Name: Estenosis Atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: Aprenda a realizar cirugía de estenosis auricular izquierda en ratas para estudiar la hipertensión pulmonar del grupo 2. Este modelo inducido con clip de titanio permite investigar la arterialización venosa pulmonar y comprender los mecanismos de esta patología prevalente sin terapias aprobadas.

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Los autores reconocen la sociedad paso-Japón para el programa de promoción de la ciencia (JSPS) verano. Ping Yu Xiong fue apoyado por fondos del programa de verano de paso-JSP para visitar la escuela de medicina de la Universidad de Jikei. Dr. Minamisawa es apoyado en parte por el Ministerio de educación, cultura, deportes, ciencia y tecnología del Japón (S.M.), el programa de MEXT-Supported para la Fundación de investigación estratégica en privado universidades (S.M.), el vehículo de carreras conmemorativas Fundación (S.M.) y el Jikei Universidad postgrado investigación fondo (S.M.) con el apoyo financiero para este proyecto. Dr. Archer es apoyado en parte por los institutos nacionales estadounidenses de salud (NIH) subvenciones NIH 1R01HL113003-01A1 (S.L.A.) y NIH 2R01HL071115-08 (S.L.A.), la Fundación de Canadá para la innovación, el Tier 1 Cátedra de investigación de Canadá en la dinámica mitocondrial y traslacional Medicina (S.L.A.), la Fundación William J. Henderson, la red Vascular canadiense y unidad cardiopulmonar de la reina (QCPU).
Los autores reconocen el Sr. Tadashi Kokubo, jefe de servicios fotográfico del centro de información académica en el Jikei escuela de medicina de la Universidad, para filmar el video.

