27 de abril de 2019
Aquí describimos y comparamos dos posiciones para obtener la vista apical de cuatro cámaras en ratones. Estas posiciones permiten la cuantificación de la función ventricular derecha, proporcionan resultados comparables y se pueden utilizar indistintamente.
Por lo general, la visualización de la vista apical de cuatro cámaras sólo es posible en 65 a 70% de los ratones investigados. La principal ventaja de esta técnica es que el uso combinado de ambas posiciones de inclinación permite esa solicitud en casi todos los ratones investigados. Después de que el ratón haya alcanzado el nivel adecuado de sedación de luz, fije el ratón en una plataforma calentada y aplique gel de electrodo a las extremidades para la monitorización continua de la frecuencia cardíaca y la temperatura.
Retire el vello del pecho con crema depilatoria y aplique una capa de gel de acoplamiento por ultrasonido en la punta del transductor. Para una vista apical de cuatro cámaras con la inclinación de la plataforma izquierda y caudal, anguda la plataforma de 10 a 15 grados a la izquierda y 10 a 15 grados caudalmente. Coloque el transductor por encima del ápice dentro del plano de imagen, 45 grados hasta el plano coronal con el eje central del haz de ultrasonido dirigido cranialmente posterior y hacia la izquierda.
Pulse el botón de modo B para activar el modo B para des-imagen y localizar el ventrículo izquierdo, la aurícula izquierda, el ventrículo derecho, la aurícula derecha, la válvula mitral y la válvula tricúspide en la ventana acústica. Para asegurarse de que está en la posición correcta, deslice el transductor hacia arriba y hacia abajo a lo largo del plano coronal. Manipule el plano imagine en el plano coronal y gire el reloj y en sentido contrario a las agujas del reloj alrededor del eje central hasta que ambos ventrículos se visualicen en su dimensión más larga, y ambas aurículas sean visibles para obtener la vista de cuatro cámaras.
Pulse cine store para guardar la grabación. A continuación, pulse congelar la exploración para pausar el sistema. Para medir la velocidad del flujo sanguíneo transtricuspid pulse congelar para activar el sistema y presionar superposición varias veces para activar el volumen de la muestra para el modo de onda posterior.
Con la vista de imágenes de cuatro cámaras, utilice la bola de oruga para colocar el volumen de la muestra en la apertura de las válvulas tricúspides y haga clic en el modo de onda de pulso para medir las velocidades de entrada. Haga clic en cine store para guardar la grabación optimizada seguida de la congelación de análisis para pausar el sistema. Para la medición de la excursión sistólica del plano anular tricúspide, haga clic en congelar el escaneo para activar el sistema y cambiar al modo B.
Algunas manipulaciones de la imagen podrían ser necesarias para recuperar la vista correcta de cuatro cámaras. Haga clic en superponer varias veces para activar el volumen de muestra del modo M y utilice el trackball para alinear el volumen de la muestra con la parte lateral del anillo tricúspide. Utilice el trackball para tirar de los bordes del volumen de la muestra hasta que toda la amplitud del movimiento cardíaco durante el ciclo cardíaco esté cubierta.
Y activa el modo M. Los movimientos de anillo tricúspide deben aparecer como una onda, luego haga clic en la tienda de cine para guardar la grabación y escanear congelar para pausar el sistema. Para la medición de los parámetros doppler de tejido activar el sistema y el modo B.
Haga clic en superponer varias veces para activar el volumen de la muestra para la toma de imágenes doppler de tejido y utilice el trackball para alinear el volumen de la muestra con la parte lateral del anillo tricúspide, de modo que la pared libre del ventrículo derecho cree un ángulo con la válvula tricúspide. Tire de los bordes de la muestra para ajustar el volumen de la muestra para incluir las posiciones extremas sistólicas y diastólicas del anular, y haga clic en el tejido para activar el modo de imagen doppler del tejido. A continuación, haga clic en cine store para guardar la grabación y escanear congelar para pausar el sistema.
Inclinar la plataforma hacia la izquierda y hacia la derecha mejora la ventana acústica y proporciona imágenes de calidad comparable en corazones de ratón sanos y enfermos en el modo B. Después de obtener las posiciones correctas, las mediciones en el modo M, el modo de imagen doppler de tejido y el modo de onda pulsada proporcionan imágenes de calidad comparable con resultados de parámetros diastólicos similares obtenidos en las posiciones de plataforma caudal craneal o izquierda derechas en corazones sanos y enfermos. Además, el análisis de correlación revela un buen acuerdo entre los valores obtenidos de estas dos posiciones facilitadas.
Al intentar este procedimiento es importante recordar que la ecocardiografía es una técnica no invasiva para la evaluación de la función cardíaca. Después de este procedimiento, se pueden recoger muestras de tejido después de las mediciones fisiológicas para responder preguntas adicionales sobre el sustrato morfológico o los mecanismos moleculares de la disfunción cardíaca. Esta técnica ha allanado el camino para que los investigadores en el campo de la hipertensión pulmonar exploren los mecanismos de adaptación del ventrículo derecho a la sobrecarga de presión utilizando modelos de ratón de hipertensión pulmonar.
Para obtener los resultados producibles entre experimentos, controle estrechamente los parámetros fisiológicos del animal como la frecuencia cardíaca y la temperatura corporal y mantenga el nivel de anestesia lo más superficial posible para minimizar la influencia de la función cardíaca.
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Este artículo describe dos posiciones para obtener la vista de cuatro cámaras apical en ratones, lo que permite la cuantificación de la función ventricular derecha. Las técnicas proporcionan resultados comparables y pueden usarse indistintamente, mejorando las tasas de visualización en ratones.
La evaluación ecocardiográfica cuantitativa de los parámetros diastólicos del ventrículo derecho en modelos murinos aborda una brecha crítica en la investigación cardiovascular preclínica, particularmente en estudios de sobrecarga de presión e hipertensión pulmonar. La visualización y medición confiables de la función del VD permiten reducir riesgos mecanicistas y aumentan la confianza predictiva en las etapas tempranas del descubrimiento y en los puntos de inflexión traslacionales. Este protocolo apoya una validación sólida de objetivos y continuidad a lo largo del proceso de descubrimiento de fármacos cardiovasculares.
Este protocolo ecocardiográfico se integra en la fase temprana de descubrimiento a preclínica para el desarrollo de fármacos cardiovasculares, apoyando tanto la comprobación de hipótesis como la validación traslacional.