. </li><li> Retire la abrazadera en la vena yugular externa, siguiendo por el desamarre de la arteria carótida. Los corazones se llena inmediatamente con sangre. Para mejorar reperfusion caer 37 ° C una solución salina caliente en el injerto. Normalmente, el corazón se desarrolla el ritmo sinusal en un minuto. Retire la extensión del manguito en el sitio venosa. </li><li> Asegurar la posición correcta del injerto, anastomosis deben estar libre de tensiones y buques sin torsión. No vasos cauterizados de la piel ya que esto puede afectar la cicatrización de heridas. El sangrado generalmente se detiene espontáneamente. Cierre la piel con una sutura continua única de 8-0. </li></ol> 4. Cuidado posoperatorio <ol><li> Inyectar 0,25 ml cálida sc solución salina para la reposición de líquidos. </li><li> Para antagonizar narcóticos inyectan naloxona (1,2 mg / kg), flumazenil (0,5 mg / kg) y atipamezol (2,5 mg / kg de peso corporal) sc Izquierda del animal en la almohadilla caliente hasta que se haya recuperado el conocimiento suficiente para mantener decúbito esternal. Observar al animal durante al menos una hora adicional para registrar cualquier comportamiento anormal. No devuelva un animal que se ha sometido a una cirugía para la compañía de otros animales hasta que esté completamente Recoverojo. </li><li> Proporcionar analgesia preventiva con buprenorfina (0,05 mg / kg sc tres veces por día) o una analgesia alternativa de acuerdo con un protocolo institucional local para una duración mínima de 72 horas después del procedimiento. </li><li> El cirujano y un veterinario deben ver a los animales con regularidad. En caso de pérdida de peso&gt; 15%, la apatía, la hinchazón o animales de infección lado quirúrgicos son sacrificados mediante inhalación de isoflurano terminal. </li></ol>

<ol><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).</li>
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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Hemos completado más de 200 trasplantes cardíacos con una tasa de éxito superior al 90% en varios parámetros experimentales. Con la técnica descrita aquí, el procedimiento completo se puede hacer dentro de los 60 min por un cirujano experimentado. Mediante la preparación de los vasos cervicales antes de la obtención de órganos, el tiempo total de isquemia del injerto puede ser limitado a 20 min. Tiempo para la implantación (tiempo de isquemia caliente) es significativamente más corto usando la técnica del manguito en co...

El modelo de trasplante de corazón se utiliza con frecuencia para investigar I / R-lesión, rechazo de aloinjerto, vasculopatía post-trasplante y la eficiencia de los agentes inmunomoduladores. Los modelos de ratón se combinan muchas ventajas como el inmunológico conocido y antecedentes genéticos, la disponibilidad de muchas cepas puras y transgénicos y los costos experimentales relativamente bajos. En 1973, una técnica de trasplante de corazón abdominal en ratones fue descrita por primera vez por Corry et al 1. En este modelo injertos se revascularizados antes de fin de a lado anastomosis de la aorta ascendente a la aorta abdominal del receptor y de la principal arteria pulmonar a la vena cava inferior. En 1991, una técnica de sutura para el trasplante de corazón cervical en ratones fue descrito por Chen et al 2. En este modelo una perfusión coronaria retrógrada se establece por la anastomosis de la arteria carótida del destinatario a la aorta ascendente del grpopa. Los drenajes de sangre venosa a través del seno coronario en la aurícula derecha, el ventrículo derecho y se expulsa a través de la arteria pulmonar en el receptor vena yugular externa (Figura 1). En comparación con la implantación del injerto abdominal el modelo de cuello uterino es menos invasiva y la localización superficial del injerto permite un acceso muy fácil para los exámenes de seguimiento adicionales (por ejemplo, la palpación, la ecocardiografía, la microscopía de fluorescencia intravital) 3,4. A pesar de las mejoras técnicas 5,6, un uso más generalizado de este modelo ha sido limitado debido a dificultades técnicas para realizar las anastomosis suturadas de vasos pequeños con una alta incidencia de fugas de anastomosis y la trombosis. En 1991, Matsuura et al. introdujo la técnica de manguito en la que la pared del vaso es evertido sobre un cilindro sintético, que facilita en gran medida el modelo de trasplante de corazón 7 cervical. La técnica fue further adoptado para varios modelos experimentales de trasplante renal incluyendo 8, 9 de páncreas, la integridad física 10, 11,12 hepática, pulmonar 13,14 y el trasplante vascular 15. En comparación con la técnica de sutura el tiempo requerido para las anastomosis y, por lo tanto, el tiempo de isquemia caliente es más corta y hay complicaciones vasculares significativamente menos usando la técnica del manguito 16. Además, permite a los cirujanos con poca formación en microcirugía para realizar la operación con una alta tasa de éxito. Una desventaja de la técnica del manguito es el requisito previo de la ligadura de la arteria carótida común, que puede alterar la perfusión cerebral. En este trabajo de vídeo presentamos una técnica de manguito mejorado y simplificado para el trasplante de corazón cervical en ratones.

