Creación de dos aneurismas digeridos por elastasa sacular con diferente hemodinámica en un conejo

Nuestro protocolo describe una técnica reproducible para crear un modelo de aneurismas de conejo con hemodinámica de muñón y bifurcación y condición de pared degenerada en un solo animal y durante un solo enfoque quirúrgico con bajas tasas de morbilidad y mortalidad y altas tasas de permeabilidad. El modelo permite una comparación directa del curso natural de los aneurismas saculares con respecto al papel de la hemodinámica, así como la prueba de dispositivos endovasculares en dos configuraciones de aneurisma distintas y condición de flujo. El principal inconveniente de este método sigue siendo el mismo que para la creación del modelo clásico de bifurcación y aneurismas de muñón, la necesidad de equipos de laboratorio sofisticados y habilidades microquirúrgicas específicas.

Use un bisturí para hacer una incisión mediana en la piel desde el hueso hioides hasta 1,5 centímetros caudal hasta el manubrio sterni. Prepare el tejido subcutáneo y graso de la incisión medial mientras realiza una hemostasia meticulosa. Libere el músculo esternocéfalo del tejido conectivo adherente y aplique lidocaína tópicamente para evitar el mioclono.

Exponga la arteria carótida común derecha, o CCA, medialmente del músculo esternocéfalo, y manténgala húmeda con hisopos húmedos. Prepare las partes lateral y proximal del músculo esternocéfalo y retraigalo medialmente con un asa de vaso para exponer el CCA. Identifique la vena yugular externa y protéjala con un microhisopo húmedo.

Diseccionar el tejido conectivo cuidadosamente a lo largo del CCA hasta la bifurcación del tronco braquiocefálico para exponer la arteria. Si están emergiendo pequeñas ramas de la arteria, coagularlas con el cauterizador. Aplicar dos clips temporales, con el primero en el origen del CCA y el segundo dos centímetros distal del mismo.

Coloque una almohadilla de goma debajo del recipiente y enjuague con clorhidrato de papaverina para vasodilatación. Retire la adventicia con cuidado usando microtijeras. Realice una arteriotomía debajo del clip distal con un catéter de calibre 22 cuatro e inserte el catéter caudalmente hasta el clip proximal.

Enjuague el segmento intraluminalmente con cloruro de sodio heparinizado hasta que no haya sangre visible. Luego fije el catéter con una ligadura 4-0. A través del catéter, inyecte de 0.1 a 0.2 mililitros de elastasa en el segmento de la arteria e incube durante 20 minutos.

Después de 20 minutos de tiempo de incubación con elastasa, limpie la solución de elastasa y cambie la jeringa para enjuagar el segmento de la arteria aproximadamente 10 veces con solución salina al 0,9%. Aplicar dos ligaduras, con la primera a cinco milímetros distal del clip proximal y la segunda justo proximalmente debajo de la arteriotomía. Corte el vaso a unos tres milímetros por encima de la primera ligadura y una vez más entre la segunda ligadura y el clip distal.

Mantenga este injerto autólogo en una solución heparinizada hasta la creación del aneurisma de bifurcación. Abra con cuidado el primer clip proximal y mida el aneurisma. Para crear un aneurisma de bifurcación, retire la adventicia con cuidado y haga una incisión longitudinal de aproximadamente dos milímetros lateralmente en el muñón del CCA derecho.

Aplique dos clips temporales en el CCA izquierdo para delimitar el segmento de aproximadamente un centímetro y retire la adventicia en el medio. Realizar una arteriotomía con una aguja de calibre 23. Luego, enjuague el segmento con cloruro de sodio heparinizado.

Agrandar la arteriotomía usando microtijeras a unos cuatro a cinco milímetros para permitir la sutura del CCA derecho y la bolsa del aneurisma. Para realizar la anastomosis, suture la pared posterior proximal del romo carotídeo derecho con cinco puntos de sutura, comenzando en el borde proximal de la arteriotomía en el CCA izquierdo. Luego, suture la parte posterior de la bolsa del aneurisma con cuatro a cinco puntos de sutura, comenzando en el borde distal de la arteriotomía en el CCA izquierdo.

Continuar con la parte posterior distal al nivel de la incisión de la boca de pez para suturar con la parte posterior vertical del injerto de aneurisma con tres puntos de sutura. Suture la parte frontal de la incisión de la boca del pez con tres puntos de sutura, comenzando hacia arriba y moviéndose hacia abajo. Termine con la sutura frontal entre el CCA izquierdo y el lado frontal del injerto de aneurisma y el CCA derecho con aproximadamente seis puntos de sutura.

Antes de terminar la anastomosis, enjuague los vasos con solución salina heparinizada al 0,9% por vía intraluminal. Retire el clip en el CCA derecho mientras ejerce algo de presión sobre la anastomosis con los micro hisopos para la hemostasia. Luego, continúe retirando el clip distal del CCA izquierdo.

Si no hay sangrado importante, continúe sacando el clip proximal en el CCA izquierdo para permitir el flujo sanguíneo. En el seguimiento, la permeabilidad del aneurisma se confirmó mediante angiografía por resonancia magnética. Se muestra una secuencia TOF tridimensional adquirida con una resonancia magnética de tres teslas enfocada en las arterias del cuello.

El aneurisma del muñón se observa en la arteria subclavia derecha, y el aneurisma de bifurcación se observa en la bifurcación creada por la anastomosación del CCA derecho en la arteria subclavia izquierda. La permeabilidad del aneurisma también se confirmó mediante inspección macroscópica después de la extracción de tejido. Las ranuras principales en el clip indican un milímetro y las ranuras menores indican 0,5 milímetros.

El análisis microscópico de los aneurismas de muñón y bifurcación se realizó después de teñir las muestras con hematoxilina-eosina. Dos pasos son críticos durante la cirugía, primero, la exposición y disección de la arteria carótida derecha hasta el tronco braquiocefálico, y segundo, la protección de estructuras vitales como la tráquea, la vena yugular y el nervio laríngeo.