Implementación de precisión de pruebas mínimas de dosis de eritema (MED) para evaluar la variación individual en la respuesta inflamatoria humana

Las pruebas mínimas de dosis de eritema, o pruebas MED, son una técnica con una larga historia en entornos de fototerapia dermatológicas y clínicas. Y se utiliza principalmente para determinar la menor cantidad de radiación necesaria para producir eritema, o enrojecimiento visible en la superficie de la piel. En este estudio en particular, lo que hemos hecho es desarrollar varias nuevas técnicas y procedimientos que permitan adaptar las pruebas MED para un propósito algo diferente, que es cuantificar con precisión la variación en la activación inflamatoria humana.

La principal ventaja de la dosificación y medición de precisión en las pruebas MED se refiere a la reproducibilidad de los resultados, lo que abre nuevas posibilidades para examinar sistemáticamente otros factores que podrían estar relacionados con la inflamación. Demostrando el procedimiento serán dos estudiantes de doctorado de mi laboratorio, Holly Sullivan-Toole y Corinne Carlton. Comience escoltando al participante a la sala de pruebas.

Explicar el procedimiento de prueba MED al participante y confirmar la comprensión. Coloque el brazalete uno en el antebrazo no dominante. Retire sólo el respaldo protector del papel de cera de las partes laterales, no centrales, del brazalete.

Después de colocar el manguito uno en el lugar de exposición previsto, coloque los puntos de referencia utilizando un marcador permanente para asegurarse de que el manguito dos se situará exactamente en la misma ubicación. Luego, marca la piel en cuatro puntos fuera de los pliegues de cada una de las solapas laterales del manguito uno, la parte superior derecha, superior izquierda, inferior derecha e inferior izquierda. Asegúrese de que las marcas estén lo suficientemente oscuras como para durar 24 horas, por lo que se pueden utilizar para colocar el manguito tres exactamente en la misma ubicación en la cita de seguimiento.

A continuación, utilice un espectrofotómetro calibrado para grabar lecturas en cada una de las seis aperturas abiertas en secuencia. Asegúrese de que el espectrofotómetro se coloca en el centro de las aberturas del manguito, evitando lunares, cicatrices u otras imperfecciones en la medida de lo posible. Por último, registre permanentemente todos los valores de SCI.

Para garantizar lecturas coherentes con el mismo punto de calibración, mantenga el espectrofotómetro en la posición de encendido durante la duración del procedimiento MED y no se apague hasta que se hayan completado las lecturas posteriores a la exposición. Después de la extracción del manguito uno, sitúe el manguito dos en el mismo lugar utilizando los puntos de referencia dibujados en la piel para el manguito uno. Ponte el equipo de seguridad necesario, incluyendo gafas, mangas y guantes a prueba de rayos UV, y asegúrate de que el participante haga lo mismo.

Antes de activar la lámpara, organice el brazo del participante de manera que los rayos UV de la lámpara sean perpendiculares al ángulo del manguito dos en el brazo del participante. Active brevemente la lámpara para ajustar la distancia al manguito dos hasta que el sensor radiómetro lea 270 microvatios por centímetro cuadrado. A continuación, coloque el sensor radiómetro frente a la lámpara UV, paralelo a la superficie de la piel, y lo más cerca posible de la ubicación del manguito dos.

A continuación, retire la primera cubierta de apertura antes de activar la fuente UV. Retire cada ventana en el parche de prueba de dosis de acuerdo con el horario que se muestra aquí, que ilustra los horarios de dosificación separados dependiendo del tipo de piel Fitzpatrick del participante. Active la fuente UV y el cronómetro simultáneamente, y retire cada cubierta de apertura en el manguito dos de acuerdo con el horario de dosificación correcto, que se basa en Fitzpatrick Skin Type.

A continuación, apague la lámpara a la hora exacta especificada por el cronograma de dosificación. No desactive el cronómetro, ya que una serie adicional de lecturas de espectrofotómetro debe recopilarse exactamente siete minutos después de la desactivación de la lámpara, como se describe a continuación. Por último, transcurridos exactamente siete minutos desde la desactivación de la lámpara, registre las lecturas del espectrofotómetro final de cada apertura en el manguito dos.

Comience calibrando el espectrofotómetro en preparación para la cita de seguimiento, 24 horas más tarde. Prepare el manguito tres quitando todas las cubiertas de apertura y dejando el soporte de papel de cera blanca en la parte central del parche. Al colocar el manguito tres en el brazo del participante, retire el respaldo de papel de cera blanco de las dos solapas laterales del parche.

Utilice los puntos de referencia en el antebrazo del participante para colocar el manguito tres en la misma ubicación que los dos parches anteriores. Por último, lea en cada una de las seis aperturas abiertas en secuencia. Estos resultados muestran una respuesta precisa de la piel a las pruebas MED.

Aquí hay datos completos para un único sujeto representativo, desglosados por período de evaluación. Exposición previa, siete minutos después de la exposición y seguimiento las 24 horas. Cada apertura, de dos a seis, recibe un 25% más de energía que la anterior.

Además, se muestran los 72 sujetos, que indican la variación que es probable que se encuentre, a través de diferentes FST. Tal vez los aspectos más importantes de las pruebas de MED de precisión se relacionen con la adherencia al horario de dosificación adecuado para el tipo de piel Fitzpatrick identificado y también mantener constantemente la distancia correcta entre la superficie de la piel y la fuente de luz UV. Parte de nuestra motivación en el desarrollo de estas técnicas es facilitar la investigación futura examinando cómo las respuestas inflamatorias podrían relacionarse con cualquier número de variables potencialmente interesantes, como factores psicológicos, farmacológicos o relacionados con la salud.