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DOI: 10.3791/56829-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a surgical procedure to create a reliable animal model of cochlear implantation using guinea pigs. It aims to facilitate research on pharmaceutical interventions and electrode performance in preserving hearing thresholds.
El objetivo de este protocolo es proporcionar un modelo animal de implantación coclear, que puede utilizarse para tratar una multitud de preguntas de investigación. Las aplicaciones potenciales incluyen la evaluación de las intervenciones farmacéuticas o estimulación eléctrica para efectos beneficiosos sobre los umbrales de audición o impedancias de electrodos.
El objetivo general de este procedimiento quirúrgico es proporcionar un modelo animal fiable y versátil de implantación coclear utilizando el conejillo de indias. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de los implantes cocleares, como si las intervenciones farmacéuticas o los electrodos recientemente desarrollados proporcionan efectos beneficiosos sobre la preservación de la audición residual o las impedancias de los electrodos. La principal ventaja del conejillo de indias es el rápido acceso al oído interno relativamente grande, lo que da como resultado un modelo animal seguro, confiable y versátil de implante coclear.
Para este procedimiento, es importante tener un microscopio quirúrgico, un taladro, una placa calefactora y un oxímetro de pulso colocados alrededor del experimentador para facilitar el manejo durante la cirugía. Ajuste la almohadilla térmica a 38 grados centígrados. Siga la técnica estéril.
Póngase un gorro, mascarilla y guantes. A continuación, coloque las herramientas quirúrgicas esterilizadas para la implantación coclear. A continuación, prepare una pieza de alambre de oro con aislamiento de teflón de 3,5 centímetros de largo quitando con cuidado tres milímetros de aislamiento de un extremo y cinco milímetros de aislamiento del otro extremo.
A continuación, corte un segundo trozo de alambre de oro de 2,5 centímetros de largo y retire cinco milímetros de aislamiento de ambos extremos. A continuación, esterilice ambos cables con alcohol. A continuación, anestesia a un conejillo de indias con un cóctel anestésico como se indica en el protocolo de texto.
A continuación, afeita su cabeza y colócala boca abajo sobre la placa calefactora. A continuación, abra con cuidado la boca de los conejillos de indias con un pequeño laringoscopio y elimine todos los restos de comida de la cavidad bucal mediante aspiración. Luego, inserte con cuidado un tubo estomacal en el esófago empujando lentamente hacia el estómago hasta que sienta resistencia.
Revise los niveles de saturación de oxígeno para asegurarse de que el tubo no esté en la tráquea. A continuación, inyecte una mezcla de solución salina fisiológica, glucosa al 5% y enrofloxacina en la almohadilla de grasa del cuello con una aguja de calibre 23. Prepare el campo quirúrgico utilizando uniformes alternos de povidona yodada y etanol al 70% y luego cubra al animal.
Para el uso analgésico de lidocaína, también se vuelve a dosificar al animal con anestésico según sea necesario. Comience la cirugía con una incisión en la piel de dos a tres centímetros, de tres a cinco milímetros posterior al pabellón auricular con un bisturí. Para tratar el sangrado, use la caterio bipolar.
A continuación, palpa para ver la prominencia de la bulla auditiva y utiliza un bisturí quirúrgico número 15 o unas tijeras quirúrgicas para cortar cuidadosamente los músculos de la zona retroauricular. Para diseccionar los músculos de la bulla, empuje suavemente los músculos a un lado y use un retractor para exponer toda la longitud de la incisión para un acceso sin obstáculos a la bulla. Ahora usa la punta del bisturí número 15 para hacer un agujero en la bulla.
Cuando el hueso esté perforado, amplíe el orificio según sea necesario para inspeccionar las estructuras del oído medio. Coloque al animal en la posición flexionada e inspeccione la abertura. El giro basal de la cóclea y el nicho redondo de la ventana deben ser visibles.
Vigile los niveles de oxígeno del animal mientras está en la posición flexionada. Para continuar, vuelva a colocar al animal boca abajo y exponga el vértice con una incisión rectangular. A continuación, retire la piel del impuesto especial, diseccione el periostio y limpie el periostio con un bisturí.
