Name: Un método computarizado reproducible para la cuantificación de la densidad capilar utilizando periungueal capilaroscopia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 17 s
Description: Aprende a cuantificar la densidad capilar mediante capilaroscopia periungueal con un algoritmo computarizado reproducible. Este método permite evaluar la microcirculación en enfermedades cardiovasculares como hipertensión y diabetes.

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Este proyecto fue apoyado por Grant Numbers HL96593 de NIH y D56HP20783 de HRSA/ HHS. Su contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa necesariamente los puntos de vista oficiales de los NIH o HRSA / HHS.

Nota: El proceso de adquisición para la obtención de imágenes capilares ya ha sido publicado y se logra utilizando una cámara fotográfica digital con un programa informático de adquisición y análisis de imágenes correspondiente 11 21 Esta práctica de laboratorio utiliza imágenes fijas para el análisis, no vídeos, lo que simplifica la adquisición de imágenes para el análisis.. A continuación se describe la nueva técnica para cuantificar los capilares a partir de las imágenes. 1. Mejora de la imagen de proceso <ol><li> Obtener imágenes digitales con una cámara digital monocromo. Calibrar las imágenes a un objeto de tamaño conocido por tomar una foto de un objeto de longitud conocida como una regla con la cámara. Este proceso permite que el programa informático para medir y contar capilares con precisión después del procesamiento. Lo ideal para la más alta precisión, se debe utilizar una retícula (pieza científicamente fabricado de vidrio con una regla grabada en ella). Medir el número de píxeles en un cuadrado de 1 mmcaja usando un programa informático. Nota: La clave para la reproducibilidad y la normalización de este protocolo depende en gran medida de la correcta colocación de la caja 1 mm 2 que se cuenta. </li><li> Utilice herramientas de mejora de contraste para oscurecer los capilares y aclarar el fondo, lo que maximizará la visualización de los capilares. La diferenciación inicial de los capilares de fondo es importante para el cultivo adecuado de la imagen en pasos posteriores. Para ello, el ajuste de la imagen mediante un Para ello haga clic en &quot;mejor histograma en forma.&quot;: La captura, la intensidad, la imagen de histograma, mejor ajuste. </li><li> Recortar una región de interés (ROI) para el recuento capilar como una nueva imagen (seleccionar, regiones de interés). Utilice una caja de 1 mm 2, que se determinó mediante la calibración de las imágenes a 530 píxeles igualando 1 mm. compruebe que la imagen recortada coloca el ápice de las asas capilares en la parte superior de la imagen. </li><li> Aplanar la imagen para que todos los ajustes de imagen futuras se aplicarán uniformemente ala imagen. Para ello, haga clic en: Ficha proceso, filtros 2D, aplanar, intensidad BG de &quot;brillante&quot; object width a &quot;75&quot;, se aplica. </li><li> El contraste de la imagen para los capilares se visualizan al máximo. Para ello, haga clic en: ficha, pantalla ajustar, aumentar contraste con 75. </li><li> Eliminar manchas en la imagen para suavizar los bordes de los capilares