El protocolo experimental LAS ha sido aprobado por Jikei Universidad Escuela de medicina Animal cuidado Comité y el Comité de ética (protocolo #2015-118) e investigación de la Universidad.
1. preoperatorio preparación
<ol><li>Después de llegar a las instalaciones de animales, proporcionar ratas de Sprague Dawley macho 5 semanas de edad entre 150 a 200 g con 1 semana para aclimatarse a su nuevo hogar antes de la operación.</li>
	<li>Preparar el siguiente equipo antes de la cirugía en autoclave: 1) un respirador de animales pequeños, 2) una máquina de anestesia, 3) un kit de intubación (compuesto por un par de pinza fórceps, un depresor de lengüeta y un angiocatéter de 18 G), 4) quirúrgicos instrumentos (que incluye un par de fórceps curvado un par de pinzas rectas, un portaagujas, un retractor de pecho, un par de tijeras, una sutura de monofilamento 5-0, un aplicador de clip, clips de tamaño mediano grande y un tubo de pecho 23 G).</li>
	<li>Tienen Q-tips estériles y la gasa lista para lidiar con la sangría.</li>
	<li>Use una almohadilla de calefacción para mantener la temperatura del cuerpo animal alrededor de 37 ° C durante la cirugía.</li>
</ol>2. anestesia e intubación endotraqueal
<ol><li>Anestesiar la rata en una cámara de inducción con isoflurano 5% mezclado con aire de la habitación de 2 L/min.</li>
	<li>Antes de la intubación, afeitarse el pelo de la rata en el pecho con una afeitadora de cabello y aplicar Crema depilatoria para eliminar el vello fino.</li>
	<li>Comprobar el reflejo pedal para confirmar éxito anestesia antes de la intubación.</li>
	<li>Los dientes frontales con una cadena del gancho y garantizar la cadena con dos pernos.</li>
	<li>Abrir la boca de la rata con el fórceps pinza hemostática e Introduzca el depresor de lengua en la boca.</li>
	<li>Levante el depresor de lengua para visualizar las cuerdas vocales. Nota: Es útil brillar una luz intensa sobre la región central de la rata para ayudar a visualizar las cuerdas vocales.</li>
	<li>Inserte el angiocatéter de 18 G como un tubo endotraqueal en la tráquea y luego, rápidamente, conecte el catéter al respirador.</li>
	<li>Ajuste el volumen tidal 10 μl por gramo con una frecuencia respiratoria de 100 respiraciones por minuto.</li>
	<li>Mantener la anestesia con isoflurano 2% mezclado con aire de la habitación de 2 L/min.</li>
</ol>3. preparación del campo quirúrgico
<ol><li>Preparar el sitio quirúrgico con alternando peelings de clorhexidina y alcohol x3.</li>
	<li>Dar buprenorfina 0,01 mg/kg por vía subcutánea.</li>
	<li>Cubrir la rata con un paño estéril.</li>
	<li>Comprobar el reflejo pedal para confirmar una intubación exitosa y el mantenimiento de la anestesia.</li>
</ol>4. izquierda estenosis Atrial cirugía
<ol><li>Marcar el sitio de la incisión 2 cm por debajo de la axila izquierda de rata con una regla.</li>
	<li>Hacer un 2 cm a la izquierda incisión de pared lateral del tórax con un par de tijeras.</li>
	<li>Separar los músculos intercostales entre la cuarta y la quinta costilla, con el recto y el fórceps curvado, hasta entrar en la cavidad torácica.</li>
	<li>Inserte el retractor de pecho a la cavidad torácica. Siga usando el fórceps recto y curvo para separar el músculo intercostal para obtener una visualización directa del timo y el corazón.</li>
	<li>Levante el timo con un par de pinzas rectas. Quitar el timo que cubre el corazón con un par de tijeras. Evitar cortar o meter en cualquier los vasos sanguíneos principales.</li>
	<li>Con cuidado pasar una sutura de monofilamento 5-0 a través de la superficie del ventrículo izquierdo, justo debajo de la orejuela auricular izquierda. Evitar pasar la aguja a través de las arterias coronarias principales.</li>
