Name: La cuantificación histológica de miocardio infarto crónico en ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 45 s
Description: Aprende a cuantificar histológicamente el infarto de miocardio crónico en ratas mediante muestreo sistemático y análisis de imágenes de secciones teñidas con tricromo. Esta técnica permite evaluar el tamaño del infarto y el remodelado ventricular izquierdo con precisión.

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El estudio fue apoyado por la Fundación Nacional Suiza [SNF 310030-149986 a MNG], la Universidad de Friburgo y el Hospital de Friburgo.

Todos los animales recibieron atención humanitaria de conformidad con la Convención Europea de los Animales. Los procedimientos quirúrgicos se realizaron de conformidad con la Ley de Protección de Animales de Suiza después de obtener el permiso de la Oficina Veterinaria del Estado, Friburgo, aprobado por la Oficina Veterinaria Federal Suizo, Suiza. 1. La recolección del corazón NOTA: Todas las intervenciones quirúrgicas se realizaron bajo anestesia con isoflurano. Se hicieron esfuerzos para disminuir el sufrimiento de los animales. En particular, todos los animales recibieron una inyección subcutánea de 0,1 mg / kg de buprenorfina pre-anestesia. El protocolo quirúrgico para la inducción de infarto de miocardio se ha descrito previamente en otra parte 13. <ol><li> Realizar una esternotomía en un animal myocardially infartado bajo anestesia (animal intubado, 2,5% de isoflurano, la anestesia adecuadas confirmados por la pata reflejo pellizco). <ol><li> Abra el animal por el corte de la piel y luego los músculoscon tijeras quirúrgicas. Cortar las costillas en la izquierda y la derecha, y luego quitar el pecho. </li><li> Retire las adherencias que quedan después de la cirugía anterior (LAD ligadura). Cortar la aorta y quitar el corazón. Ponga el tejido en KCl 1 M (en PBS), y luego se lava con PBS. </li></ol></li></ol> 2. Preparación del tejido <ol><li> Poner el corazón infartado longitudinalmente en una matriz de corazón de rata acrílico. Mantenerlo a -20 ° C durante 1 hora. </li><li> Cortar el corazón directamente en la matriz usando una hoja de afeitar con una transversal. Asegúrese de que cada porción es de 2 mm de espesor. Cortar aproximadamente 5-7 diapositivas para cada corazón (basado en el nivel de remodelación); esto se denomina muestreo sistemático. </li><li> En este paso, la realización de la tinción de cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC) es opcional (mantener la orientación de la base-vértice rebanadas del corazón). <ol><li> Incubar en 1% TTC en PBS durante 50 min a 37 ° C. Incubar en 4% de paraformaldehído (PFA) durante 20 min a 1 hr. Ponga las secciones entrn dos placas de vidrio con espaciadores de 2 mm y tomar fotografías con un microscopio estéreo lógico junto con una cámara en 15 aumentos. ¡PRECAUCIÓN! Paraformaldehído es tóxico. </li></ol></li><li> La congelación de diapositivas (1 opción st) <ol><li> Ponga cada diapositiva en un molde de plástico (10 x 10 x 5 mm) con medio para cryotomy (temperatura de corte óptima, OCT) de montaje, mantener la orientación (coloque el lado orientado al ápice de la sección hacia abajo en el fondo del molde). Congelar los bloques con los vapores de 2-metilbutano en nitrógeno líquido refrigerante durante 10 - 15 min. Por último, almacenar el tejido a -80 ° C. </li></ol></li><li> Paraffinization (2 ª opción) <ol><li> Colocar cada diapositiva de la incrustación de cassettes (mantener la orientación colocando el lado orientado ápice de la sección hacia abajo en la parte inferior de la casete) y luego en PFA al 4% durante 24 horas. Póngalo en una máquina durante la noche procesador de tejidos. <ol><li> Incubar en etanol al 70% durante 2 horas. Incubar en etanol 95% durante 2 horas. Incubar en etanol 100% durante 3 horas. Incubar en xilol durante 4 horas. Incubar en parafina (fundido a 60 ° C en un horno) durante 5 hr. Por último, hacer bloques mediante la incorporación de cada diapositiva corazón en parafina. </li></ol></li></ol></li></ol> 3. Masson-Goldner Trichrome tinción <ol><li> Hacer secciones de tejido de los bloques de parafina con un microtomo manual (grosor: 