Name: Técnicas de Manga Gástrica y modificación de Roux-en-Y bypass gástrico en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-20T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 5 s
Description: Aprende técnicas de manga gástrica y bypass Roux-en-Y en ratones para estudiar efectos metabólicos y mecanismos moleculares en obesidad y diabetes. Este método simula resultados clínicos humanos.

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Agradecemos a Gilles Mithieux y Aude Barataud (INSERM U1213, Lyon, Francia) y a Marie Liabeuf y Stephanie Lemarchand-Minde (Animalario, l'Institut du Thorax, Nantes, Francia) por su ayuda con el protocolo de cuidado de los animales. Este trabajo contó con el apoyo de subvenciones de La région des Pays de la Loire, la Fondation d'Avenir y el Casden Bank. Nos gustaría agradecer a Catherine Postic, Fadila Benhamed y Michelle Caüzac de l'institut Cochin por su hospitalidad y su ayuda durante el proceso de filmación.

Y alojamiento de animales: Obtener C57BL / 6 ratones machos de 8 semanas de edad. A las 10 semanas de edad, dar a los ratones C57BL / 6 libre acceso al agua y una dieta alta en grasas (DIO dieta: 35% kcal de la grasa, el 25,8% de caseína, 1,30% AIN mineral, 1,30% de vitaminas, 1,70% de fosfato dicálcico, 0,7 carbonato% de calcio, 2,10% citrato de potasio, 0,026% bitartrato de colina, un 8,9% de sacarosa, 0,384% cistina, 6,5% de celulosa, el 31,7% de manteca de cerdo, aceite de soja 3,3%, y 16.29% de maltodextrina) de 8 (SG) o 14 (BGYR) semanas antes de la cirugía bariátrica. Para promover el aumento de peso, dar a los ratones dedicada a la cirugía DGYR (farsa y DGYR) agua que contiene 20% de fructosa (w / v), además de la dieta alta en grasas. Ética Declaración: Todos los pasos del protocolo se describen a continuación sigue las directrices del Comité de Ética de Experimentación Animal de Pays de la Loire bajo el número de homologación de 01.953,01. 1. Preparación preoperatoria general <ol><li> Ayunar a los ratones durante 6 h antes de la cirugía. Gel diy se le dio comida de 3 días antes de la cirugía y exclusivamente un día antes de la cirugía. Inducir la anestesia en una cámara con 5% de isoflurano (0,4 L / min) y O 2 (dioxígeno; 0,4 L / min). Realizar una prueba de dedo del pie-pellizco para confirmar que la anestesia es eficaz. Administrar analgésicos (0,1 mg / kg de buprenorfina), antibióticos (10 mg / kg marbofloxacine), y pro-cinética (1 mg / kg de metoclopramida) a través de inyecciones subcutáneas. </li><li> Asignar un área de trabajo específica para los procedimientos quirúrgicos (distantes de los fans de tráfico de laboratorio y de ventilación). Limpiar la zona quirúrgica con desinfectantes de superficies duras reservados. Coloque una almohadilla térmica en el área de espacio de trabajo para mantener homeotermia ratón durante la cirugía. Aplicar una almohadilla inferior absorbente y limpia sobre el cojín eléctrico. </li><li> Afeitarse el abdomen desde el esternón hasta la pelvis usando una máquina de afeitar eléctrica. Envolver el abdomen del ratón en una envoltura de plástico esterilizada (Figuras 1A y 2A) y colocar el puntero del ratón en la posición supina sobre el calentamiento panuncio. </li><li> Aplique un ungüento veterinario en los ojos para evitar la sequedad, mientras que bajo anestesia. Coloque el ratón en el cono de la nariz y mantener la anestesia con isoflurano al 2% (0,4 L / min) y O 2 (0,4 L / min). </li><li> Antes de comenzar la cirugía, se puso una bata estéril examen, una gorra batas desechables, mascarillas y guantes estériles. Abrir un paquete de autoclave que contiene un conjunto instrumento quirúrgico esterilizado, que se requiere para todos los pasos de la cirugía. Cortar una ventana en la envoltura de plástico esterilizada y desinfectar la piel con 2 soluciones sucesivas de povidona-yodo. </li></ol> 2. Manga Gástrica: Procedimiento quirúrgico <ol><li> Laparotomía media (Figura 1B) <ol><li> Bajo un microscopio binocular y con un escalpelo, realizar una incisión en la línea media desde el esternón hasta la mitad del abdomen para abrir la cavidad abdominal (no dañar los músculos abdominales). Proteger la piel con una compresa