Generación y caracterización del infarto de miocardio del ventrículo derecho inducido por ligadura permanente de la arteria coronaria derecha en ratones

El ventrículo derecho es más resistente a la isquemia que el izquierdo. Se introdujo una técnica para generar un modelo de infección ventricular derecha, que puede aclarar el mecanismo fisiopatológico durante el desarrollo de un infarto ventricular derecho. Localizamos la arteria coronaria derecha a través del costeo vascular y definimos el área de ligadura que es crítica para generar con éxito un modelo de infarto ventricular derecho de ratón.

Demostrando el procedimiento estará Linhai Ruo, un médico de cartel de mi laboratorio. Coloque el decúbito supino del ratón sobre una almohadilla y asegure la profundidad de la anestesia por la ausencia de una respuesta de retirada del dedo del pie. Fijar sus incisivos con una sutura e inmovilizar las extremidades con cinta adhesiva.

Retire el vello del cuello a xifoide con una crema depilatoria. Saque la lengua ligeramente con pinzas, levante la mandíbula con un depresor de lengua para exponer la glotis. Y realizar la intubación intratraqueal insertando una cánula de calibre 22 en la glotis.

Conecte los electrodos de electrocardiografía a las extremidades del ratón correctamente y registre el ECG. Para abrir el pecho, haga una incisión de un centímetro de largo en la piel, paralela a la tercera costilla derecha con tijeras oftálmicas. Determine el tercer espacio intercostal nuevamente y asegure un espacio adecuado de acuerdo con el ángulo del esternón.

Separe y corte los músculos pectoral mayor y pectoral menor con tijeras y micro pinzas por encima del tercer espacio intercostal. Después de eso, separe sin rodeos el músculo intercostal con pinzas de codo para exponer el campo quirúrgico, luego incise el pericardio. Levantar la aurícula derecha con algodón estéril y ligar la arteria coronaria derecha con un estéril 8-0 hilo de nylon, con un rango de ligadura de tres a cinco milímetros.

Después de ligar la arteria coronaria derecha, observe el monitoreo del ECG de plomo 3, que muestra la elevación del segmento ST. Retire el algodón y sutura los músculos y la piel con un hilo de nylon estéril 5-0. Luego coloque el mouse en la almohadilla térmica para promover la recuperación.

Coloque el ratón en posición supina en una plataforma ultrasónica para la fijación animal y el funcionamiento ultrasónico. Pegue sus garras al electrodo para obtener una grabación de ECG, a través de un sistema conectado a la máquina ultrasónica. Retire el vello del pecho del ratón con una crema depilatoria y aplique gel de ultrasonido en la piel del pecho.

Ajuste la plataforma a la posición horizontal. Orientar el transductor paralelo a la pierna izquierda y obtener la imagen del eje largo del ventrículo izquierdo. Gire la sonda 90 grados en el sentido de las agujas del reloj para obtener la vista de acceso corto del ventrículo izquierdo.

Presione el botón cine store para guardar las imágenes. Incline la parte superior izquierda de la plataforma en el punto más bajo. Desplácese hacia abajo del transductor verticalmente, manteniendo su posición sobre la parte superior del abdomen y por debajo del diafragma del ratón en modo B.

Ajuste ligeramente la posición de la plataforma girando sus ejes X e Y hasta que el ventrículo derecho, la aurícula derecha, la aurícula izquierda y el ventrículo izquierdo se vean en la pantalla. Y guarde la imagen presionando el botón cine store o frame. Presione M-Mode.

Después de que aparezca la línea indicadora de dos X, ubique la línea indicadora en el orificio de la válvula tricúspide, para obtener el movimiento del plano anual tricúspide. Pulse M-Mode de nuevo. Presione el botón tienda de cine o tienda de marcos para guardar datos e imágenes.

Incline el lado izquierdo de la plataforma en el punto más bajo. Coloque la sonda en un ángulo de 30 grados con respecto al eje horizontal a lo largo de la línea axilar anterior derecha. Gire los ejes X e Y de la plataforma para mostrar el ventrículo derecho.

Pulse el botón M-Mode y localice la línea indicadora en el punto hiperecoico del tabique, para obtener la imagen M-Mode de la interfaz del ventrículo derecho. Pulse de nuevo el botón M-Mode. Presione el botón cine store para guardar la imagen.

Realizar intubación traqueal y establecer el parámetro del ventilador animal. Haga una incisión bilateral de un centímetro en la piel por encima del proceso xifoide y transecte el diafragma y la costilla con tijeras oftálmicas para exponer el corazón. Punción de la pared libre del ventrículo derecho con una aguja calibre 32.

Retire la aguja y presione la herida con algodón para detener el sangrado. Inserte la punta del catéter en el ventrículo derecho a través del sitio de punción y empuje el catéter hacia adelante, lentamente. Ajuste la posición de la punta para obtener una forma típica de onda de presión RV, que se muestra en un monitor y sistema de grabación.

Después de 10 minutos de estabilización, registre los datos de la presión arterial sistólica de RV, rv y presión diastólica, y la presión ventricular derecha máxima de RV aumentando la tasa de disminución. Haga clic en el botón de selección para seleccionar los ciclos cardíacos para el cálculo. Y luego haga clic en el botón analizado para calcular los valores medios de los ciclos seleccionados.

Coloque el animal en decúbito supino en la almohadilla e intuba para ventilación artificial. Abra el pecho con tijeras quirúrgicas y exponga el corazón. Haga una muesca de tres milímetros con tijeras oftálmicas en las aurículas derechas y perfunda el corazón con 5 ml de solución salina normal a través del ápice cardíaco con un inyector.

Bloquee la sangre de la aorta con una pinza aórtica. Y perfundir 0.1mL de 1 mg/mL de nitroglicerina, a través del ápice cardíaco con un inyector para dilatar la arteria coronaria. Perfunda el corazón con un reactivo de yeso de 1 ml a través del ápice cardíaco y espere de dos a tres horas.

Erosionar el corazón con hidróxido de sodio al 50% durante dos o tres días. Y retire el tejido muscular o el tejido conectivo enjuagando con solución salina normal. Después de la ligadura RCA, se observó elevación del segmento ST en la derivación 3 del ECG.

La tinción de clorito 2, 3, 5-trifeniltetrazolio mostró que el área del infarto representa el 45% de la pared libre de RV, 24 horas después de la operación. La ecocardiografía mostró que la dimensión interna del RV al final de la diástole, aumentó en el RV1. Y fue más de dos veces en el grupo Sham.

El acortamiento de la fracción RV, la fracción de eyección RV y la excursión sistólica del plano anular tricúspide fueron significativamente menores en el RVI. La relación rv por área de VI aumentó en aproximadamente un 50% La medición hemodinámica de RV mostró que en el grupo de RV, la presión arterial sistólica del ventrículo derecho, la tasa máxima y mínima de aumento de la presión de RV, la contractilidad de RV, fueron significativamente menores. La presión ventricular derecha y diastólica y la constante de tiempo exponencial del índice de relajación de RV, fueron considerablemente más significativas que las del grupo Sham.

Un aneurisma de RV era visible en el área infartada. La relación peso cardíaco a peso corporal y la relación peso cardíaco a longitud tibia en el grupo RVI fueron ligeramente mayores. La tinción de Masson indicó fibrosis significativa en la pared libre de RV.

Y rara vez, la fibrosis ocurrió en el tabique del grupo RVI. En contraste, algunos cardiomiocitos sobrevivientes estaban en el área del infarto. Es crucial exponer el área de ligadura y agarrar la profundidad de la aguja insertada y el rango para aumentar el éxito y las tasas de supervivencia.