<table><tbody><tr><td>Pinza JFC-7.2</td><td>S& T</td><td>P-00036</td><td>Punta curvada 0,20 mm</td></tr><tr><td>Dilatador de recipientes D-5a</td><td>S& T</td><td>S-00124</td><td></td></tr><tr><td>Tijera Adventita</td><td>S& T</td><td>S-00102</td><td></td></tr><tr><td>Pinza vascular B-1V</td><td>S& T</td><td>S-00396</td><td></td></tr><tr><td>Yasargil Clip</td><td>Peter Lazic</td><td>65.097</td><td>3,5 mm de longitud</td></tr><tr><td>Pinza bipolar</td><td>Micromed</td><td>148-100-011</td><td>punta 0,25 mm</td></tr><tr><td>Tubos de poliimida</td><td>River Tech Medical</td><td></td><td>19-24 galga</td></tr><tr><td>8.0 ligaduras de seda Catgut</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Custodiol solución HTK</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

heterotópico cervical trasplante cardiaco en ratones

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

El trasplante heterotópico de corazón cervical en ratones es una herramienta valiosa en la investigación cardiovascular y de trasplantes. La técnica del manguito simplifica en gran medida este modelo al evitar las difíciles anastomosis de sutura de pequeños vasos, reduciendo así el tiempo de isquemia caliente. En comparación con la implantación de injerto abdominal, el modelo cervical es menos invasivo y el injerto implantado es fácilmente accesible para exámenes de seguimiento posteriores. Las anastomosis se realizan tirando de la aorta ascendente del injerto sobre el manguito con la arteria carótida común del receptor y tirando de la arteria pulmonar principal sobre el manguito con la vena yugular externa. La selección del tamaño adecuado del manguito y la movilización completa de los vasos son importantes para el éxito de la revascularización. La lesión por isquemia-reperfusión (I/R) puede minimizarse mediante la perfusión del injerto con una solución cardiopléjica y mediante hipotermia. En este artículo, proporcionamos detalles técnicos para una técnica de manguito simplificada y mejorada, que debería permitir a los cirujanos con habilidades microquirúrgicas básicas realizar el procedimiento con una alta tasa de éxito.

Nuestro equipo podría realizar con éxito la técnica descrita después de aproximadamente 20 cirugías de formación. La parte más difícil es eversión la pared vascular de la arteria carótida sobre el brazalete, ya que fácilmente voltea hacia atrás y múltiples intentos puede conducir a la rotura de la pared. Después del período de entrenamiento, el tiempo quirúrgico total media fue de 60 ± 8 min. Se requieren alrededor de 20 minutos para la cosecha de donantes, 25 min para la preparación de los vasos cervicales y 15 minutos...

La técnica del manguito acorta y facilita el modelo de trasplante de corazón cervical heterotópico en ratones al evitar anastomosis de sutura técnicamente desafiantes de vasos pequeños. Los detalles técnicos mostrados en este video artículo deberían permitir a los investigadores establecer este modelo en sus laboratorios.