5 m) o de bloques de OCT con un criostato se establece en -18 ° C (espesor: 7 m). </li><li> Manchar una diapositiva de cada parte del corazón de cada rata (3 - 4 secciones transversales por diapositiva) con Masson-Goldner tricrómico tinción (véase el anexo). NOTA: Empezar desde este paso para las secciones de parafina. <ol><li> Fundir las diapositivas a 60 ° C en un horno. Bajo una campana extractora, ellos Desparafinar en xilol dos veces durante 10 minutos cada uno. Rehidratan en 100% de etanol, 95% de etanol, 70% de etanol, y agua destilada durante 3 min cada uno. NOTA: Empezar desde este paso para la sección criogénicas. </li><li> Fijarlos en Bouin solución durante la noche. Entonces, enjuagarlos con agua corriente del grifo durante 10 - 15 min. Enjuague con agua destilada. Incubarlos en hematoxilina de Mayer durante 3 min. </li><li> Retire las diapositivas y dejarlas en agua destilada durante 5 minutos. A continuación, se incuba en ácido fucsina-Ponceau para 5 min. Enjuague en ácido acético al 1% durante 1 min. </li><li> A continuación, los incuban en ácido fosfomolíbdico Naranja G durante 1 minuto. Enjuagarlos en ácido acético al 1% durante 1 min, incubarlos en tinte de color verde claro durante 10 minutos, y enjuague en ácido acético al 1% durante 1 min. </li><li> Deshidratar en 70% de etanol (30 seg), 95% de etanol (30 seg), y 100% de etanol (5 min). Ponga una gota de medio de montaje de resina en las secciones de tejido, los cubren con cubreobjetos, y dejarlos secar. </li></ol></li></ol> Análisis de tamaño 4. infarto <ol><li> Adquirir una imagen de cada portaobjetos en un microscopio estereoscópico (ampliación 15X) acoplado con una cámara. Fotografiar una regla con el mismo ajustes. </li><li> Utilice el software de análisis de imagen para medir el grosor de la cicatriz en el medio del infarto, el espesor del tabique, el área de la cavidad del ventrículo izquierdo (VI), el área de infarto, y la zona de tejido LV usando. <ol><li> Establecer la escala con la imagen regla (Figura 1A). <ol><li> Haga clic en mediciones después seleccione Establecer factor de conversión. Dibuje una línea en la barra de calibración. Haga clic derecho sobre la imagen y haga clic en la calibración final. Tenga en cuenta el valor de la barra y, a continuación, haga clic en Aceptar. </li></ol></li><li> Seleccione la LV de la foto del corazón manchado (Figura 1B). Utilice la herramienta de segmento múltiple. Seleccione el punto por punto y LV, haga clic derecho Copiar / pegar en cualquier lugar. </li><li> Medir el grosor de la cicatriz y el tabique con la función única medición segmento (Figura 1C </strong&gt;). </li><li> Detectará automáticamente el LV cavidad, infarto, y las zonas de baja tensión utilizando la herramienta de medición de área automático en modo RGB (Figura 1D). <ol><li> Haga clic en la herramienta. Sólo Bordes y activar Contigua en el modo RGB. Por último, haga clic dentro del área de interés para detectarlo. Si es necesario, utilizar herramientas de precisión. </li></ol></li></ol></li><li> Calcular el tamaño del infarto como la relación entre el área de infarto al área LV. </li><li> Calcular el índice de expansión de la siguiente manera: [área de la cavidad LV / toda la zona LV] / [grosor del infarto / grosor del septo], con toda la zona LV incluyendo tanto la cavidad del VI y zonas de tejido LV. </li><li> Por último, el cálculo de un &quot;promedio&quot; de cada corazón de la siguiente manera: [promedio de índice de expansión de las diapositivas infartados] * [Número de diapositivas infartados / Número total de diapositivas]. </li></ol>

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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Los pasos críticos dentro del Protocolo tejido fibrótico puede evaluarse con precisión en un modelo de rata MI crónica utilizando muestreo sistemático del corazón y de la imagen cosechada análisis de secciones histológicas-tricromáticas manchado obtenidos a partir de la base al ápice. Dos pasos son especialmente importantes para el éxito de la implementación del protocolo. En primer lugar, el uso de KCl para la recolección del corazón permite que el músculo cardíaco se mante...

