Operación de constricción aórtica transversal con sutura absorbible para obtener hipertrofia miocárdica transitoria

Este protocolo presenta un método mejorado para obtener la hipertrofia miocárdica transitoria, utilizando suturas reabsorbibles, que estimula la disminución de la hipertrofia ventricular izquierda después de eliminar la sobrecarga de presión. Con este protocolo, los investigadores pueden dominar fácilmente el modelo con una menor mortalidad operativa. La demostración del procedimiento estará a cargo de Xiaoxia Huang, un técnico de mi laboratorio.

Comience pellizcando la punta de una aguja de calibre 25 con un soporte para agujas y desafilanda. Luego, pase una sutura absorbible 5/0 a través de esta aguja y curve la aguja roma en un ángulo de 90 grados usando el soporte. Pellizque la punta de otra aguja de calibre 25, luego cúbrala en un ángulo de 120 grados y alise la punta con un soporte para usarlo como espaciador en el paso de ligadura.

Prepare instrumentos quirúrgicos esterilizados, incluyendo una tijera oftálmica, una microtijera, dos pinzas de codo microquirúrgicas, un soporte para agujas y un soporte para microagujas. Para comenzar la cirugía, confirme la anestesia completa del ratón con el reflejo de retirada del pedal. Mantenga el ratón en posición supina fijando los incisivos con una sutura y fijando las extremidades con cinta adhesiva.

Retira el vello del cuello y desinfecta la zona con yodo y alcohol al 75%. Comience la cirugía haciendo una incisión de más de 10 milímetros en la posición de la línea media entre la muesca supraesternal y el tórax. A continuación, separe la piel y la fascia superficial.

Hacer una incisión en el primer espacio intercostal lo más cerca posible del esternón y penetrar sin tapujos, para abrir este espacio con pinzas en el codo. Separe suavemente el parénquima y el timo hasta que el arco aórtico transversal sea visible. Pase una sutura absorbible 5/0 por debajo del arco aórtico entre la arteria braquiocefálica y la arteria carótida común izquierda con una aguja de enganche.

Colocar el espaciador previamente preparado en la aorta transversal y hacer un doble nudo en el espaciador con la sutura. Retire suave pero rápidamente el espaciador y corte los extremos de la sutura. Cierre el primer espacio intercostal y la piel con suturas de nylon 5/0.

Desinfectar la piel de nuevo con alcohol al 75%. Siete días después de la cirugía, coloque al ratón en posición supina, manteniéndolo a 37 grados centígrados, y pegue sus extremidades al electrodo. Retire el vello del pecho y aplique un agente de acoplamiento ultrasónico en el pecho del ratón.

A continuación, acceda al TAC con una sonda de 30 megahercios. Inclina la plataforma hacia el extremo izquierdo. Mantenga la sonda en posición vertical y bájela en el pecho a lo largo de la línea paraesternal derecha.

Ajuste los ejes X e Y en el modo B hasta que el arco aórtico y la constricción sean claramente visibles. Con el modo Doppler, mida la velocidad máxima, las dimensiones y la contractilidad del ventrículo izquierdo. Seleccione los ratones con una velocidad de más de 3000 milímetros por segundo como grupo TAC.

Con una sonda de 30 megahercios, evalúe las dimensiones y la contractilidad del ventrículo izquierdo. Vuelva a colocar la plataforma en posición horizontal, manteniendo la sonda a 30 grados en sentido contrario a las agujas del reloj con respecto a la línea paraesternal izquierda. Obtenga una vista de eje corto del corazón manipulando los ejes X e Y en el modo B.

A continuación, pulse el modo M para mostrar la línea indicadora y adquirir imágenes con Cine Store y Frame Store para la medición posterior de la dimensión de la cámara de BT, el acortamiento fraccional y el grosor de la pared de BT. Las imágenes Doppler de onda pulsada realizadas después de 14 días de TAC mostraron que la velocidad del flujo sanguíneo en la constricción era superior a 3000 milímetros por segundo, a pesar de que se había utilizado una sutura absorbible para constreñir el arco aórtico. El gradiente de presión del flujo sanguíneo después de 14 días de TAC se mantuvo por encima de los 40 milímetros de mercurio.

Curiosamente, no hubo constricción en la cuarta semana después de la cirugía, lo que indica que la sutura reabsorbible se había absorbido por completo. Aquí se muestran los parámetros del ventrículo izquierdo en el grupo de sutura de seda y en el grupo de sutura absorbible en los días cero, 14 y 28 después de la TAC, en las imágenes en modo M. En el día 14 después de la TAC, el grosor de la pared posterior del ventrículo izquierdo al final de la diástole aumentó, mientras que el diámetro interno del ventrículo izquierdo al final de la diástole disminuyó ligeramente.

La fracción de eyección del ventrículo izquierdo no se vio afectada por el uso de suturas reabsorbibles. Aquí se muestra la comparación de la relación entre el peso cardíaco y el peso corporal del grupo de sutura de seda, el grupo de sutura absorbible y el grupo simulado. Los cortes histológicos del corazón mostraron que los cardiomiocitos se agrandaron significativamente desde el día 14 hasta el día 28 en el grupo de sutura de seda, pero en su mayoría retrocedieron el día 28 en el grupo de sutura absorbible.

Al intentar este protocolo, lo más importante es no dañar la pleura parental para evitar el neumotórax. Asegúrese de desafilar la punta de la aguja tanto como sea posible y realice el procedimiento con cuidado. Hay muchas aplicaciones potenciales para este método, como el establecimiento del modelo de precondicionamiento de la hipertrofia miocárdica, la exploración del mecanismo de la regresión de la hipertrofia y la investigación del tiempo de la remodelación reversible del ventrículo izquierdo.