Heterotópico cervical trasplante cardiaco en ratones

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Este vídeo presenta un modelo experimental de trasplante cardíaco cervical para investigar la lesión por isquemia-reperfusión con ratones singénicos, o para estudiar el rechazo del injerto con animales alogénicos. El primer paso del procedimiento consiste en extraer el corazón del ratón donante. El injerto se almacena en solución cardiopléjica sobre hielo durante hasta cuatro horas, dependiendo de las condiciones experimentales.El siguiente paso consiste en la preparación de los vasos cervicales derechos del ratón receptor, en los que la pared del vaso de la vena yugular externa seccionada y la arteria carótida se invierten sobre una funda y se fijan con una ligadura. El último paso del procedimiento es el implante del injerto en el ratón receptor. La aorta ascendente del injerto se coloca sobre la funda junto con la arteria carótida, y el tronco pulmonar se anastomosa con la vena yugular externa.Finalmente, se retiran las pinzas y comienza la reperfusión. Normalmente, el corazón desarrolla un ritmo sinusal dentro de un minuto. En comparación con el trasplante cardíaco cervical mediante implante de injerto abdominal, el método es menos invasivo y los animales se recuperan más rápidamente.Además, al utilizar grapas para la anastomosis, se puede evitar por completo la sutura de los vasos pequeños, lo que convierte a este modelo en uno técnicamente más viable. Después de pre-sedentar al ratón con isoflurano, anestésielo mediante una inyección intraperitoneal de anestésicos y confirme la tolerancia quirúrgica verificando el reflejo de retirada del pie. A continuación, sujete firmemente al ratón en posición supina sobre el campo operatorio.Luego desinfecte la piel tres veces con clorhexidina. A continuación, realice una incisión abdominal en línea media y retraja los intestinos hacia la izquierda utilizando una gasa húmeda para exponer la vena cava inferior. Luego, inyecte en la VCI 50 unidades de heparina diluidas en 0,4 mililitros de solución salina para prevenir la coagulación.Un minuto después, incise el recipiente, abra el diafragma y realice una toracotomía bilateral para exponer el corazón, refleje la pared torácica anterior en sentido superior y sosténgala en su lugar con una pinza. A continuación, retire el timo y disecque rompiendo el tejido conectivo entre la aorta y el tronco pulmonar, incise la vena ácigos superior derecha. Luego, use una aguja de calibre 30 para perforar la aorta descendente movilizada en el tronco braquiocefálico y perfunda lentamente el corazón en sentido retrógrado utilizando tres mililitros de solución cardiopléjica fría con hielo.No aplique presión excesiva. No inyecte aire alguno. Y para potenciar aún más el paro cardíaco, gotee solución salina helada sobre el injerto.Luego, seccionar la aorta proximalmente al origen del tronco braquiocefálico y ligar las venas cavas inferior y superiores cercanas al corazón. Utilizando seda ATO, después de colocar las ligaduras, seccionar cada vaso distalmente a las ligaduras. A continuación, liberar el tronco pulmonar lo más distalmente posible y ligar las arterias pulmonares cerca de la bifurcación.Con hilo de seda también seccionar estos vasos distalmente a las ligaduras. Los últimos vasos que se deben ligar son las venas pulmonares, que pueden ligarse juntas con una sola ligadura de hilo de seda. Luego seccionar estas venas y extraer el corazón del donante.Guarde el corazón en solución cardiopléjica fría con hielo hasta que sea necesario comenzar bajo el microscopio. Prepare las cánulas para la anastomosis cortando el tubo de poliamida con tijeras o una hoja de bisturí número 11. Después de preparar al receptor para la cirugía como se hizo con el donante, administre una inyección subcutánea de 0,25 mililitros de solución salina tibia para la reposición de líquidos.A continuación, afeite el pelo de la región cervical derecha y coloque al ratón en posición supina sobre una almohadilla tibia; sujete las patas con cinta adhesiva, pero sin sobreestirar las extremidades anteriores, ya que esto podría comprometer la respiración. Luego, aplique una pomada oftálmica y desinfekte el sitio quirúrgico tres veces con varias pasadas de clorhexidina. Comience ahora la cirugía realizando una incisión transversal de la piel desde el ángulo mandibular derecho hasta la escotadura yugular.Luego movilice bruscamente la vena yugular externa y cauterice las ramas laterales con una pinza bipolar, seccionándolas. Divida la