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Biology
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JoVE Journal Biology
Whole Genome Sequencing for Rapid Characterization of Rabies Virus Using Nanopore Technology

Secuenciación del genoma completo para la caracterización rápida del virus de la rabia mediante tecnología de nanoporos

Full Text
6,606 Views
10:26 min
August 18, 2023

DOI: 10.3791/65414-v

Criselda Bautista1,2, Gurdeep Jaswant1,3,4,5, Hollie French1,6, Kathryn Campbell1, Rowan Durrant1, Robert Gifford1,6, Grace S. N. Kia7,8, Brian Ogoti3,9, Katie Hampson1, Kirstyn Brunker1,6

1School of Biodiversity, One Health & Veterinary Medicine,University of Glasgow, 2Research Institute for Tropical Medicine, 3University of Nairobi, Institute of Tropical and Infectious Diseases, 4Tanzania Industrial Research Development Organization, 5Ifakara Health Institute, 6MRC-University of Glasgow Centre for Virus Research, 7Department of Veterinary Public health,Ahmadu Bello University, 8African Centre of Excellence for Neglected Tropical Diseases and Forensic Biotechnology,Ahmadu Bello University, 9University of Nairobi, Kenya and Center for Epidemiological Modelling and Analysis,University of Nairobi

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a cost-effective workflow for characterizing rabies virus (RABV) genomes using nanopore technology aimed at enhancing local-level viral surveillance. The approach enables the identification of circulating RABV lineages and integrates genomic data into regional phylogenies to support effective rabies control measures.

Key Study Components

Research Area

  • Pathogen genomics
  • Viral surveillance
  • Rabies control strategies

Background

  • Need for improved surveillance in low- and middle-income countries
  • Challenges in obtaining high-quality genome sequences
  • Importance of local expertise in data interpretation

Methods Used

  • Nanopore sequencing technology
  • Rabies virus genomic characterization
  • Protocols for sample processing and sequencing

Main Results

  • Effective whole genome sequencing from diverse sample qualities
  • Empowerment of local scientists for surveillance purposes
  • Availability of tools for data analysis to support epidemiological insight

Conclusions

  • The study successfully demonstrates a scalable method for rabies virus genomic analysis.
  • Findings have significant implications for rabies elimination strategies and local public health initiatives.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of this research?
To develop a rapid genomic workflow for rabies virus surveillance to aid local control efforts.
Why is nanopore technology used?
It offers portability, cost-effectiveness, and the ability to sequence at the sample source.
What challenges are addressed in this study?
Challenges include poor sample quality and limited expertise in genomic data analysis.
How does this research empower local scientists?
By providing a complete protocol for genomic surveillance and associated analytical tools.
What are the broader implications of this research?
It could enhance rabies control strategies and inform public health policy in affected regions.

Aquí, presentamos un flujo de trabajo rápido y rentable para caracterizar los genomas del virus de la rabia (RABV) utilizando tecnología de nanoporos. El flujo de trabajo está destinado a apoyar la vigilancia genómica a nivel local, proporcionando información sobre los linajes circulantes del RABV y su ubicación dentro de las filogenias regionales para guiar las medidas de control de la rabia.

Nuestra investigación utiliza la genómica avanzada para mejorar la vigilancia de patógenos en países de ingresos bajos y medios. Y esto nos ayuda a empoderar a los investigadores locales para que respondan a cinco grandes preguntas: quién, qué, dónde, por qué y cuándo. Y esto puede servir de base para soluciones prácticas sobre el terreno.

Utilizamos la tecnología de nanoporos para descentralizar la secuenciación. Su facilidad de uso, portabilidad y costos más baratos en relación con otras plataformas lo hacen ideal para entornos de bajos recursos. Y la capacidad de secuenciar rápidamente en la fuente de la muestra significa que podemos hacer vigilancia en la interfaz entre el entorno animal y humano.

Nos enfrentamos a desafíos en la obtención de genomas completos a partir de muestras de calidad variable. A menudo, las comunicaciones procedentes de zonas remotas se transportaban en malas condiciones de almacenamiento. Y además, tenemos una experiencia limitada en herramientas bioinformáticas que serían útiles para interpretar datos.

Así que estas herramientas serían como MADDOG y DRUG-V GLUE. Esto podría utilizarse para interpretar los datos de forma universal y ayudar a iniciar el control. Estamos tratando de demostrar cómo optimizan el protocolo para secuencias rápidas o para secuencias genómicas completas de rabia y ver cómo se puede adaptar y usar en los países de bajos ingresos para la secuenciación de la rabia con el fin de responder a diferentes preguntas sobre cómo está circulando realmente, qué está circulando y cuándo está circulando.

Y esta información es necesaria para las estrategias de eliminación de la rabia. La vigilancia genómica viral es ahora más accesible. Sin embargo, la orientación para el análisis y la interpretación de datos para los esfuerzos de control local es más limitada.

Nuestro protocolo ofrece una canalización de extremo a extremo, lo que permite a los científicos locales contar con capacidades de vigilancia de primera línea. La mayor disponibilidad de genomas virales y métodos para interpretar estos datos permite a los investigadores traducir la información epidemiológica en información procesable para los ministerios gubernamentales o los programas de control de enfermedades y guiar el proceso de toma de decisiones.

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Secuenciación del genoma completo caracterización rápida virus de la rabia tecnología de nanoporos datos genómicos seguimiento de la transmisión propagación geográfica enfermedades infecciosas países de ingresos bajos y medianos rabia mediada por perros murciélagos vampiros salud pública preocupaciones económicas flujo de trabajo de muestra secuencia e interpretación tecnología de nanoporos recolección de muestras diagnóstico de rabia flujo de trabajo de secuenciación del genoma completo diseño y optimización de cebadores reacción en cadena de la polimerasa múltiple (PCR) secuenciación Preparación de bibliotecas llamadas de bases en vivo y fuera de línea designación de linaje genético análisis filogenético implementación de flujos de trabajo validación de tuberías controles negativos herramientas genómicas (GLUE MADDOG) filogenias regionales y globales

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