haciendo clic en la pestaña de procesos, filtros 2D, despeckle, el tamaño del núcleo 7 x 7, aplique. </li><li> Finalizar el contraste de la imagen de modo capilares son de color negro y el fondo es blanco. Realice este paso ajustando el histograma para el modelo de &quot;mejor ajuste&quot;. Nota: Por favor consulte la Figura 2 en resultados representativos para un ejemplo de lo que la imagen procesada debe ser similar siguiendo estos pasos. </li></ol> 2. Realizar Condes capilares / cuantificar capilar Densidad <ol><li> En cada imagen, seleccionar manualmente una parte de un capilar bien definida mediante el featur &quot;objeto destino&quot;e para ser reconocido como objetos a ser contados por el programa. A continuación, seleccione una pequeña parte del fondo, utilizando la función de &quot;fondo&quot;, como referencia a las áreas que necesitan ser ignorado por el algoritmo de recuento. Nota: La combinación de estos destacados provoca todos los capilares a destacar sin tener en cuenta el ruido de fondo. El protocolo de cuantificación (contando) utiliza las funciones del ordenador para diferenciar partes de la imagen basada en el color y la morfología. </li><li> Utilice la función de recuento para contar al instante todos los capilares en la imagen con el equipo de imagen. Ajuste el diámetro mínimo de los objetos contados a 5 píxeles con el fin de evitar contar el ruido de fondo como capilares. </li><li> Para cada individuo, contar el promedio de 3 - 4 imágenes con el fin de obtener una evaluación más fiable. Nota: Por favor consulte la Figura 3 en resultados representativos para un ejemplo de lo que la imagen debe ser similar durante el procedimiento de recuento. </li></ol&gt; 3. Creación y uso de macros para automatizar Procesamiento de Imágenes Nota: Para ahorrar tiempo, las macros se pueden crear con el fin de realizar automáticamente una secuencia específica de los procesos en una o varias imágenes. Estas secuencias pueden ser personalizados con el fin de hacer las modificaciones de imagen más rápida. En esencia, estas macros recuerdan cómo se procesan las imágenes, y llevar a cabo todos los pasos de forma rápida y sin intervención del usuario. Realización de los recuentos en 12 imágenes capilares toma este laboratorio entre 20 a 30 min con las macros (2 a 3 min por imagen), en oposición a aproximadamente 8 min por imagen sin los macros. Por lo tanto el uso de las macros es de 3 a 5 veces más eficiente que el procesamiento manualmente cada imagen individual. <ol><li> Con el fin de crear una macro, seleccione &quot;Grabar macro&quot; y en una imagen de realizar los pasos y procesos deseados, como se describe en los pasos 1 y 2 anteriores. Nombre de la macro a partir del cual la imagen pasos de procesamiento se realizaron para referencia futura. Cuando using la macro en futuras imágenes, simplemente haga clic en &quot;macro run&quot; y el programa se aplicará automáticamente las mejoras registradas a la imagen (s) deseada. Nota: Este laboratorio utiliza una macro para realizar todos menos uno de los pasos en la Sección 1 de los métodos en unos segundos. El único paso que requiere la entrada del usuario es la elección de dónde recortar la imagen, paso 1.2. </li></ol>