estéril empapada con solución salina C 37 °. </li></ol></li><li> La exposición del estómago (Figura 1C) <ol><li> movilizar suavemente el estómago utilizando hisopos de algodón humedecido. Liberar el estómago de sus laterales estrechos adjuntos tejido conectivo utilizando hisopos de algodón humedecidos o micro tijeras. </li><li> Suavemente, externalizar el estómago completamente y colocar un colágeno hemostático comprimir detrás del estómago. Suturar el píloro y vasos esófago a lo largo de la curvatura mayor del estómago con 8,0 suturas no absorbibles para evitar futuras hemorragia (Figura 1D y E). Nota: El uso hemostático puede inducir daño tisular, asegúrese de utilizar solamente en los tejidos que tienen como objetivo ser resecados. </li></ol></li><li> Resección de la región cardiaca del estómago (fondo) <ol><li> Realizar una gastrotomía en la línea anatómica presente entre la región pilórica (corpus) y la región cardiaca de estómago (fondo) (Figura 1F). </li><li> Retire el alimento residual con 2 hisopos de algodón humedecidos hacia cada unolado del estómago. El uso de micro tijeras, corte el estómago a lo largo de la frontera entre el fundus y el corpus del estómago (Figura 1G). </li><li> Presione un colágeno hemostático comprimir durante 2 minutos en caso de hemorragia grave. Cerrar la abertura del estómago con 8,0 suturas no absorbibles de la unión gastro-esofágico hasta el final de la incisión (Figura 1H). </li></ol></li><li> La resección de la región pilórica del estómago (corpus) <ol><li> Completar la resección del estómago a lo largo de la curvatura mayor con el fin de eliminar aproximadamente 80% del estómago (Figura 1I). Estandarizar el ancho de la SG a 3 mm. Presione un colágeno hemostático comprimir durante 2 minutos en caso de hemorragia grave. </li><li> Cerrar la abertura de la región pilórica del estómago con 8,0 sutura no absorbible (Figura 1J). rodar suavemente 2 hisopos de algodón humedecidos hacia cada lado del estómago para asegurar que la sutura es a prueba de fugas. </li><li>Completar con 8,0 puntos de sutura no absorbibles en caso de fuga. Retire las compresas de colágeno hemostáticos y devolver el estómago a la cavidad abdominal. Deja un colágeno hemostático comprimir contra la sutura. </li></ol></li><li> cierre abdominal <ol><li> Cierre la capa muscular de la pared abdominal con 5,0 suturas no absorbibles (Figura 1C). Reducir la anestesia mediante la reducción de la concentración de isoflurano al 1%. Cierre la piel con 5,0 suturas no absorbibles (Figura 1 l). </li></ol></li></ol> 3. Roux-en-Y bypass gástrico: Procedimiento quirúrgico <ol><li> laparotomía media <ol><li> Bajo un microscopio binocular y con un escalpelo, realizar una incisión en la línea media desde el esternón hasta la mitad del abdomen para abrir la cavidad abdominal (no dañar los músculos abdominales). Proteger la piel con una compresa estéril empapada con 37 ° C una solución salina (Figura 2B). </li></ol> &lt;/ Li&gt; <li> Asa biliopancreática y asa alimentaria <ol><li> Exteriorizar el intestino (Figura 2C). Medida 8 cm del píloro y realizar dos ligaduras del intestino con 5,0 suturas no absorbibles (Figura 2D). </li><li> Cortar el intestino entre las dos ligaduras (Figura 2E). Coloque la extremidad proximal de los dos extremos en el cuadrante superior izquierdo del abdomen. Nota: Esto se utiliza como el asa alimentaria (Figura 2F). </li><li> Coloque la extremidad distal de los dos extremos que se enfrenta el asa alimentaria 6 cm por debajo de la extremidad proximal (Figura 2F). NOTA: Este será utilizado como el miembro biliar. </li></ol></li><li> Yeyuno-yeyunostomía <ol><li> Cortar tanto la extremidad proximal y el bucle de intestino utilizando micro tijeras y realizar dos incisiones antimesenteric de la misma longitud (Figura 2G y 2H). </li><li> Realizar lado a lado anastomosis con dos 8,0Las suturas no absorbibles. Realizar la anastomosis lado dorsal primero (Figura 2I), seguida de la anastomosis lado ventral (Figura 2J). </li><li> rodar suavemente 2 hisopos de algodón humedecidos hacia cada lado de la anastomosis para garantizar que la sutura es a prueba de fugas. Completar con 8,0 puntos de sutura no absorbibles