	<li>Después de la sutura en lugar y no hay ningún sangrado significativo, haga un nudo flojo.</li>
	<li>Tire del hilo de sutura hacia arriba y hacia adelante para levantar el corazón fuera del tórax.</li>
	<li>Una vez que se levanta el corazón fuera del tórax, aplicar rápidamente un clip de medianas y grandes a la aurícula izquierda, justo por encima de la válvula mitral. Nota: El clip es medio cerrada, con la punta de la pinza pellizcando el atrio izquierdo, causando estenosis atrial izquierda.</li>
	<li>Rápidamente Coloque el corazón en el pecho. Esté el corazón no fuera el pecho durante más de 30 s.</li>
	<li>Retirar la sutura de la estancia para levantar el corazón.</li>
	<li>Cerrar el pecho con una sutura de monofilamento 5-0, con un patrón interrumpido simple.</li>
	<li>Inserte un tubo del pecho 23 G conectado a una jeringa de 10 mL en el pecho y luego, proceder a cerrar el músculo de la pared del pecho y la piel con suturas interrumpidas simples.</li>
	<li>Extraer cualquier aire, sangre y derrame pleural a través de la sonda insertada, utilizando el adjunto 10 cc jeringa y luego, tirar el tubo.</li>
	<li>Cerrar la capa de la piel con una sutura de monofilamento 5-0, con un patrón interrumpido simple.</li>
	<li>Dar buprenorfina 0,01 mg/kg por vía subcutánea.</li>
	<li>Apague el isoflurano.</li>
	<li>Desconecte el respirador después de que se observa la respiración espontánea.</li>
	<li>Mantener la rata intubada y deje que se recupera en el cojín de calentamiento hasta que se despierta.</li>
	<li>Con seguridad extubar la rata después de uno o más de los siguientes signos se haya observado: la rata se comience a mover sus cuatro extremidades, recupera su righting reflex, recupera su reflejo nauseoso o presenta micción espontánea.</li>
</ol>5. postoperatorio cuidado
<ol><li>Cada 8-12 h, dan buprenorfina 0,01 mg/kg por vía subcutánea. Carprofen 5 mg/kg se administra por vía subcutánea diariamente durante 2 días y, luego, según sea necesario, si la rata no se mueve todo bien y se ve como es en el dolor.</li>
	<li>Dar 5 mL de solución salina normal por vía subcutánea inmediatamente después de la cirugía, como la rata puede tener dificultades para beber del grifo de agua, inmediatamente postoperatorio.</li>
</ol>6. confirmación del éxito de la estenosis Atrial izquierda con ecocardiografía
<ol><li>Realizar un ecocardiograma transtorácico 2 semanas después de la cirugía para determinar la velocidad de entrada del LV.</li>
	<li>Anestesiar la rata siguiendo los pasos descritos en la sección 1.</li>
	<li>Después de la inducción de la anestesia, mantener la anestesia con isoflurano 2% mezclado con aire de la habitación de 2 L/min con un cono de nariz.</li>
	<li>Afeitarse la pared torácica de la rata con una afeitadora de cabello y use crema depilatoria para eliminar cualquier resto del cabello.</li>
	<li>Coloque la sonda del ultrasonido en el ápice del corazón, que está en el quinto espacio intercostal en el lado izquierdo del pecho. Mueva la sonda de esta región hasta que se obtiene una buena vista de cuatro cámaras.</li>
	<li>Medir la velocidad de entrada del LV mediante el modo Doppler de onda pulsada justo por encima del anillo de la válvula mitral.</li>
	<li>Una velocidad de entrada LV superior a 2,0 m/s se requiere para el desarrollo de la hipertensión pulmonar moderada en la cirugía de LAS después de 8-10 semanas.</li>
</ol>7. simulacro de operación
<ol><li>Excepción de aplicación de clip (paso 4.9), realice todos los pasos anteriores para crear ratas control pareados por edad, sham-funcionado (SOC).</li>
</ol>

