Estímulo del nervio cavernoso y grabación de la presión intracavernosa en una rata

Los objetivos generales de este método son describir una técnica quirúrgica simplificada de canulación de pene para el registro de la presión intracavernosa y la disección y aislamiento del nervio cavernoso para la electroestimulación. Este protocolo experimental se puede utilizar para estudiar la fisiopatología de la disfunción eréctil y probar nuevas terapias. La principal ventaja de esta técnica es que es reproducible, rápida y fiable.

Ha abordado y eliminado los principales escollos descritos en este tutorial. Aunque este método puede proporcionar información sobre la disfunción eréctil, el aislamiento del complejo de electrodos nerviosos con pegamento de silicona biocompatible es aplicable a la electroestimulación de cualquier nervio periférico, lo que permite realizar pruebas fisiológicas de otros órganos. Para comenzar este procedimiento, después de anestesiar al animal, afeitar la mitad inferior de su abdomen y perineo.

Frote al animal con alcohol al 70% y povidona yodada tres veces alternativamente. Después de eso, coloque a la rata en una almohadilla quirúrgica caliente en posición supina. Aplique ungüento en los ojos y mantenga a la rata anestesiada a través de un cono nasal con 2,5% de isoflurano.

Luego, realice todo el procedimiento quirúrgico bajo un microscopio quirúrgico en un paño. Posteriormente, realice una incisión en la piel de un centímetro cinco mililitros lateral a la línea media comenzando a nivel de la base del pene y extendiéndose hacia abajo. Use un hisopo para separar cuidadosamente la fascia lateral al escroto.

Después de diseccionar la fascia, use un par de retractores para retirar los bordes de la piel y el testículo y localizar la tuberosidad isquiática mediante la palpación con un hisopo con punta de algodón. Diseccionar a través del tejido adiposo medialmente hasta que el músculo isquiocavernoso sea visible. Use un par de pinzas para separar el músculo longitudinalmente y exponer la túnica albugínea.

La túnica albugínea aparecerá como una estructura de color blanco brillante. Después de la calibración de la configuración del sistema, inserte el tubo a través de la piel del perineo, asegurándose de que corra paralelo al pene crus. Luego, deje la vía en su lugar y mantenga la incisión húmeda con solución salina.

En este procedimiento, haga una incisión de dos centímetros en la línea media abdominal inferior a través de la piel. Cree una incisión a juego a través de la fascia a lo largo de la línea alba para exponer la vejiga y la próstata. Utilice los retractores para lograr una buena exposición.

Luego, use hisopos con punta de algodón para separar la próstata del tejido adiposo. Ajustar los retractores y completar la disección hasta obtener una visualización clara del MPG y CN corriendo en la cara lateral dorsal de la próstata. Después de localizar el MPG y el CN, haga una incisión cuidadosa en la fascia que recubre el nervio de dos a cinco milímetros distal al MPG.

A continuación, extienda el tejido a cada lado del nervio y debajo de él para liberar una porción de cuatro milímetros de largo y luego deslice una sutura debajo del nervio. Elevar ligeramente el nervio con la ayuda de la sutura para facilitar la colocación de los ganchos del electrodo bipolar alrededor del nervio. Deje que un asistente mezcle el pegamento de silicona de dos componentes con la punta de una aguja de insulina durante cinco segundos.

Seca el nervio y aplica el pegamento en el área alrededor de los ganchos y el nervio. Mantenga el nervio elevado tirando ligeramente del electrodo durante aproximadamente un minuto para permitir que el pegamento se seque. A continuación, retire los retractores, a excepción de los retractores del lado derecho para evitar que el electrodo se tire o se tuerza.

Posteriormente, humedezca los órganos expuestos con solución salina y coloque una gasa empapada en solución salina sobre la incisión. En este procedimiento, restaure la visualización de la túnica albugínea utilizando retractores. Asegúrate de no colocar los retractores en el músculo isquiocavernoso, ya que distorsionará el músculo

A continuación, coloque la aguja en el tubo de PE50 y enjuague el tubo con solución salina heparinizada antes de introducirla en la túnica albugínea. Mantenga la túnica albugínea estirada y sostenga el músculo suprayacente distal hasta el punto de inserción con su mano dominante. Luego, sostenga la aguja en su mano no dominante e introdúzcala en el cuerpo cavernoso.

Enjuague la línea para confirmar la colocación correcta en los cuerpos cavernosos sin fugas. La inserción de la aguja en el cuerpo cavernoso para el registro de la presión constituye un paso crítico. Al desplegar la aguja en el crus, es importante que el crus esté estirado y que la aguja se despliegue paralelamente a su curso.

Enjuague el tubo y presione los crus para probar la línea. Asegúrese de que no haya fugas. Después de eso, sujete el tubo a la mesa con cinta adhesiva para evitar tirones accidentales de la línea.

A continuación, retire los retractores. Configure los parámetros en un estimulador y aplique la estimulación durante 50 segundos con un mínimo de un minuto de descanso entre estimulaciones. Esta figura muestra una primera respuesta disminuida con una estimulación de 50 milímetros de mercurio, a la que le sigue la segunda y tercera estimulación de 66 milímetros de mercurio.

Luego, las mediciones posteriores se registraron en el nivel normal a 73 milímetros de mercurio. Y aquí se muestra la estabilidad de los resultados utilizando este protocolo con 10 estimulaciones consecutivas entre 75 y 78 milímetros de mercurio. Esta figura muestra las dosis efectivas de anestesia sobre la presión intracavernosa.

Se observó una respuesta disminuida y más fluctuante al aumento de isoflurano en comparación con la respuesta estable al 2% en las dos primeras y las tres últimas estimulaciones. El trazo azul en la parte superior muestra la presión arterial principal constante. Esta figura muestra el efecto del tipo de anestesia sobre la presión intracavernosa.

Las estimulaciones iniciales realizadas bajo anestesia con isoflurano mostraron un aumento de presión de 80 milímetros de mercurio. Una vez que se administró fentanilo midazolam, hubo un aumento en respuesta a 110 milímetros de mercurio. Esta figura demuestra el efecto de la administración de oxígeno a través del cono de la nariz.

La interrupción de la administración de oxígeno a través del cono de la nariz resultó en una reducción significativa en el aumento de la presión cavernosa con la estimulación del nervio cavernoso. No se observó ningún efecto sobre la presión arterial principal. Una vez dominado y si se realiza correctamente, este procedimiento se puede completar en 30 minutos.

Al realizar las estimulaciones, es importante recordar que tanto el tipo como el nivel de anestesia y oxigenación tienen un gran impacto en la presión intracavernosa. Siguiendo este procedimiento, se pueden probar diferentes agentes para responder preguntas relacionadas con la fisiopatología de la disfunción eréctil y la introducción de nuevos tratamientos. Después de ver este video, debe tener una comprensión profunda de cómo realizar la estimulación del nervio de la cánula, incluido el aislamiento del electrocomplejo nervioso con pegamento sellador y el registro de la presión intracavernosa después de la disección y canulación mínimamente invasivas de las partes cavernosas.