Desarrollo y evaluación de un modelo de rata de defectos de cartílago de espesor total

Este protocolo no solo imita la aparición y el desarrollo de la FTCD clínica, sino que también proporciona un modelo animal fiable para evaluar los tratamientos terapéuticos contra la FTCD. Pero esta técnica es fácil de realizar y permite observar el crecimiento inmediatamente después de la lesión. Esta técnica puede imitar con éxito los defectos clínicos del cartílago, proporcionando una plataforma para estudiar el proceso patológico de los defectos del cartílago y desarrollar los fármacos terapéuticos correspondientes.

Este método podría aplicarse para estudiar defectos traumáticos del cartílago, es decir, la artrosis postraumática. Al probar esta técnica por primera vez, es importante flexionar la tibia y el peroné en un ángulo de 90 grados para exponer completamente la cóclea del cóndilo femoral y mantener la broca perpendicular a la superficie del cartílago. Comience colocando una rata anestesiada en la mesa de operaciones en posición supina.

Coloque un paño estéril sobre la rata, exponiendo la articulación de la rodilla afeitada y desinfectada. Con una hoja de bisturí número 11, haga una incisión vertical de un centímetro en el centro de la articulación de la rodilla. Y corte la cápsula articular y el tendón del cuádriceps femoral a lo largo del borde medial de la rótula.

A continuación, gire la rótula hacia afuera y flexione la tibia y el peroné en un ángulo de 90 grados, para exponer el cóndilo femoral coclear. Con una broca circular de 1,6 milímetros, haga un defecto de cartílago de 0,1 milímetros de profundidad de espesor completo en la cóclea del cóndilo femoral. Limpie el sitio quirúrgico con bolas de algodón empapadas en solución salina al 0,9 % y reemplace la rótula.

Luego, manteniendo la rodilla en una posición extendida, sutura la incisión capa por capa con suturas 4-0 no absorbibles. Para medir el umbral de extracción mecánica o MWT de las ratas, coloque al animal en una sola cámara de plástico sobre una plataforma de malla de alambre. Coloque la base de malla de alambre a 50 centímetros por encima de una mesa.

Comience la medición de MWT después de 30 minutos de adaptación. A continuación, presiona el filamento Von Frey perpendicularmente sobre la superficie de la maceta de la pata trasera de la rata. A continuación, dobla el cepillo durante dos segundos evitando la parte más gruesa de la parte central de la pata.

Aumente el peso del estímulo gradualmente desde 4 gramos, hasta que se produzca una respuesta positiva como retirar o lamer las patas. 3 días después del modelado, las ratas en el grupo modelo mostraron una reducción de MWT en comparación con el grupo simulado. Lo que sugiere hiperalgesia en el grupo modelo.

El MWT del grupo modelo se mantuvo bajo incluso después de 17 días. Indicativo de la duración de la sensibilidad al dolor. La tinción histopatológica del grupo simulado mostró una clara superficie articular y cartilaginosa intacta, una distribución uniforme de los condrocitos y una alta expresión de colágeno tipo II.

Por el contrario, el grupo modelo demuestra superficies de cartílago deprimidas, pérdida de condrocitos, aumento de la expresión de la metaloproteinasa de matriz MMP13 y disminución de la expresión de colágeno tipo II. Lo más importante que hay que recordar es que la rótula debe reducirse antes de suturar.