vena yugular externa entre las ligaduras en el punto donde hay una confluencia con la vena de la glándula submandibular. Una vez aislada, tire de la vena yugular externa a través del manguito.Luego, ocluya el vaso proximalmente colocando una pinza vascular sobre la extensión de la manga. Ahora retire la ligadura e irriague el lumen del vaso con una a 10 de solución salina heparinizada. Complete la fijación a la manga invirtiendo la pared del vaso sobre ella y asegurando el vaso con una ligadura de seda ose preestablecida de forma circunferencial.Ahora retire la parte superficial del músculo esternocleidomastoideo. A continuación, movilice la arteria carótida común derecha. Luego, por debajo de la bifurcación carotídea, coloque dos ligaduras y seccione el vaso entre ellas.Ahora tire suavemente de la arteria carótida a través de la manga y coloque una pinza al sobre el extremo distal de la extensión, proximal a la manga. Para ocluir el vaso, retire el ligadura e irriague la luz del vaso con una a 10 soluciones salinas heparinizadas. Luego, dilate suavemente la luz con un dilatador de vasos. Y como antes, complete la fijación del vaso sanguíneo al manguito. La parte más difícil del procedimiento consiste en invertir el vaso de la arteria canulada sobre el manguito, ya que tiende a volver fácilmente a su posición original. Por lo tanto, es importante movilizar completamente la arteria para seleccionar un tamaño de manguito adecuado y dilatar suavemente la luz del vaso antes de la inversión.Como preparación para el injerto, extirpe el lóbulo derecho de la glándula submandibular y mantenga el campo operatorio húmedo. Coloque el injerto en la región cervical receptora boca abajo, con la aorta orientada medialmente y la arteria pulmonar lateralmente. A continuación, pase la aorta del injerto sobre el manguito junto con la arteria carótida y asegure la anastomosis con una ligadura de seda 8-0 de forma circunferencial.A continuación, haga una incisión en el tronco pulmonar en su aspecto anterior y pase este sobre el manguito junto con la vena yugular externa. Utilice otra ligadura para asegurar esta anastomosis. Ahora retire el clamp de la vena yugular externa y luego el de la arteria carótida; el corazón debe llenarse rápidamente con sangre para mejorar la perfusión. Aplique solución salina tibia en goteo sobre el injerto.Normalmente, el corazón iniciará un ritmo sinusal dentro de un minuto. Ahora, retire la extensión del manguito en el sitio venoso y revise el injerto. La anastomosis debe estar libre de tensión y los vasos no deben presentar torsión alguna.No cauterice los vasos de la piel. Dado que esto podría comprometer la cicatrización de la herida, la hemorragia debe detenerse espontáneamente; cierre la piel con una sutura continua simple. Después de la cirugía, inyecte al animal un cuarto de mililitro de solución salina tibia por vía subcutánea.A continuación, inyecte subcutáneamente un cóctel de fármacos para antagonizar los narcóticos. Permita que el animal se recupere sobre una almohadilla tibia hasta que pueda mantener una recumbencia esternal. Observe al animal durante al menos una hora antes de considerarlo completamente recuperado.Una vez recuperado, el ratón debe alojarse solo durante al menos tres días. Administre analgesia durante un mínimo de 72 horas. Asimismo, pese al animal diariamente para verificar una pérdida de peso severa y supervise la salud general del animal.Utilizando el protocolo descrito, se trasplantaron ratones Black six singénicos para histopatológico. Los injertos para examinación se tiñeron con hematoxilina, eosina y rojo de congo. Se utilizaron secciones de animales no trasplantados como controles en comparación con los controles.Isquemia prolongada. La reperfusión provocó una fuerte reacción inflamatoria con edema tisular. Hiperemia con infiltración de leucocitos, indicada con estrellas, y oclusión microvascular.La intensa tinción roja mostró una marcada deposición de colágeno intersticial indicada por las flechas. Dichas deposiciones de colágeno no se observaron en los controles. Este modelo de trasplante es una herramienta interesante en la investigación cardiovascular y de trasplantes.Es especialmente útil investigar la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica antes de comenzar con los experimentos. Asegúrese de que puede realizar esta técnica con resultados operatorios reproducibles, ya que de lo contrario podría introducir un sesgo importante; por lo tanto, el tiempo de isquemia tibia debe limitarse a menos de 20 minutos.