<ol><li>Gronenschild, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semi-automatic+assessment+of+skin+capillary+density%3A+proof+of+principle+and+validation%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">Semi-automatic assessment of skin capillary density: proof of principle and validation.</a> Microvasc Res. 90, 192-198 (2013).</li>
<li>Allen, J., Howell, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+imaging%3A+techniques+and+opportunities+for+clinical+physiological+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Meas%22%5BJournal%5D)">Microvascular imaging: techniques and opportunities for clinical physiological measurements.</a> Physiol Meas. 35, R91-R141 (2014).</li>
<li>Boettcher, M., Gloe, T., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semiautomatic+quantification+of+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Semiautomatic quantification of angiogenesis.</a> J Surg Res. 162, 132-139 (2010).</li>
<li>Wild, R., Ramakrishnan, S., Sedgewick, J., Griffioen, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+angiogenesis+and+tumor+vessel+architecture+by+computer-assisted+digital+image+analysis%3A+effects+of+VEGF-toxin+conjugate+on+tumor+microvessel+density%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of angiogenesis and tumor vessel architecture by computer-assisted digital image analysis: effects of VEGF-toxin conjugate on tumor microvessel density.</a> Microvasc Res. 59, 368-376 (2000).</li>
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<li>Kaiser, S. E., Sanjuliani, A. F., Estato, V., Gomes, M. B., Tibirica, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antihypertensive+treatment+improves+microvascular+rarefaction+and+reactivity+in+low-risk+hypertensive+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Antihypertensive treatment improves microvascular rarefaction and reactivity in low-risk hypertensive individuals.</a> Microcirculation. 20, 703-716 (2013).</li>
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<li>Debbabi, H., Bonnin, P., Levy, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+blood+pressure+control+with+perindopril%2Findapamide+on+the+microcirculation+in+hypertensive+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Effects of blood pressure control with perindopril/indapamide on the microcirculation in hypertensive patients.</a> Am J Hypertens. 23, 1136-1143 (2010).</li>
<li>He, F. J., Marciniak, M., Markandu, N. D., Antonios, T. F., MacGregor, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+modest+salt+reduction+on+skin+capillary+rarefaction+in+white%2C+black%2C+and+Asian+individuals+with+mild+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Effect of modest salt reduction on skin capillary rarefaction in white, black, and Asian individuals with mild hypertension.</a> Hypertension. 56, 253-259 (2010).</li>
<li>Murray, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+measurement+location+on+reliability+of+quantitative+nailfold+videocapillaroscopy+in+patients+with+SSc%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">The influence of measurement location on reliability of quantitative nailfold videocapillaroscopy in patients with SSc.</a> Rheumatology (Oxford). 51, 1323-1330 (2012).</li>
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<li>Debbabi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+skin+capillary+density+in+treated+essential+hypertensive+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Increased skin capillary density in treated essential hypertensive patients.</a> Am J Hypertens. 19, 477-483 (2006).</li>
<li>Serne, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+skin+capillary+recruitment+in+essential+hypertension+is+caused+by+both+functional+and+structural+capillary+rarefaction%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Impaired skin capillary recruitment in essential hypertension is caused by both functional and structural capillary rarefaction.</a> Hypertension. 38, 238-242 (2001).</li>
<li>Shore, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillaroscopy+and+the+measurement+of+capillary+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Capillaroscopy and the measurement of capillary pressure.</a> Br J Clin Pharmacol. 50, 501-513 (2000).</li>
<li>Rieder, M. J., O'Drobinak, D. M., Greene, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+computerized+method+for+determination+of+microvascular+density%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">A computerized method for determination of microvascular density.</a> Microvasc Res. 49, 180-189 (1995).</li>
<li>Vermeulen, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+angiogenesis+in+solid+human+tumours%3A+an+international+consensus+on+the+methodology+and+criteria+of+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Quantification of angiogenesis in solid human tumours: an international consensus on the methodology and criteria of evaluation.</a> Eur J Cancer. 32A, 2474-2484 (1996).</li>
<li>Cheng, C., Daskalakis, C., Falkner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+Assessment+of+Microvascular+and+Endothelial+Function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2012).</li>
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</ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses.