en caso de fuga. </li></ol></li><li> Gastro-yeyunostomía <ol><li> movilizar suavemente el estómago utilizando hisopos de algodón humedecidos. Liberar el estómago de sus laterales estrechos adjuntos tejido conectivo utilizando hisopos de algodón humedecidos o micro tijeras. </li><li> Suavemente, exteriorizar el estómago completamente, la colocación de un re-absorbible colágeno hemostático comprimir detrás del estómago. Realizar una ligadura del píloro utilizando una sutura no absorbible 5.0 pasado a través del epiplón utilizando pinzas micro curvas (Figura 2K y 2L). </li><li> Cortar tanto en el lado ventral del estómago, 1,5 cm desde el píloro, y la extremidad distalutilizando micro tijeras, creando dos incisiones de la misma longitud (Figura 2 M). </li><li> Realizar la anastomosis de lado a lado con dos 8,0 suturas no absorbibles. Comience con la anastomosis lado dorsal (Figura 2 N), y luego realizar la anastomosis lado ventral (Figura 2O). rodar suavemente 2 hisopos de algodón humedecido hacia cada lado de la anastomosis para garantizar que la sutura es a prueba de fugas. Completar con 8,0 puntos de sutura no absorbibles en caso de fuga. </li></ol></li><li> cierre abdominal <ol><li> Cierre la capa muscular de la pared abdominal usando 5,0 suturas no absorbibles (Figura 2P). Reducir la anestesia mediante la reducción de la concentración de isoflurano al 1%. Cierre la piel utilizando 5.0 suturas no absorbibles (Figura 2Q) .Administer 25 ml / kg de solución salina caliente a través de la inyección subcutánea. </li></ol></li></ol> 4. general Cuidado posoperatorio <ol><li> Deja de isofluranoy continuar con un flujo de O2 de 0,8 l / min hasta que el ratón está totalmente despierto. No deje desatendido el ratón hasta que recupera el control motor, indicado por la partida de los animales a moverse alrededor de la jaula y ser capaz de ponerse de pie y caminar sin caerse. </li><li> Coloque el ratón (sólo un ratón por jaula) en una incubadora bajo condición de temperatura de 30 ° C durante 5 días. </li><li> Mantener hierro (0,5 mg / kg / día; inyección subcutánea) y vitamina (800 mg / 180 ml en agua) supplementations en los ratones DGYR hasta el final del protocolo. </li><li> Devolver el libre acceso a la dieta gel de alimentos (dieta con gel de alto contenido de grasa: 10% de manteca de cerdo, azúcar líquido al 10%, el 57% de agua) durante 5 días después de la cirugía. Reintroducir una dieta sólida de 3 días después de la cirugía. </li><li> Por vía subcutánea inyectar buprenorfina (0,1 mg / kg, dos veces al día, desde el día 0 al día 3 después de la cirugía), meloxicam (1 mg / kg, desde el día 0 al día 3 después de la cirugía), la metoclopramida (1 mg / kg, desde el día 0 a 5 días después de la cirugía), y marbofloxacine (10 mg / kg, desde el día 0 hasta el día 3 faet<html> cirugía r). </li></ol> 5. La evaluación postoperatoria metabólico Parámetros <ol><li> Medición de la ingesta de alimentos <ol><li> Permitir que los ratones se recuperen durante 1 semana después de la cirugía. Casa los ratones uno por jaula. Medir la cantidad de dieta sólida colocado en la jaula. El peso de los alimentos restantes 24 h más tarde. Repita este paso todo el tiempo necesario. </li></ol></li><li> Test oral de tolerancia a la glucosa <ol><li> Ayunar a los ratones durante 6 horas antes del bolo oral. Cosecha de una gota de sangre de la punta de la cola y aplicarlo sobre una tira de glucosa insertado en un glucómetro para determinar el valor de glucosa en sangre 0 tiempo. </li><li> Administrar un bolo oral de solución de D-glucosa 20% (2 g / kg). Medir los niveles de glucosa en sangre a los 15, 30, 60, y 120 minutos después de la alimentación forzada. </li></ol></li><li> El análisis del nivel de hemoglobina <ol><li> El uso de un sistema de hematología, medir 20 l de sangre fresca para probar el nivel de hemoglobina. </li></ol></li></ol>&quot;&gt; 6. La eutanasia <ol><li> Anestesiar a los ratones por vía intraperitoneal inyección de una solución de xilazina / quetamina (10/80 mg / kg). Realizar una dislocación cervical. Verificar la eutanasia completa, garantizando que el corazón no late y se pierde el reflejo de parpadeo globo ocular. </li></ol>