<ol><li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li>
<li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li>
<li>Moreira, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Pulmonary+Hypertension+in+the+General+Population%3A+The+Rotterdam+Study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).</li>
<li>Wijeratne, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+Incidence+and+Prevalence+of+World+Health+Organization+Groups+1+to+4+Pulmonary+Hypertension%3A+A+Population-Based+Cohort+Study+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Quality+and+Outcomes%22%5BJournal%5D)">Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada.</a> Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).</li>
<li>Briongos Figuero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+persistent+pulmonary+hypertension+after+mitral+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement.</a> Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).</li>
<li>Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Society%22%5BJournal%5D)">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li>
<li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li>
<li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+arising+from+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).</li>
<li>Alsoufi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Not+a+Cinderella+story%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Not a Cinderella story.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).</li>
<li>Kato, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vein+stenosis+and+the+pathophysiology+of+%26%2334%3Bupstream%26%2334%3B+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of &#34;upstream&#34; pulmonary veins.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

La rata de LAS es un modelo de novela grupo 2 PH que ya ha recibido considerable interés de los investigadores en el campo12,13. En comparación con los dos modelos existentes de grupo 2, es decir, la vena pulmonar estenosis (PVS) modelo14, con lechones y el supracoronary aórtica metálicas (SAB) rata modelo8,9,10, el modelo de LAS ratas tiene vario...

El propósito de este artículo es demostrar el procedimiento paso a paso de cómo realizar la cirugía de LAS ratas. Inducida quirúrgicamente LAS imita estrechamente MS y cor triatriatum del corazón en los seres humanos, que implican la creación de una obstrucción mecánica en el atrio izquierdo1. Obstrucción de la entrada de (LV) ventricular izquierda a menudo provoca una congestión de la circulación venosa pulmonar, y los pacientes desarrollan gradualmente el PH. La Organización Mundial de salud clasifica el PH debido a enfermedades del corazón izquierdas como grupo 2, que es el grupo más frecuente de PH2,3,4. El diagnóstico de PH en pacientes con enfermedades del corazón izquierdos se asocia con un mayor que un aumento de siete veces en la mortalidad estandarizada 1 año4. En la actualidad, no existe ningún tratamiento aprobado para el grupo 2 PH además de tratar la subyacente enfermedades cardíacas (p. ej., reemplazo quirúrgico de la válvula mitral estenótica) a la izquierda. Sin embargo, incluso eficaz la válvula mitral no resuelve PH completamente en casi la mitad de los pacientes con MS5. Este PH persistente es debido a la remodelación vascular pulmonar adversos, que es mal entendida. Por lo tanto, los modelos animales son importantes para mejorar nuestra comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes de remodelado vascular pulmonar adversos en el grupo 2 PH.
Existen pocos modelos animales del grupo 2 pH en arteria coronaria ligadura6,7 y transversal aórtica metálicas8,9,10 en roedores son los más comúnmente utilizados modelos animales de grupo 2 PH. La desventaja principal de estos modelos es la implicación de LV, que hace difícil interpretar los resultados de grupo 2 estudios de PH. Por el contrario, permanece intacto en el modelo de LAS LV. Además, el modelo de LAS es clínicamente relevante porque resulta en el desarrollo lento y progresivo de PH durante un período de 10 semanas11. En los seres humanos, MS se considera significativo si el transmitral, velocidad de flujo Doppler es mayor que 2,0 m/s11, y también usamos este número como un punto de corte para determinar si la cirugía LAS ha producido estenosis significativa. Además, aunque el modelo de LAS genera PH leve o moderada, demuestra cambios histologic característicos, similares a los de pacientes humanos, es decir, el desarrollo de arterialización venosa intrapulmonar11. El modelo de LAS ratas es una novela y clínicamente relevantes grupo 2 PH modelo con función VI preservada. Es conveniente para el estudio de la fisiopatología de la remodelación vascular pulmonar persistente, identificar dianas moleculares y pruebas de nuevas terapias para el grupo 2 PH.