Capilaroscopia periungueal se muestra prometedor como una herramienta clínicamente útil en el futuro para diversos oncología, cardiovascular, y las aplicaciones de enfermedades reumatológicas. El proceso de adquisición de imágenes es bastante consistente entre los investigadores, sin embargo, en la actualidad hay varios métodos para el procesamiento de imágenes y análisis. Métodos actualmente incluyen recuentos capilares computarizados y manuales. Conteos manuales son problemáticos, ya que son mucho tiempo, y sujeto a l...

Formación de imágenes microvascular es un campo en rápido crecimiento con muchas aplicaciones clínicas potenciales. 2 Por ejemplo, los oncólogos están utilizando formación de imágenes de los microvasos para determinar la extensión de la angiogénesis tumoral, produciendo una valiosa información sobre el estado del tumor y una visión de posibles opciones de tratamiento. 3 4 Sin embargo, capilaroscopia lecho ungueal es quizás la forma eficiente y ampliamente aplicable costo mayor parte de las imágenes microvascular. Los investigadores están utilizando el vídeo lecho ungueal capilaroscopia para estudiar las tasas de flujo de sangre e investigar la morfología capilar. 5 6 Tanto vídeo y de imágenes fijas lecho ungueal capilaroscopia están adjuntos a la atención para diagnosticar y tratar fenómeno y varias enfermedades del tejido conectivo de Raynaud, como la esclerosis sistémica. 2 Capilaroscopia periungueal tiene diversas aplicaciones cardiovasculares potenciales. La investigación actual sugiere usar lecho ungueal capilaroscopiaEse tipo diabetes mellitus 1 y Tipo 2 pacientes presentan una alta prevalencia de la morfología capilar anormal, sin embargo, tienen densidades capilares sin cambios en comparación con los individuos no diabéticos. 8.7 capilaroscopia también se ha estudiado experimentalmente en la hipertensión. Estructural rarefacción capilar que conduce a una reducción de la densidad capilar se ha demostrado en individuos hipertensos en comparación con los individuos no hipertensos. 9-10 En contraste con estos pacientes hipertensos de edad avanzada que presentan rarefacción estructurales, la investigación más reciente ha demostrado que (edad 40 y por encima de la media) pacientes hipertensos más jóvenes (media de edad menores de 40 años) tienen rarefacción funcional sin rarefacción estructural. 11 Esto sugiere que la rarefacción funcional se produce antes y puede progresar con el tiempo para rarefacción estructural. Curiosamente, los pacientes hipertensos tratados con fármacos antihipertensivos específicos como perindopril / indapamida representada normaAl densidad capilar y la función endotelial después del tratamiento, mientras que los tratados con ACE (Inhibidores de la enzima convertidora de) inhibidores o diuréticos mantiene una baja densidad capilar a pesar del control de la presión arterial comparable. 12 Esto sugiere que algunos medicamentos antihipertensivos pueden normalizar la densidad capilar invirtiendo el capilar rarefacción causado por la hipertensión. Además, otros investigadores han demostrado que una reducción en la ingesta de sal conduce a la reversión de tanto rarefacción capilar funcional y estructural en individuos hipertensos. 13 A pesar de las diversas aplicaciones clínicas potenciales de esta tecnología, hay poca estandarización de la técnica para la cuantificación de las imágenes de densidad capilar. 2 Hasta la fecha, los investigadores han encontrado que los resultados de densidad capilar son reproducibles, tanto desde el intra-observador y la perspectiva inter-observador sólo si la exacta misma área está siendo contado cada vez. 1,14 15 </sup&gt; Es de destacar que los investigadores anteriores han realizado gran parte recuentos capilares manualmente con el ojo desnudo, 9 16 17 18, que es un proceso lento y subjetiva. Algoritmos estandarizados, basados ​​informáticos para la cuantificación de las imágenes capilares teóricamente proporcionan un análisis de datos más eficiente y reproducible con menos subjetividad, lo que facilita las aplicaciones clínicas de capilaroscopia. Algunos investigadores han utilizado efectivamente los programas basados ​​en computadoras para cuantificar los datos de nailfold imágenes capilaroscópicos. 1,6 19 20 Sin embargo, sólo una publicación a la fecha describe fiabilidad de un programa de software complejo disponibles para cuantificar los datos capilaroscopia, 1 y este programa es complicado como anteriormente se ha indicado anteriormente por el requisito de contar el mismo campo visual exacto. A continuación, presentamos un protocolo sencillo y fiable para cuantificar los capilares utilizando un algoritmo estandarizado que permiteel uso de múltiples campos visuales. El uso de múltiples campos visuales no sólo simplifica el procedimiento, sino que también permite la evaluación de la variación biológica normal en el recuento capilar. El objetivo de este estudio es describir un algoritmo computarizado reproducible y eficiente, que estandariza el proceso de cuantificación capilar. Si bien estos métodos no están completamente automatizados que requieren muy poca intervención del usuario, y proporcionan la cuantificación rápida y fiable de las imágenes.

<table><tbody><tr><td>Image-Pro Premier</td><td>Media Cybernetics, Inc</td><td>9.1</td><td>Software de procesamiento de imágenes</td></tr></tbody></table>

un método computarizado reproducible para la cuantificación de la densidad capilar utilizando periungueal capilaroscopia

A Reproducible Computerized Method for Quantitation of Capillary Density using Nailfold Capillaroscopy