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<li>Seyfried, F., Lannoo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roux-en-Y+gastric+bypass+in+mice--surgical+technique+and+characterisation%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+surgery%22%5BJournal%5D)">Roux-en-Y gastric bypass in mice--surgical technique and characterisation.</a> Obesity surgery. 22 (7), 1117-1125 (2012).</li>
</ol>

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

Para superar la creciente epidemia de obesidad, los primeros procedimientos de cirugía bariátrica surgieron en la década de 1960 en los Estados Unidos. Desde entonces, el número de procedimientos realizados en todo el mundo cada año aún aumentar, y hoy en día, estas técnicas representan la mejor opción terapéutica para el tratamiento de la obesidad mórbida 6. Entre los procedimientos desarrollados, SG y DGYR son los dos métodos más populares utilizados en la práctica clínica 4.<...

La pandemia mundial de la obesidad y la diabetes es devastador en gravedad. Más de dos mil millones de adultos en todo el mundo (30% de la población) tienen sobrepeso (IMC&gt; 25 kg / m 2) u obesidad (IMC&gt; 30 kg / m 2) 1. Esto puede venir junto con las complicaciones metabólicas, como la diabetes tipo 2, hipertensión y dislipidemia, lo que lleva a un aumento de la morbilidad y la mortalidad. La obesidad aumenta la mortalidad global y la prevalencia de cáncer 2. Debido a la falta de tratamientos no invasivos eficaces, la cirugía bariátrica representa la única opción que puede conducir a largo plazo, la pérdida de peso sostenida 3, 4. Un número de diferentes métodos quirúrgicos se han desarrollado, pero la gastrectomía en manga (SG) y el bypass gástrico Roux-en-Y (BGYR) son los dos procedimientos más utilizados en la práctica clínica. Durante el procedimiento de SG, 80% del volumen inicial del estómago esremoto; Por lo tanto, esta técnica es una de las cirugías restrictivas que mejora la sensación de saciedad. El BGYR es una de las técnicas restrictivas-malabsorción. Durante DGYR, se crea una pequeña bolsa gástrica (1-2% del volumen gástrico total) y el intestino se reordena en una forma de Y, lo que retrasa la digestión y la absorción de nutrientes. Estas dos técnicas conducen a una reducción significativa del peso corporal y la mejora general de las comorbilidades asociadas con frecuencia (por ejemplo, la hipertensión, la diabetes tipo 2 y dislipidemia) 3, con una mayor eficiencia se ve en DGYR. Sin embargo, los mecanismos moleculares detrás de los efectos beneficiosos pleiotrópicos de las cirugías bariátricas a menudo no están completamente aclarada. Debido a las numerosas cepas genéticamente modificadas disponibles, un modelo de ratón es el modelo animal más conveniente para explorar estos mecanismos moleculares. Sin embargo, los procedimientos bariátricos son difíciles de adaptar directamente a los pequeños modelos animales y requirE High destreza quirúrgica. Mientras SG se puede realizar fácilmente en roedores con una muy buena tasa de supervivencia, DGYR es letal en ratones debido a las obstrucciones intestinales graves 5. Se han propuesto diferentes técnicas de BGYR modificados para contrarrestar este problema, en particular el oesojejunostomy 5. A continuación, presentamos otra alternativa: la gastroyeyunostomía sin extirpación del estómago. Este DGYR modificado reproduce la mayor parte de los efectos beneficiosos observados en los seres humanos (es decir, una reducción de peso corporal significativa y una mejora de la glucosa y de lípidos homeostasis). Este manuscrito tiene como objetivo resumir y discutir los detalles técnicos y experimentales de SG y DGYR en ratones y facilitar estos procedimientos con la ayuda de vídeos. Se hará un destacado específica con respecto a la optimización de los protocolos sanitarios preoperatorios y postoperatorios que permiten la reducción de las vitaminas y de hierro.