<table><tbody><tr><td>5-0 Prolene Suture</td><td>Johnson & Johnson - Sutura de</td> polipropileno Ethicon <td>8725H</td><td>con tecnología HEMO-SEAL</td></tr><tr><td>Máquina de anestesia</td><td>Wakenyaku Co., Ltd.</td><td>BRTK-100A Bomba de</td><td>aire y máquina de anestesia</td></tr><tr><td>Guía de angiocatéter</td><td>Guía de</td><td>10 cm de fabricación propia pegada a una jeringa de 1 cc&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Retractor de pecho</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>F-2</td><td></td></tr><tr><td>Tubo torácico 23G</td><td></td><td>Jeringa de 10 cc de fabricación propia unida a una aguja 23G más tubo de plástico</td>Pinzas curvas Natsume Seisakusho Co., Ltd.<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>A-14</td><td></td></tr><tr><td>Almohadilla térmica</td><td>Vivaria</td><td>MP-916-NV</td><td>Mantenga la temperatura corporal a 37 grados centígrados</td></tr><tr><td>Clips de ligadura Horizon</td><td>Teleflex</td><td>REF 003200</td><td>Tamaño mediano-grande</td></tr><tr><td>Horizon Aplicador de clip de ligadura de carga manual para tamaño mediano-grande Horizon</td><td>Teleflex</td><td>REF 337085</td><td>Clips de ligadura Mandíbula en ángulo, (20cm)</td></tr><tr><td>Soporte de aguja</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>MC-40</td><td></td></tr><tr><td>Respirador para roedores</td><td>CWE Inc</td><td>SAR-830/P Ventilador</td> para <td>animales pequeños</td></tr><tr><td>Tijeras</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>B-12</td><td>Tijeras rectas idealmente con puntas redondas</td></tr><tr><td>Pinzas rectas</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>A-7</td><td></td></tr><tr><td>Depresor de lengua</td><td>Uchida Yoko Co., Ltd.</td><td>8-615-2417</td><td>Utilice el extremo ancho</td></tr></tbody></table>

estenosis atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

El mecanismo de arterialización venosa pulmonar inducida por la estenosis mitral y la hipertensión pulmonar de grupo 2 (PH) es confuso. Existe un modelo de roedor del grupo 2 de PH, debido a la estenosis mitral (EM), para facilitar la investigación de los mecanismos de la enfermedad y posibles estrategias terapéuticas. Presentamos un modelo de rata novela del grupo 2 y pulmonar venosa inducida por la congestión pulmonar venosa arterialización PH causada por estenosis atrial izquierda (LAS). LAS se logra constricting la aurícula izquierda mediante un clip de titanio medio cerrado. Después de la cirugía de LAS rata modelo con una velocidad de flujo transmitral mayor que o igual a 2,0 m/s en la ecocardiografía desarrolla gradualmente arterialización venosa pulmonar y grupo 2 PH durante un período de 8 a 10 semanas. En este protocolo, le ofrecemos el procedimiento paso a paso de cómo realizar la cirugía de LAS. El modelo de rata de LAS presentadas imita MS en los seres humanos y es útil para estudiar el mecanismo molecular subyacente de arterialización venosa pulmonar y para la evaluación preclínica de terapias para el grupo 2 de PH.