Capilaroscopia es una metodología no invasiva, eficiente, relativamente barato y fácil de aprender para visualizar directamente la microcirculación. La técnica capilaroscopia puede proporcionar información sobre la salud de un paciente microvascular, lo que lleva a una variedad de dermatológica potencialmente valiosa, oftalmológica, aplicaciones clínicas reumatológicas y cardiovasculares. Además, el crecimiento del tumor puede ser dependiente de la angiogénesis, que puede ser cuantificó midiendo la densidad de microvasos dentro del tumor. Sin embargo, en la actualidad existe poca o ninguna estandarización de las técnicas, y sólo una publicación a la fecha reporta la fiabilidad de unas actualmente disponibles algoritmos basados ​​ordenador y complejas para cuantificar los datos capilaroscopia. 1 En este trabajo se describe un nuevo, más simple,, algoritmo fiable recuento capilar estandarizado para cuantificar los datos capilaroscopia nailfold. Un algoritmo capilaroscopia computarizada simple, reproducible como esto facilitaría másuso generalizado de la técnica entre los investigadores y los clínicos. Muchos investigadores analizan actualmente imágenes capilaroscopia a mano, la promoción de la fatiga del usuario y de la subjetividad de los resultados. Este documento describe un nuevo, fácil de uso automatizado algoritmo de procesamiento de imágenes, además de un algoritmo de conteo semi-automatizado reproducible. Este algoritmo permite el análisis de las imágenes en cuestión de minutos, mientras que la reducción de la subjetividad; sólo una cantidad mínima de tiempo de entrenamiento (en nuestra experiencia, a menos de 1 hora) es necesario para aprender la técnica.

El objetivo de este procedimiento de procesamiento de imágenes es diferenciar los capilares a partir de la imagen de fondo para que puedan ser cuantificados con precisión. Tanto el procesamiento de imágenes y procesamiento de imágenes incompleta excesiva son perjudiciales para la capacidad del programa para cuantificar los capilares. Como se ve en la Figura 3, el procesamiento de imágenes hace que los capilares incompleta difícil de distinguir del fondo. Es crítico que el usuario sea ca...

La capilaroscopia es una metodología no invasiva, eficiente, relativamente barata y fácil de aprender para visualizar directamente los capilares en la microcirculación. Sin embargo, hasta la fecha, solo una publicación describe la fiabilidad de un complejo programa informático disponible para cuantificar los datos de la capilaroscopia. Aquí, presentamos un protocolo simple y confiable para cuantificar capilares utilizando un algoritmo estandarizado.

Un método computarizado reproducible para la cuantificación de la densidad capilar utilizando periungueal capilaroscopia

Capillaroscopy is a non-invasive, efficient, relatively inexpensive and easy to learn methodology for directly visualizing the microcirculation. The ...