<table><tbody><tr><td><fuerte>Medicamentos</fuerte></td>Dieta alta en grasas Dieta DIO Seguro Isoflurano Forano Baxter Buprenorfina Buprecare Animalcare Marbofloxacina Marbocyl Vetoquinol Citrato de <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> hierro amonical, vitaminas PP-B12 Fercobsang <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Vetoquinol</td><td></td></tr><tr><td>Vitaminas A-D3-E-K-B</td><td>Vita Rongeur</td><td>Virbac</td><td></td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>NaCl 0,9%</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidone</td><td>solución Betadine Scrub</td><td>Betadine</td><td></td></tr><tr><td>Povidone solución</td><td>Betadine Solución</td><td>Betadine</td><td></td></tr><tr><td>Carboptol 980 NF</td><td>Ocrygel</td><td>TVM</td><td></td></tr><tr><td>Name </td><td>Referencias</td><td>Company</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Suturas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prolene&reg;</td><td>8.0, 6,5 mm</td><td>Ethicon</td><td></td></tr><tr><td>Prolene&reg;</td><td>5.0, 13 mm</td><td>Ethicon</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Referencias</td><td>Empresa</td><td>Comentarios</td></tr><tr><td>Equipos quirúrgicos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras</td><td>FST</td><td></td>Portaagujas <td></td></tr><tr><td></td><td>Olsen-Hegar</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>Micro tijeras</td><td>Vannas</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>Micro pinzas&nbsp;</td><td>Graefe</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>Micro pinzas</td><td></td><td></td> curvadas Graefe FST <td></td></tr><tr><td>Micro portaagujas curvado</td><td>Castroviejo</td><td>FST</td><td></td></tr><tr><td>Compresa de colágeno hemostático</td><td>Pangen</td><td>Urgo</td><td></td></tr><tr><td>Almohadillas absorbentes</td><td>VWR</td><td></td>NameReferencias</td></tr><tr><td></td><td></td><td>>Empresa</td><td>Comentarios</strong</td></tr><tr><td>>Equipos específicosSistema de</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>hematología&nbsp;</td><td>Hemavet 950FS</td><td>Hemavet</td><td></td></tr><tr><td>Tiras de glucosa y glucómetro</td><td>Un toque Verio</td><td>Life scan</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio estereoscópico</td><td>MZ6</td><td>Leica&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

técnicas de manga gástrica y modificación de roux-en-y bypass gástrico en ratones

Techniques of Sleeve Gastrectomy and Modified Roux-en-Y Gastric Bypass in Mice

La obesidad es un importante problema de salud pública, con una prevalencia de 4 a 28% para los hombres y 6.2 a 36.5% para las mujeres en Europa (de 2003 a 2008). La obesidad mórbida se asocia con frecuencia a complicaciones metabólicas, como la diabetes tipo 2, hipertensión y dislipidemia, la reducción de la esperanza de vida y la calidad. En la ausencia de tratamientos no invasivos eficaces, la cirugía bariátrica es una valiosa opción terapéutica para los pacientes con obesidad mórbida (índice de masa corporal (IMC)&gt; 40 kg / m 2), que conduce a largo plazo, la pérdida de peso y la mejora de las complicaciones metabólicas sostenida . Sin embargo, los mecanismos celulares y moleculares subyacentes que sostienen los efectos beneficiosos de la cirugía bariátrica aún no se entienden completamente. Debido a las numerosas cepas genéticamente modificadas disponibles, el modelo de ratón es el modelo animal más conveniente para explorar los mecanismos moleculares detrás de los efectos beneficiosos pleiotrópicos de la cirugía bariátrica. A continuación, detallamos la Healthc optimizadoson métodos y protocolos quirúrgicos en los ratones de los dos cirugías bariátricas más ampliamente utilizados: la manga gástrica y el bypass gástrico Roux-en-Y modificada. Descifrar los mecanismos moleculares que subyacen a los efectos terapéuticos de la cirugía bariátrica ofrece la promesa de la identificación de nuevas dianas terapéuticas.