La efectividad de LAS se confirma mediante ecocardiografía, 2 semanas de postoperatorio. Ratas con una velocidad de entrada del LV superior a 2,0 m/s, con una vista de cuatro cámaras, se consideran estenosis significativa (figura 1) se han desarrollado y confiable desarrollar PH moderado y arterialización venosa pulmonar 8-10 semanas después de LAS cirugía.
Cirugía de LAS después de diez semanas, la...

Estenosis atrial izquierda (LAS) es una novedosa técnica quirúrgica empleada para el estudio de grupo 2 de la hipertensión pulmonar (PH) y mecanismos subyacentes arterialización venosa pulmonar. Aquí, presentamos un protocolo para constrict la aurícula izquierda mediante un clip de titanio para causar arterialización venosa pulmonar y moderada PH en una rata.

Estenosis Atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Gracias por ver nuestros videos. Soy Susumu Minamisawa de la Escuela de Medicina de la Universidad Jikei de Tokio, Japón. Nuestra oportunidad en la hipertensión pulmonar animal debido a la enfermedad del corazón de la rata que se clasifica como hipertensión pulmonar del grupo dos.La Organización Mundial de la Salud clasifica la hipertensión pulmonar en cinco grupos. La rata de estenosis auricular izquierda es un modelo animal grupo dos hipertensión pulmonar que es la forma más frecuente de hipertensión pulmonar y actualmente no hay terapias aprobadas para este grupo de hipertensión pulmonar. En estos videos estamos demostrando el procedimiento paso a paso de cómo realizar la cirugía de estenosis auricular izquierda en rata.La estenosis auricular derecha creada quirúrgicamente imita la estenosis mitral en humanos. Cuando lo utilizamos para estudiar la posibilidad y bajo el grupo dos hipertensión pulmonar. Empecemos.Prepare el siguiente equipo antes de la cirugía, un pequeño respirador animal y una máquina anestésica. Un kit de incubación compone un par de fórceps de hemostat, un depresor de lengua y un angioelé catéter de calibre 18. Los instrumentos quirúrgicos incluyen un par de fórceps curvos, un par de fórceps rectos, un conductor de aguja, un retractor de pecho, un par de tijeras, una sutura monofilamento 5-0, un aplicador de clip, un clip mediano grande y un tubo de pecho de calibre 23.Anesthetizar la rata en una cámara de inducción con cinco por ciento de isoflurano mezclado con dos metros por minuto de aire de la habitación. Antes de la intubación afeitar el pelo del pecho. Aplica crema de depilación para eliminar el cabello fino que no se elimina con la afeitadora.Enganche los dientes delanteros con una cuerda y fije las cuerdas a los pines. Después de asegurar la cuerda, abre la boca con los fórceps de hemostat e inserta el depresor de la lengua en la boca. Levante el depresor de la lengua para visualizar la cuerda vocal.Inserte el angio-catéter de calibre 18 como un tubo endotraqueal en la tráquea y luego conecte rápidamente el catéter al respirador. Ajuste el volumen de marea a 10 microlitros por gramo con una frecuencia respiratoria de 100 respiraciones por minuto. Mantener la anestesia con un dos por ciento de isoflurano mezclado con aire de dos metros por minuto.Esterilice el sitio quirúrgico con exfoliantes alternos de clorhexidina y alcohol. Dar Buprenorfina 01 miligramos por kilogramo por vía subcutánea. Cubra a la rata con una cortina estéril.Compruebe el reflejo del pedal para confirmar la anestesia exitosa antes de la cirugía. Marque el sitio de la incisión dos centímetros por debajo de la axila. Haga una incisión de pared torácica lateral izquierda de dos centímetros con un par de tijeras.Separe cuidadosamente el músculo intercostal entre la cuarta y la quinta costilla usando un fórceps recto y curvo hasta entrar en la cavidad torácica. Inserte el retractor torácico en la cavidad torácica. Usa un poco de fuerza para abrir el retractor torácico para separar la cuarta y quinta costilla por alrededor de un centímetro.Levanta el timo con un par de fórceps rectos. Retire cuidadosamente el timo que cubre el corazón con un par de tijeras. Pase cuidadosamente una sutura de monofilamento 5-0 a través de la superficie del ventrículo izquierdo justo debajo del apéndice auricular izquierdo.Se debe tener cuidado para evitar pasar la aguja a través de las principales arterias coronarias. Después de que la sutura está en su lugar y no hay sangrado significativo atar un nudo suelto. Tire del hilo de sutura hacia arriba y hacia adelante para levantar el corazón fuera del pecho.Una vez que el corazón se levante fuera del pecho, aplique rápidamente un clip mediano grande en la aurícula izquierda justo encima de la válvula mitral. Retire con cuidado la sutura de la estancia utilizada para levantar el corazón. Comienza a cerrar el pecho con una sutura de monofilamento de 5-0 usando un patrón interrumpido simple.Inserte un tubo torácico de calibre 23 unido a una jeringa de 10cc en la cavidad torácica. Y luego proceder con el cierre del pecho. Extraiga cualquier derrame de aire, sangre y pleuras cerca del tubo torácico insertado utilizando la jeringa de 10cc conectada.Y luego tire del tubo cuando no salga nada. Cierre el área de la piel con sutura de monofilamento 5-0 utilizando un patrón interrumpido simple. Retire la cortina quirúrgica.Dar Buprenorfina 01 miligramos por kilogramo por vía subcutánea. Apague el isoflurano. Excava la rata cuando empieza a despertar.Dos semanas después de la operación use cariografía de eco para confirmar el éxito de la cirugía de estenosis auricular izquierda. La eficacia de la estenosis auricular izquierda se confirma mediante cardiografía de eco dos semanas después de la operación. Se considera que las ratas con una velocidad de entrada del ventrículo izquierdo superior a dos metros por segundo medida en la vista de cuatro cámaras han desarrollado una estenosis significativa.10 semanas después de la cirugía de estenosis auricular izquierda, las ratas del grupo LAS muestran agrandamiento auricular izquierdo, congestión pulmonar, sobrecarga de presión del ventrículo derecho y aumento del flujo venoso pulmonar en comparación con las ratas del grupo operado por la farsa. Además, hay un aumento significativo de la presión sistólica ventricular derecha en el grupo de estenosis auricular izquierda en comparación con el grupo operado por la farsa. Sin embargo, la presión sistólica del ventrículo izquierdo sigue siendo la misma en ambos grupos.El examen histológico de la sección transversal larga teñida con Van Gieson elástico muestra un aumento de la enfermedad arterial pulmonar y venosa pulmonar. Un aumento de la dimensión venosa pulmonar el grupo de estenosis auricular izquierda frente al grupo operado por la farsa fue un músculo más suave que actúa en la tinción muestra un mayor número de células musculares lisas en la arteria pulmonar y la vena pulmonar del grupo de estenosis auricular izquierda frente al grupo de control. Espero que te haya gustado ver este video.Aunque la cirugía es relativamente simple se debe tener cuidado al aplicar la sutura en el ventrículo izquierdo para evitar golpear las arterias coronarias principales. Al levantar el corazón tire de la sutura hacia la cabeza de la rata para que la aurícula izquierda su estructura de carrera se pueda visualizar claramente. Al aplicar el clip en la aurícula izquierda, la estanqueidad del clip debe ser suficiente para causar una estenosis auricular izquierda significativa, pero no demasiado apretada para inducir edema pulmonar agudo e insuficiencia cardíaca derecha.Gracias por ver este video. Y buena suerte con tu experimento.