El infarto de miocardio (IM) es una causa principal de muerte y discapacidad en todo el mundo. La enfermedad coronaria es la causa principal; MI resulta de la isquemia consecutiva a eventos coronarios tales como oclusión. Cuando la reperfusión no se realiza dentro de las primeras 6 horas, la isquemia induce necrosis miocárdica irreversible. En los pacientes, la caracterización de MI se apoya en diferentes herramientas de diagnóstico, incluidos los signos clínicos, la electrocardiografía, la evaluación de los niveles plasmáticos de biomarcadores, ecocardiografía, resonancia magnética y análisis histológicos 1. MI aguda y crónica se clasifican como dos fases diferentes de lesión de acuerdo con la temporización de la necrosis del miocardio en relación con el momento de la oclusión coronaria. La fase aguda, que se producen durante los primeros 7 días, se asocia con la pérdida de cardiomiocitos, inflamación extensa, y el reclutamiento de fibroblastos. La fase sub-aguda, caracterizada por la cicatrización del tejido cardiaco y la formación de una cicatriz, se produceentre 1 y 4 - 6 semanas. La expansión del infarto, adelgazamiento de la pared del ventrículo, y dilatación del ventrículo caracterizan la fase crónica. Amplia remodelación del ventrículo izquierdo da lugar progresivamente en la insuficiencia cardíaca grave 2. MI permanente inducido por la arteria descendente anterior izquierda ligadura (LAD) representa el modelo estándar de roedores de infarto de miocardio crónico. Los imitadores de ligadura coronaria de la oclusión coronaria. El tamaño del infarto depende del sitio de la ligadura. Caracterización de la lesión isquémica del miocardio en un modelo de roedor se realiza clásicamente utilizando los niveles plasmáticos de biomarcadores, como la troponina I y T 3, ecocardiografía, resonancia magnética, y la histología 4,5. los niveles de biomarcadores se correlacionan con el grado de muerte de los cardiomiocitos. La ecocardiografía evalúa el deterioro de la función ventricular izquierda como resultado de alteraciones de la contractilidad regional. Además, las técnicas de imagen no invasivas, como la resonancia magnética o de alta resoluciónecocardiografía, permite la evaluación de la reducción de la motilidad, el volumen de la zona de la cicatriz con una reducción de la perfusión y el miocardio viable y el adelgazamiento de la pared. LV dimensiones permiten la evaluación precisa del tamaño del infarto. Por último, la cuantificación de miocardio viable y muertos se puede realizar usando postmortem manchas específicas de cortes histológicos de corazones cosechadas y permite la verificación del tamaño del infarto (IS). Otra característica importante es la evaluación del índice de expansión del infarto (EI) 6. La IE está asociada con el infarto transmural y se inicia dentro de los primeros 3 días. La EI se caracteriza por una reducción progresiva del espesor de pared, un aumento en el tamaño de la cavidad LV, y los consiguientes cambios en la forma del LV. Con el fin de evaluar la eficacia terapéutica de nuevos tratamientos - en particular, las estrategias de regeneración basada en células, matrices, y el gen de evaluación entrega precisa de MI en roedores es de suma importancia.Cuando se mide en una sola sección transversal obtenida a nivel del músculo papilar, el tamaño se puede estar sesgado debido a la gran variabilidad que existe en el desarrollo del infarto después de la ligadura LAD; el infarto ápice puede ser entonces occulted. Es importante destacar que las metodologías más precisa el tamaño MI determinado se han descrito para los ratones o ratas de 7-9 10. Sin embargo, IS es insuficiente para cuantificar con precisión la remodelación del VI o reducciones terapéuticamente inducidos (o prevenciones) de la remodelación. De hecho, ¿se expresa habitualmente como un porcentaje del volumen total del VI evaluada en secciones transversales del corazón. Aunque este método es válido para IM agudo, el adelgazamiento de la pared del VI se producen durante la remodelación permanece bajo-evaluado 11,12. Una cuantificación morfométrica completa del tamaño del infarto y los cambios estructurales debe cuantificar varios parámetros, tales como longitudes endocárdicos y epicárdicos y diámetros, así como el infarto y las zonas sanas. Se describe un apr metodológicaoach para evaluar con precisión MI y remodelación en un modelo de rata crónica.