El objetivo general de este procedimiento es cuantificar el número de capilares por milímetro cuadrado en el área de la piel directamente debajo de la cutícula de la uña. Esto se logra primero tomando una imagen en blanco y negro del lecho ungueal debajo de la cutícula. El segundo paso consiste en importar la imagen a un programa informático de procesamiento de imágenes.A continuación, se manipulan las imágenes para visualizar mejor los capilares; el paso final consiste en identificar y contar todos los capilares dentro de un milímetro cuadrado. En última instancia, la manipulación de imágenes se utiliza para mostrar la cantidad y la morfología de los capilares de un individuo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo cardiovascular, como cómo la hipertensión, la diabetes y otras enfermedades pueden afectar la microcirculación.Utilizando una cámara digital monocromática, obtenga imágenes capilares como se describió anteriormente. Luego, tome imágenes de calibración de una regla con marcas milimétricas utilizando la misma cámara y las mismas condiciones de aumento que se usaron para obtener las imágenes capilares. Importe la imagen de la regla al programa de imágenes del ordenador y mida el número de píxeles en una línea de un milímetro en la fotografía de la regla.Anote este número y calcule la cantidad de píxeles que hay en una región de un milímetro por un milímetro. A continuación, abra una de las imágenes de capilares, oscurezca los capilares y aclare el fondo ajustando la imagen mediante un histograma de mejor ajuste. Luego, utilice el comando crear ROI en el menú desplegable para crear una región de interés de un milímetro por un milímetro en la parte superior de la pantalla.Arrastre y coloque la región de interés en la ubicación con los lazos capilares más nítidos. Asegúrese de que la región de interés esté colocada de manera que el ápice de los lazos capilares se encuentre en la parte superior de la región. La clave para la reproducibilidad y la estandarización de esta etapa del protocolo es la colocación adecuada del cuadro de la región de interés de un milímetro cuadrado.Una buena regla general para mantener la estandarización consiste en colocar el cuadro en el ápice o la punta de los bucles capilares de la imagen. Una vez posicionado correctamente, haga clic en la ROI y luego haga clic en recortar en el menú desplegable que aparece; a continuación, aplane la imagen para que todos los ajustes posteriores de la imagen se apliquen de manera uniforme. A continuación, aumente el contraste de la imagen a 75 para que los capilares se visualicen al máximo.También elimine el ruido de la imagen para suavizar los bordes de los capilares. Defina el contraste de la imagen ajustando el histograma al modelo de mejor ajuste, de modo que los capilares sean negros y el fondo blanco. En cada imagen, seleccione manualmente una parte de un capilar bien definido utilizando la función de objeto objetivo para que sean reconocidos como objetos que el programa debe contar.Luego, seleccione una pequeña parte del fondo utilizando la función de fondo como referencia para las áreas que deben descartarse por el algoritmo de conteo. Establezca el diámetro mínimo de los objetos contados en cinco píxeles para evitar contar el ruido de fondo como capilares. A continuación, utilice la función de conteo para contar instantáneamente todos los capilares en la imagen de cada individuo.Cuente el promedio de tres a cuatro imágenes para obtener una evaluación más confiable. Para ahorrar tiempo, cree una macro para realizar automáticamente una secuencia específica de procesos en una o más imágenes seleccionando primero la opción de grabar macro y luego nombrando la macro según los pasos y procesos realizados y descritos en este video. A continuación, realice los pasos de manipulación de la imagen mientras la macro está grabando.Al utilizar la macro en imágenes futuras, simplemente haga clic en ejecutar macro y el programa aplicará automáticamente las mejoras grabadas a las imágenes deseadas. El único paso que requiere intervención del usuario es seleccionar dónde recortar la imagen. Una imagen procesada de forma óptima puede contarse en 30 segundos y distingue claramente los capilares del fondo, así como los capilares individuales entre sí.La imagen final mejorada se muestra aquí. El recuento total determinado para esta imagen fue de 54 capilares por milímetro cuadrado. Una vez dominada, esta técnica puede utilizarse para cuantificar y manipular 12 imágenes en menos de 20 minutos.

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Describimos la evaluación de un coeficiente de determinación entre la densidad de vasos y perfusión del plexo capilar superficial parafoveal para identificar la contribución de vasos mayores que los capilares a la densidad de perfusión.

Evaluación de la contribución capilar y de otros vasos a la densidad de perfusión macular medida con angiografía por tomografía de coherencia óptica

Este artículo describe un ensayo de tinción de lectina bien establecido y reproducible para las preparaciones retinianas de montaje completo y los protocolos necesarios para la medición cuantitativa de los parámetros vasculares frecuentemente alterados en las retinopatías proliferativas y no proliferativas.

Cuantificación de parámetros vasculares en retinas de monte entero de ratones con retinopatías no proliferativas y proliferativas

Las enfermedades cardiovasculares son la principal causa de muerte en todo el mundo. La calcificación vascular contribuye sustancialmente a la carga de morbilidad y mortalidad cardiovascular. Este protocolo describe un método simple para cuantificar la precipitación de calcio mediada por células del músculo liso vascular in vitro mediante imágenes fluorescentes.

Un método biológico semiautomatizado y reproducible para cuantificar la deposición de calcio in vitro

La capilaroscopia es una herramienta accesible para la visualización directa, económica y no invasiva de la microvasculatura. El objetivo de este protocolo es permitir a los investigadores utilizar la capilaroscopia para la visualización de la morfología microvascular periférica en los lechos ungueales de ratones.

Visualización no invasiva de la morfología microvascular del lecho ungueal en ratones mediante capilaroscopia

Aprende a cuantificar la densidad capilar mediante capilaroscopia periungueal con un algoritmo computarizado reproducible. Este método permite evaluar la microcirculación en enfermedades cardiovasculares como hipertensión y diabetes.

Un método computarizado reproducible para la cuantificación de la densidad capilar utilizando periungueal capilaroscopia

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