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Investigación

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El ratón heterotópico modelo de trasplante de corazón ha sido probado por muchos investigadores como un método importante para el estudio de los mecanismos de rechazo y de la respuesta inmune. Sin embargo, las técnicas empleadas siguen siendo un reto. Mediante la modificación de las técnicas convencionales que han tenido éxito con más de 1.000 trasplantes.

El trasplante cardíaco heterotópico en ratones

El modelo de trasplante de corazón murino de cuello uterino es muy adecuado para inmunológica así como estudios de la lesión de reperfusión de isquemia. Hemos modificado el procedimiento utilizando una técnica de manguito no sutura y realizado más de 1.000 trasplantes de éxito con este enfoque.  En esto, proporcionamos detalles adicionales de esta técnica para complementar el vídeo.

Murino Cervical Trasplante Cardiaco Modelo Usando una técnica de Cuff Modificado

Se demuestra una técnica para el procedimiento microquirúrgico para el trasplante heterotópico de corazones en ratones, incluyendo métodos simplificados para la recolección de donantes y la anastomosis de los vasos receptores.

Un método modificado para heterotópico Ratón Corazón TRASPLANTE

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Aquí, describimos un modelo preclínico de gran animal (porcino) de trasplante de corazón ortotópico que ha sido firmemente establecido y utilizado para investigar nuevas estrategias cardioprotectoras.

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Una técnica nueva para la reconstrucción del circuito de sangre en un modelo abdominal heterotopic del trasplante del corazón del ratón se demuestra.

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En el presente protocolo, se utiliza un modelo de trasplante cardíaco de ratón para investigar el mecanismo del rechazo del aloinjerto cardíaco. En este modelo heterotópico de trasplante cardíaco, se mejora la eficiencia de la operación y la supervivencia de los injertos cardíacos se garantiza mediante una anastomosis cervical de extremo a extremo de la implantación cardíaca utilizando una técnica de manguito modificado.

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Los modelos de trasplante cardíaco de ratón representan valiosas herramientas de investigación para estudiar la inmunología del trasplante. El presente protocolo detalla el trasplante cardíaco cervical heterotópico de ratón que implica la colocación de manguitos en la arteria carótida común del receptor y el tronco de la arteria pulmonar del donante para permitir el flujo sanguíneo laminar.

Trasplante cardíaco cervical heterotópico de ratón utilizando manguitos vasculares

Este protocolo presenta una técnica de trasplante cardíaco heterotópico cervical sin manguito y basada en sutura, diseñada para permitir la colocación fiable de un segundo injerto cardíaco heterotópico para evaluar la tolerancia inmunitaria específica del donante bajo condiciones fisiológicas con mínima interferencia de material extraño.

Modelo cervical basado en suturas sin manguito para trasplante cardíaco heterotópico secundario con el fin de evaluar la tolerancia inmunitaria específica del donante en ratones

Este protocolo presenta una técnica simplificada de anastosis de sutura extremo a lado para el trasplante de corazón cervical murino, proporcionando un modelo robusto y reproducible para estudiar la inmunología de trasplantes.

Trasplante cardíaco heterotópico de ratón cervical utilizando la técnica de anastomosis de extremo a lado para estudiar la inmunología del trasplante

Aprende el trasplante cardíaco cervical en ratones usando la técnica de manguito para estudiar lesión por isquemia-reperfusión y rechazo de injerto. Este método simplifica la anastomosis vascular y mejora la reproducibilidad experimental.

Heterotópico cervical trasplante cardiaco en ratones

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