<table><tbody><tr><td>Matriz acrílica de corazón de rata 2 mm</td><td>72-5015</td><td>Harvard Appartus</td><td></td></tr><tr><td>Inspira ventilador avanzado controlado por volumen</td><td>Harvard Apparatus 557058</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Catéter Insyte 14 G</td><td>BD</td><td>381267</td><td></td></tr><tr><td>O.C.T</td><td>BDHA361603E</td><td>VWR</td><td></td></tr><tr><td>TTC</td><td>T8877-10G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Mayer hematoxilina</td><td>MHS32-1L</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Ácido Fucsina CI 42685</td><td>F8129-50G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Ponceau Xilidina CI 16150</td><td>P2395-25G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Naranja G CI 16230</td><td>O3756-100G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Verde claro CI 42095</td><td>L5382-25G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>P9333-500G</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Xylol</td><td>10315083</td><td>HoneyWell</td><td></td></tr><tr><td>Etanol absoluto</td><td>10303990</td><td>HoneyWell</td><td></td></tr><tr><td>2-metilbutano</td><td>M32631-1L</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio estereoscópico</td><td>SM2800</td><td>Nikon</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehído</td><td>99340</td><td>Reactolab</td><td></td></tr><tr><td>Casete de inclusión</td><td>K113.1</td><td>Carl Roth</td><td></td></tr><tr><td>Bersoft Software</td><td></td> de medición de imágenes <td>Bersoft.com</td><td>Software con licencia</td></tr></tbody></table>

la cuantificación histológica de miocardio infarto crónico en ratas

Histological Quantification of Chronic Myocardial Infarct in Rats

El infarto de miocardio se define como la muerte de los cardiomiocitos debido a una isquemia prolongada; una respuesta inflamatoria y la formación de cicatrices (fibrosis) siguen a la lesión isquémica. Tras la fase aguda inicial, la remodelación crónica del ventrículo izquierdo (VI) modifica la estructura y la función del corazón. La ligadura coronaria permanente en pequeños animales ha sido ampliamente utilizada como modelo de referencia para un modelo crónico de IM. El adelgazamiento de la pared infartada evoluciona progresivamente a fibrosis transmural. La evaluación histológica del tamaño del infarto se realiza comúnmente; Sin embargo, falta una estandarización de los métodos de cuantificación. De hecho, aspectos metodológicos importantes, como el número de secciones analizadas y los métodos de muestreo y cuantificación, generalmente no se describen y, por lo tanto, impiden la comparación entre investigaciones. Con demasiada frecuencia, la cuantificación se realiza en una sola sección obtenida a nivel de los músculos papilares. Debido a que se están investigando nuevas estrategias destinadas a reducir la expansión y remodelación del infarto, existe una necesidad importante de estandarizar protocolos precisos de muestreo cardíaco. Describimos un método preciso para cuantificar el tamaño del infarto utilizando un muestreo sistemático de corazón de rata recolectado y análisis de imágenes de secciones histológicas teñidas con tricrómata obtenidas desde la base hasta el ápice. También aportamos evidencias de que el cálculo del índice de expansión (IE) permitió evaluar el tamaño del infarto, teniendo en cuenta los cambios del ventrículo izquierdo a lo largo de la remodelación.

Seis semanas después de la ligadura de LAD, los corazones se recogieron de ratas Lewis. secciones de tejido de 2 mm se obtuvieron de vértice a la base. Un procedimiento de tinción de TTC se realizó para visualizar el área de infarto, que aparece en blanco, y el miocardio sano, que aparece en rojo (Figura 2). Dependiendo del sitio de la ligadura de la LAD, el tamaño del infarto varía. Para grandes MI, se observaron infartos transmurales desde el vértice a la base ...