Condiciones generales El tiempo operatorio para el procedimiento de SG fue de 49,3 ± 1,5 min. Hemos eliminado 62,8 ± 5,0 mg de estómago, lo que representa alrededor del 80% por ciento del estómago. Sin ratones murieron durante la cirugía o durante los siguientes siete días. Un ratón (7,1%) murieron en el 11 º día postoperatorio debido a una obstrucción gástrica causada por un bezoar. <p class="j...

La cirugía bariátrica es la forma más eficiente de reducir el peso corporal y las complicaciones metabólicas mortales (diabetes, obesidad y dislipidemia) frecuentemente asociadas con la obesidad mórbida. Los modelos murinos de cirugía bariátrica representan un activo único para descifrar los mecanismos moleculares detrás de los efectos beneficiosos de estas cirugías sobre la diabetes, la hipertensión y la dislipidemia.

Técnicas de Manga Gástrica y modificación de Roux-en-Y bypass gástrico en ratones

Obesity is a major public health issue, with a prevalence of 4 to 28% for men and 6.2 to 36.5% for women in Europe (from 2003 to 2008). Morbid obesity is ...

El objetivo general de estas intervenciones quirúrgicas es medir los efectos metabólicos de la gastrectomía en manga y la derivación en Y de Roux en un modelo de ratón. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en los campos de la obesidad y el metabolismo sobre la vía del mecanismo molecular involucrado en las ganancias metabólicas observadas después de la cirugía bariátrica. La principal ventaja de estas técnicas es que estimulan las consecuencias clínicas de la cirugía bariátrica, tal y como se observa en pacientes humanos en un modelo de ratón.Para una gastrectomía en manga, después de confirmar el nivel apropiado de anestesia con un pellizco en los dedos de los pies, aplique ungüento en los ojos del ratón y use una maquinilla de afeitar eléctrica para afeitar el abdomen desde el esternón hasta la pelvis. Cubra el abdomen con una envoltura de plástico y coloque al animal en posición supina sobre la almohadilla térmica. Corta una ventana en la envoltura de plástico y desinfecta la piel con una solución de povidona yodada.A continuación, coloque al animal bajo un microscopio binocular y utilice un bisturí para hacer una incisión en la línea media de la piel desde el esternón hasta la mitad del abdomen. A continuación, proteja la piel con una compresa estéril empapada con solución salina a 37 grados centígrados, y utilice bastoncillos de algodón para movilizar suavemente el estómago, liberando el órgano de las uniones laterales del tejido conectivo cercano para permitir su completa exteriorización. Coloque una compresa hemostática de colágeno detrás del órgano reflejado.A continuación, utilice suturas 8.0 no absorbibles para ligar los vasos del píloro y el esófago a lo largo del estómago con una mayor curvatura, seguida de una gastrotomía en la línea anatómica entre las regiones pilórica y cardíaca del estómago. Use dos hisopos de algodón humedecidos para eliminar cualquier residuo de comida de cada lado del estómago. A continuación, utilice microtijeras para cortar el estómago a lo largo del límite entre el fondo y el cuerpo, y cierre la abertura del estómago con 8,0 suturas no absorbibles desde la unión gastroesofágica hasta el final de la incisión.Completar la resección del estómago a lo largo de la curvatura mayor para eliminar aproximadamente el 80% del estómago, aplicando una compresa de colágeno hemostático según corresponda. Cierre la abertura de la región pilórica del estómago con otra sutura no absorbible 8.0 y enrolle suavemente dos hisopos de algodón humedecidos hacia cada lado del estómago para confirmar que la sutura es a prueba de fugas. Retire las compresas de colágeno hemostático de la cavidad abdominal y devuelva el estómago a su posición natural, dejando una compresa de colágeno hemostático contra la sutura.A continuación, utilice suturas no absorbibles 5.0 para cerrar la capa muscular de la pared abdominal y la piel. Para un bypass gástrico en Y de Roux, haga una incisión en la línea media de la piel desde el esternón hasta la