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La hipertensión pulmonar tromboembólica crónica (HPTEC) y la disfunción del ventrículo derecho (VD) fueron inducidos en lechones por obstrucción progresiva de las arterias pulmonares. Las consecuencias fueron notablemente similares a las observadas en los pacientes con HPTEC. Este modelo animal sería una herramienta muy útil para la fisiopatología y los experimentos terapéuticos sobre la HPTEC y el fracaso del VD.

Hipertensión pulmonar tromboembólica crónica y Evaluación de la función ventricular derecha en el Piglet

La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad de las arteriolas pulmonares que conduce a su obliteración y al desarrollo de insuficiencia ventricular derecha. Los modelos de HAP en roedores son fundamentales para comprender la fisiopatología de la HAP. Aquí demostramos la caracterización hemodinámica, con cateterismo cardíaco derecho y ecocardiografía, en ratón y rata.

Hemodinámica Caracterización de roedores modelos de hipertensión arterial pulmonar

Este protocolo describe un procedimiento quirúrgico para crear un modelo de hipertensión arterial pulmonar (HAP) inducida por flujo en ratas y los procedimientos para analizar los principales criterios de valoración hemodinámicos e histológicos en este modelo.

La cirugía de derivación, un cateterismo derecho, y Vascular Morfometría en un modelo de rata de flujo inducido por la hipertensión arterial pulmonar

Presentamos un método quirúrgico para inducir hipertrofia ventricular derecha y el fracaso en ratas.

Un tronco pulmonar las bandas modelo de sobrecarga de presión inducida por el fracaso y la hipertrofia Ventricular derecha

La neumonectomía izquierda roedor es una técnica valiosa en la investigación de la hipertensión pulmonar. Aquí, presentamos un protocolo para describir el procedimiento de Neumonectomía de rata y cuidado postoperatorio para mortalidad y morbilidad mínima.

La neumonectomía izquierda combinado con Monocrotaline o Sugen como un modelo de hipertensión pulmonar en ratas

Aquí, proporcionamos un enfoque útil para estudiar el mecanismo de la insuficiencia ventricular derecha. Se establece un enfoque más conveniente y eficiente de la constricción de la arteria pulmonar utilizando instrumentos quirúrgicos hechos internamente. Además, se proporcionan métodos para evaluar la calidad de este enfoque mediante ecocardiografía y cateterismo.

Inducción de la insuficiencia ventricular derecha por constricción pulmonar de la arteria y evaluación de la función ventricular derecha en ratones

Describimos la creación de un modelo de rata de sobrecarga de presión inducida remodelación moderada y disfunción sistólica temprana donde se activan las vías de transducción de señales implicadas en el inicio del proceso de remodelación. Este modelo animal ayudará a identificar dianas moleculares para aplicar estrategias terapéuticas tempranas anti-remodelación para la insuficiencia cardíaca.

Un modelo de rata de sobrecarga de presión inducida remodelación moderada y disfunción sistólica en comparación con la insuficiencia cardíaca sistólica excesiva

El presente protocolo describe un procedimiento quirúrgico para eliminar las bandas aórticas ascendentes en un modelo de rata de hipertensión pulmonar debido a una enfermedad cardíaca izquierda. Esta técnica estudia los mecanismos endógenos de remodelación inversa en la circulación pulmonar y el corazón derecho, informando así estrategias para revertir la hipertensión pulmonar y/o la disfunción ventricular derecha.

Un modelo de remodelación vascular inversa en la hipertensión pulmonar debido a la enfermedad cardíaca izquierda por desbandamiento aórtico en ratas

El presente protocolo describe la caracterización ecocardiográfica de la morfología y función del ventrículo derecho en un modelo de rata de hipertensión arterial pulmonar.

Evaluación ecocardiográfica integral de la función del ventrículo derecho en un modelo de rata de hipertensión arterial pulmonar

La insuficiencia cardíaca derecha (IRH) se caracteriza por dilatación e hipertrofia cardíaca del lado derecho, lo que provoca un mal funcionamiento ventricular y auricular. Las afecciones cardiopulmonares asociadas con la RHF se acompañan de un mayor riesgo de arritmias cardíacas. Este artículo describe un modelo estandarizado de RHF inducida por bandas en la arteria pulmonar asociada con un aumento de la arritmogénesis ventricular y auricular.

Modelo de rata de remodelación cardíaca derecha y arritmia mediante bandas de la arteria pulmonar

Aquí, se presenta el método de inducción de hipertensión arterial pulmonar asociada con fibrosis pulmonar (PF-PH) modelo de rata mediante la inyección de bleomicina en la vía aérea. También proporcionamos un enfoque paso a paso para validar este modelo animal.

Establecimiento y validación de un modelo rata de hipertensión arterial pulmonar asociada a fibrosis pulmonar

Aprenda a realizar cirugía de estenosis auricular izquierda en ratas para estudiar la hipertensión pulmonar del grupo 2. Este modelo inducido con clip de titanio permite investigar la arterialización venosa pulmonar y comprender los mecanismos de esta patología prevalente sin terapias aprobadas.

Estenosis Atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata

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