La evaluación post-mortem del infarto de miocardio (IM) en roedores se basa en la cuantificación del infarto en secciones de corazón teñidas. Describimos un método preciso para cuantificar el tamaño del infarto utilizando el muestreo sistemático de corazones de rata recolectados desde la base hasta el ápice y análisis de imágenes de secciones histológicas teñidas con tricrómicos.

La cuantificación histológica de miocardio infarto crónico en ratas

Myocardial infarction is defined as cardiomyocyte death due to prolonged ischemia; an inflammatory response and scar formation (fibrosis) follow the ...

El objetivo general de este procedimiento histológico es realizar la cuantificación morfométrica del índice de expansión del infarto y de los parámetros estructurales del corazón utilizando un modelo de rata con infarto de miocardio, con el fin de evaluar el tamaño del infarto y la remodelación del ventrículo izquierdo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo cardíaco, como el efecto de la terapia regenerativa tras un infarto de miocardio o nuevas estrategias dirigidas a reducir la expansión del infarto. La principal ventaja de esta técnica es el uso de un muestreo sistemático del corazón de rata recolectado para evaluar con precisión el tamaño del infarto y tener en cuenta los cambios del ventrículo izquierdo durante la remodelación.Seguir este método puede proporcionar información sobre el tamaño del infarto en un modelo crónico de ratas con infarto de miocardio. También puede aplicarse a ratones u otros modelos isquémicos, como el infarto agudo de miocardio o la isquemia-reperfusión. Para comenzar este procedimiento, realice una esternotomía en un animal con infarto de miocardio bajo anestesia.Realice una incisión en la piel y los músculos a lo largo del esternón con tijeras quirúrgicas. Luego, corte las costillas a la izquierda y a la derecha para retirar el tórax. Después, elimine las adherencias que quedan tras la ligadura de la arteria descendente anterior (LAD).Corte la aorta y retire el corazón, luego coloque el tejido en PBS con cloruro de potasio uno molar durante menos de un minuto antes de lavarlo con PBS. Para preservar el tejido, el PBS dentro de los ventrículos debe eliminarse cuidadosamente. Posteriormente, transfiera el corazón infartado a una matriz acrílica para corazón de rata y colóquelo en posición longitudinal.Luego, manténgalo a menos 20 grados Celsius durante una hora. Para el muestreo sistemático después de una hora, corte el corazón directamente en la matriz utilizando una cuchilla de afeitar. Asegúrese de que cada sección tenga dos milímetros de grosor.A continuación, realice la tinción con TTC incubando las secciones en TTC al 1% durante 15 minutos a 37 grados Celsius, luego incúbelas en PFA al 4% durante 20 a 60 minutos a temperatura ambiente. Posteriormente, coloque las secciones entre dos placas de vidrio con separadores de dos milímetros y tome imágenes con un microscopio estereológico acoplado a una cámara a 15x de aumento. Se realizó un procedimiento de tinción con TTC para visualizar el área de infarto, que aparece en blanco, y el miocardio sano, que aparece en rojo.Para una infarto de miocardio extenso, se observaron infartos transmurales desde el ápice hasta la base. Los infartos más pequeños presentaron tejido infartado blanco visible desde el ápice hasta la sección media del corazón. Para infartos pequeños no transmurales, se observó tejido fibrotico en solo una o dos secciones desde el ápice.Para congelar las secciones, coloque cada sección en un molde de plástico con medio de montaje para criomicrotomía y coloque el ápice hacia abajo en el molde. Congele los bloques con vapores de 2-metilbutano bajo enfriamiento con nitrógeno líquido durante 10 a 15 minutos. Posteriormente, almacene los tejidos a menos 80 grados celsius.Para la parafinización, coloque cada sección en una caja de inclusión con el ápice orientado hacia la parte inferior, luego mantenga las cajas en PFA al 4% durante 24 horas. Posteriormente, colóquelas en un procesador de tejidos durante la noche. Una vez finalizado el procesamiento, prepare bloques incluyendo cada sección cardíaca en parafina.En este procedimiento, prepare secciones de tejido de 5 micrones de grosor a partir de los bloques de parafina utilizando un microtomo manual. A continuación, tiña un portaobjetos de cada sección