A continuación, haz un pequeño gancho en el extremo expuesto de tres milímetros del alambre de 3,5 centímetros. A continuación, guía el otro extremo del alambre de oro por vía subcutánea hasta el vértice. A través de un catéter venoso periférico de calibre 18 utilizando una micropinza.
Con un segundo par de micropinzas, coloque con cuidado el extremo en forma de gancho del alambre en el oído medio. A continuación, flexiona la cabeza del animal para visualizar el área del nicho redondo de la ventana a través de la bullostomía y engancha el alambre de oro a la prominencia ósea con micropinzas. Ahora, mientras mantiene una tensión suave en el alambre de oro, fíjelo al borde craneal de la bullostomía con 10 a 15 microlitros de cianoacrilato suministrado por una aguja de calibre 27.
Las mediciones de referencia ahora se pueden tomar desde el alambre de oro. A continuación, para montar el electrodo, coloque al animal en posición prona. Y con un taladro de rebaba de un milímetro, haga dos agujeros de un milímetro por delante de la sutura lambda.
No dañe la duramadre. A continuación, implante tornillos en los orificios para sujetar el conector del electrodo. Ahora use un catéter venoso periférico de calibre 18 para guiar el electrodo desde el conector hasta la bulla en una capa de tejido lo más cerca posible del cráneo.
A continuación, coloque de 0,5 a 0,7 mililitros de cemento dental semifluido entre los tornillos con una espátula y coloque el conector del electrodo entre los tornillos. Mantenga el conector estable en su posición mientras el cemento dental se endurece. Con el animal reposicionado hacia los lados, proceda perforando cuidadosamente la cócleotoma a un milímetro de la ventana redonda.
Taladre con una fresa de diamante de 0,5 milímetros a 5000 rpm. A continuación, inserte con cuidado el electrodo cuatro milímetros en la rampa del tímpano. A continuación, retire el electrodo y repita la inserción.
A continuación, aplique cianoacrilato para asegurar el electrodo. Una implantación estable proporcionará más cambios en el umbral de audición. Por lo tanto, es importante estabilizar el brazo utilizado para insertar el electrodo contra la mesa para minimizar la probabilidad de movimientos bruscos no deseados.
A continuación, se cierra la bullostomía con unos 0,3 mililitros de cemento dental. Y hay que evitar el desplazamiento del cemento dental hacia la bulla. A continuación, cierre la incisión retroauricular con suturas reabsorbibles 5-0.
A continuación, coloque al animal en posición prona. A continuación, utilice unas pinzas para agarrar el borde posterior de la incisión rectangular en el vértice. Y con unas tijeras hacer un túnel subcutáneo de dos centímetros en el cuello del animal.
A través del túnel, implante el alambre de oro de 2,5 centímetros con pinzas. Coloque el extremo con el cable menos expuesto en la clavija designada del conector, luego suelde la conexión. A continuación, suelde el electrodo de nicho de ventana redonda a la clavija apropiada del conector.
Después de completar las soldaduras, aplique más cemento dental para cubrir completamente los pines aislados y el electrodo. Esto completa la implantación. Los umbrales de CAP pre y postoperatorio específicos de frecuencia en el animal presentado se mantuvieron casi sin cambios en las frecuencias bajas.
Mientras que en la zona de alta frecuencia se logró un desplazamiento del umbral de aproximadamente 25 a 30 decibelios a partir de los ocho kilohercios. La reacción del cuerpo extraño al electrodo implantado puede variar significativamente. No puede haber ninguna reacción visible o una gran área del lámpano puede llenarse de tejido fibrótico.
Incluso es posible fracturar la lámina espiral ósea durante la inserción del electrodo CI. En este caso, la fractura provocó una pérdida de células ganglionares espirales, fibrosis y osteogénesis en el conducto vestibular y pérdida del órgano de Corti. Tales fracturas pueden explicar cambios de umbral más altos de lo esperado en algunos animales.
Una vez dominada, esta técnica se puede realizar en dos horas y media si se realiza correctamente. Si se realizan mediciones auditivas intraoperatorias, el tiempo requerido para el procedimiento total puede aumentar considerablemente. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar la implantación coclear en el conejillo de indias.
Con este modelo animal, puede abordar varias preguntas de investigación en este campo.
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