mitad del abdomen, protegiendo la piel con una compresa estéril empapada con solución salina a 37 grados centígrados. Exterioriza el intestino y mide ocho centímetros desde el píloro.Usando suturas 5.0 no absorbibles, coloque dos ligaduras en el intestino a cada lado de la marca de ocho centímetros y corte el tejido entre las suturas. A continuación, coloque la extremidad proximal del tejido en el cuadrante superior izquierdo del abdomen y la extremidad distal frente a la extremidad alimentaria seis centímetros por debajo de la extremidad proximal. Con ayuda de unas microtijeras, corte tanto la extremidad proximal como el asa intestinal, y realice dos incisiones antimeentéricas de la misma longitud.A continuación, utilice dos suturas no absorbibles 8.0 para realizar una anastomosis de lado a lado, colocando primero la anastomosis del lado dorsal y seguida de la anastomosis del lado ventral. Enrolle suavemente dos hisopos de algodón humedecidos hacia cada lado de la anastomosis para confirmar que la sutura es a prueba de fugas y exteriorice cuidadosamente el estómago como se acaba de demostrar. Coloque una compresa de colágeno hemostático reabsorbible detrás del órgano y use micropinzas curvas para pasar una sutura no absorbible 5.0 a través del epiplón para ligar el píloro.Cortar el lado ventral del estómago a 1,5 centímetros del píloro y la extremidad distal, creando dos incisiones de la misma longitud, seguidas de una anastomosis de lado a lado dorsal a ventral con dos suturas 8.0 no absorbibles. Confirme que la sutura no tenga fugas. A continuación, cierre la capa muscular de la pared abdominal y la piel con 5,0 suturas no absorbibles, y administre 25 mililitros por kilogramo de solución salina tibia mediante inyección subcutánea.Cuando el ratón se haya recuperado completamente de la anestesia, coloque al animal solo en una jaula en una incubadora a 30 grados centígrados durante cinco días con suplementos diarios de hierro y vitaminas y analgesia y acceso libre a alimentos dietéticos en gel durante los dos primeros días. Al tercer día después de la cirugía, reintroducir alimentos sólidos en la dieta del animal. Se observa una mejora progresiva de la tasa de supervivencia postoperatoria a lo largo del protocolo, lo que indica que se requiere un entrenamiento quirúrgico intensivo para dominar la técnica quirúrgica bariátrica malabsortiva restrictiva o RYGB.La gastrectomía en manga y los ratones RYGB demuestran una pérdida de peso significativa 14 días después de la cirugía en comparación con los animales de control simulados. La ingesta diaria de alimento de los animales se reduce en más de un tercio durante el período de 14 días después de la gastrectomía en manga, mientras que este efecto anorexígeno no se observa entre los ratones simulados y los ratones RYGB. Los animales también muestran una mejor tolerancia a la glucosa después de ambos tipos de cirugía.Además, la anemia severa que se observa en los ratones RYGB mejora con la suplementación con hierro hasta 28 días después de la cirugía. Una vez dominadas, estas técnicas se pueden completar en menos de 50 minutos para la gastrectomía en manga y en 90 minutos para el bypass gástrico en Y de Roux, si se realizan correctamente. Al intentar estos procedimientos, es importante recordar que los procedimientos de atención preoperatoria y postoperatoria son casi tan importantes como la técnica quirúrgica.Después de estos procedimientos, se pueden realizar otros métodos, como la cirugía de derivación biliar, para responder preguntas adicionales sobre el papel predictivo de los ácidos biliares en los efectos de la cirugía bariátrica. Después del desarrollo, estas técnicas allanaron el camino para que los investigadores en el campo de la obesidad, la diabetes, la hipertensión y la dislipidemia expusieran un mecanismo de función metabolitaria beneficiosa en ratones de tipo salvaje y modificados genéticamente. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar la cirugía bariátrica en el modelo de ratón.

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