cardíaca de cada rata con la tinción tricrómica de Masson-Goldner. Para las secciones de parafina, derrita los tejidos a 60 grados celsius en una estufa.Bajo una campana extractora, desparafine con xilol dos veces durante diez minutos cada vez. Luego, rehidrate con etanol al 100 %, etanol al 95 %, etanol al 70 % y, finalmente, agua destilada durante tres minutos cada uno. Para las secciones desparafinizadas y para las secciones criostáticas, fíjelas en solución de Bouin durante la noche.La mañana siguiente, enjuágelos con agua corriente del grifo durante 10 a 15 minutos, luego vuelva a enjuagar con agua destilada. La fijación con Bouin es el paso más importante para garantizar una tinción Goldner espléndida. Incúbuelos en hematoxilina de Mayer durante tres minutos.Después de tres minutos, retire los portaobjetos y déjelos en agua destilada durante cinco minutos. Posteriormente, incúbelos en fucsina ácida de ponceau durante cinco minutos antes de lavarlos con ácido acético al 1% durante un minuto. A continuación, incube las secciones en ácido fosfomolíbdico naranja g durante un minuto y luego lávelas con ácido acético al 1% durante un minuto.Incubar en colorante verde claro durante diez minutos y luego enjuagar en ácido acético al 1% durante un minuto. Finalmente, deshidratar los cortes en etanol al 70% durante 30 segundos, etanol al 95% durante 30 segundos y etanol al 100% durante cinco minutos secuencialmente. Aplicar una gota de medio de montaje resinoso sobre los cortes de tejido, cubrirlos con cubreobjetos y dejarlos secar.En este paso, adquiera una imagen de cada portaobjetos utilizando un microscopio estereoscópico acoplado a una cámara con un aumento de 15x. Fotografíe una regla con los mismos ajustes. Se cortaron secciones delgadas de cinco micrones de cada corte cardíaco y se tiñeron con tricrómico de Masson-Goldner.Los tejidos sanos aparecieron en rojo y el tejido conectivo en verde. A continuación, utilice el software de análisis de imágenes para medir el grosor de la cicatriz en la parte media del infarto, el grosor del tabique, el área de la cavidad del ventrículo izquierdo, el área del infarto y el área del tejido del ventrículo izquierdo. Para ello, establezca la escala con la imagen de la regla.Haga clic en mediciones y seleccione establecer factor de conversión. Dibuje una línea sobre la barra de calibración. Haga clic derecho en la imagen y haga clic en finalizar calibración.Observe el valor de la barra y luego haga clic en Aceptar. Utilice la herramienta de segmentos múltiples para seleccionar el punto del VI paso a paso y luego haga clic derecho y pegue en cualquier lugar. Después de eso, mida el grosor de la cicatriz y del tabique utilizando la herramienta de medición de segmento único. Luego, detecte automáticamente la cavidad del VI, el infarto y las áreas del VI utilizando la herramienta de medición de área automática en modo RGB.Active solo los bordes y contiguos en el modo RGB. Finalmente, haga clic dentro del área de interés para detectarla. A continuación, calcule el tamaño del infarto como la relación entre el área del infarto y el área del ventrículo izquierdo (LV).Luego, calcule el índice de expansión utilizando esta fórmula. Finalmente, calcule un promedio para cada corazón utilizando la fórmula mostrada. El índice de expansión calculado a partir de la tinción de Goldner es un buen indicador para evaluar el desarrollo del infarto.Como se muestra en la figura, se correlaciona con el tamaño del infarto expresado como porcentaje del ventrículo izquierdo y con la fracción de eyección medida mediante ecocardiografía. En las gráficas se representan la regresión lineal y los intervalos de confianza del 95 %. El índice de expansión del infarto se calculó según se describe en la fórmula aquí.El área total del VI se midió como la suma del área de la cavidad del VI y el área del tejido del VI. El porcentaje del infarto se calculó como se muestra. La función se evaluó a las seis semanas posteriores a la ligadura de la ADA mediante una ecocardiografía de alta resolución.Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar un muestreo sistemático del corazón y cómo evaluar el tamaño del infarto basándose en un análisis de imagen de cortes teñidos.

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Investigación

JoVE Journal

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