Evaluación no invasiva de la función muscular de los dorsiflexores en ratones

Este modelo puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la función de contracción muscular. Como el mecanismo de producción de fuerza, durante la progresión de la enfermedad. La principal ventaja de esta técnica es que este procedimiento es un procedimiento no invasivo, que se puede realizar en el mismo animal en diferentes puntos de tiempo, para controlar la progresión y el tratamiento de la enfermedad.

La demostración visual de este método es crítica, ya que la alteración de cualquiera de estos pasos puede conducir a una mayor variabilidad en los resultados. Por lo tanto, la práctica puede permitirle obtener resultados más consistentes. Para comenzar este procedimiento, configure la abrazadera de rodilla del ratón en la plataforma, así como la placa del pie del ratón en el transductor.

A continuación, encienda la plataforma de calefacción a 37 grados centígrados. Abra el software de control muscular dinámico en el escritorio. En la lista desplegable de configuración, seleccione raíz instantánea y cambie los parámetros de tiempo de ejecución a 120 segundos.

En la ventana con la etiqueta de la base de guardado automático, introduzca el nombre de la ubicación del archivo de guardado automático. Haga clic en la casilla de verificación situada a la izquierda de la ventana base de guardado automático y cámbielo para habilitar el guardado automático. En la parte superior de la pantalla de control de DMC, haga clic en secuenciador, que abrirá una nueva ventana emergente.

Seleccione la secuencia abierta y seleccione el protocolo que desea utilizar. A continuación, haga clic en secuencia de carga y cierre la ventana. Para preparar al animal para el experimento, retire el pelo en la pierna derecha del ratón con cortapelos eléctricos.

Coloque al animal en una posición supina en la plataforma calentada y limpie la pierna derecha con 70% de alcohol y yodo. En este punto, ajuste el isoflurano al 2% con flujo de oxígeno a un litro por minuto. Coloque el pie en la placa del pie y fíjelo con cinta médica.

A continuación, aplique el gel conductor sobre la piel donde se colocarán los electrodos. A continuación, sujeta la rodilla para estabilizar la pierna durante el procedimiento. Utilice las perillas de la plataforma para colocar su extremidad posterior con el fin de formar un ángulo de 90 grados en el tobillo.

Una vez que el ratón esté asegurado en la plataforma, coloque los electrodos debajo de la piel de la pierna derecha, uno cerca de la cabeza del peroné y el otro electrodo más distalmente en el lado lateral de la pierna. Los electrodos se colocan cuidadosamente con el fin de lograr la estimulación suficiente del nervio peroneo. También esta posición se puede ajustar para alcanzar un pico estable, visualizado en la pantalla.

Una vez alcanzados estos pasos, ajuste el estimulador bifásico de alta potencia para obtener una estimulación del nervio peroneo que resulta en un par de dorsiflexión máximo. Durante la estimulación, gire el transductor en el sentido de las agujas del reloj para producir valores negativos, que son importantes para asegurarse de que los electrodos están estimulando sólo los músculos flexores dorsi por el nervio peroneo. Una vez logrado este paso, estabilice los electrodos con una abrazadera, con el fin de evitar cualquier movimiento durante el procedimiento.

Alcanzar el pico negativo lentamente y gradualmente es importante para verificar que los electrodos se colocan en la posición correcta, y la tensión es suficiente para lograr la fuerza máxima. Posteriormente, detenga el vástago instantáneo en el software. En la pantalla principal, encienda el botón con la etiqueta de secuencia de inicio "para iniciar la secuencia de configuración anterior.

Una vez finalizadas las medidas de fuerza, retire los electrodos, retire la cinta del pie y suelte la abrazadera de la rodilla. Apague el isoflurano y mantenga la entrega de oxígeno durante unos minutos para ayudar a la recuperación del animal. Una vez que el ratón comienza a moverse y recupera la conciencia, devuélvalo a la jaula.

Este gráfico muestra los datos representativos de la curva de frecuencia de fuerza de un ratón a lo largo del tiempo, donde el procedimiento se repetía una vez a la semana hasta que se completaron cinco puntos de tiempo. Estas observaciones han mostrado valores de producción de fuerza consistentes a lo largo de los puntos de tiempo. Este procedimiento también ha demostrado ser consistente entre diferentes ratones, como se indica en el área representativa, bajo la curva de la estimulación FFC, en cinco observaciones diferentes en seis ratones probados una vez a la semana.

Después de su desarrollo, esta técnica permite a los investigadores en el campo de las enfermedades neuromusculares investigar los cambios temporales en la función muscular en la duplicación de modelos de la enfermedad.