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DOI: 10.3791/60135-v
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Aquí describimos y validamos un método para generar consistentemente cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas por humanos robustos y caracterizar su función. Estas técnicas pueden ayudar a desarrollar información mecanicista sobre las vías de señalización, proporcionar una plataforma para la detección de drogas a gran escala y modelar de forma fiable las enfermedades cardíacas.
La reproducibilidad es una preocupación importante cuando se inducen cardiomiocitos derivados de células madre. Usando estos métodos, cardiomiocitos de alta pureza y alta calidad se pueden generar a partir de iPS para su uso en estudios funcionales. La principal ventaja de esta técnica es que es un método simple, fiable, rentable y extremadamente potente para obtener preparaciones purificadas y de alta calidad de cardiomiocitos derivados de iPSC.
Para el enjuague celular, enjuague las células con un mililitro de PBS sin calcio y magnesio durante siete a 10 minutos antes de reemplazar el PBS con un mililitro de medio de paso. Usando un elevador de células, raspe suavemente las células de la parte inferior de los pozos, y use una pipeta estéril de vidrio de dos mililitros para disociar mecánicamente las células separadas. Cuando las células se han levantado en pequeños racimos como visibles bajo el microscopio añadir medio de paso para dividir las células en una proporción de uno a seis.
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